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3´-RACE Kit
一年
北京百奥莱博科技有限公司
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特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应3´RACE试剂盒厂商,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:3´RACE试剂盒厂商
英文名:3´-RACE Kit
编号:BTN101104
规格:10次
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
研究真核基因的最基础的工作之一就是确定其转录终止位点,目前最通用的方法是3´-RACE法,RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)是Frohman发明的、通过PCR快速克隆cDNA末端的技术,它在不建立cDNA文库的前提下,利用已知cDNA序列设计引物,通过往两端延伸和扩增获得其3´-端序列。本试剂盒就是根据3´-RACE原理而开发。RACE的原理如下图:
产品特点:
1. 即开即用,客户不需要单独准备各种材料。
2.反应条件经过精心优化,包括使用无RNase H活性的MMLV和优化的引物。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
MMLV逆转录酶-RI混合物(RNase H-,200U/μL) | 10μl |
MMLV Buffer(含dNTP) | 50μl |
PCR MagicMix 2.0(含酶和染料) | 1.5ml |
3´-RACE引物A(10μM) | 10μl |
3´-RACE引物B(10μM) | 100μl |
3´-RACE引物C(10μM) | 100μl |
RNase-Free水 | 1ml |
说明书 | 1份 |
成分 | 用量 |
Poly(A)RNA(或总RNA) | 0.2-2μg(5μg) |
3´-RACE引物A(10μM) | 1μL |
MMLV Buffer(含dNTP溶液) | 5μL |
RNase-Free水 | 补至19μL |
合计 | 19μL |
成分 | 梯度1 | 梯度2 | 梯度3 | 梯度4 |
稀释后的cDNA | 1 | 5 | 10 | 15 |
基因专一性引物A(10μM) | 2.5 | 2.5 | 2.5 | 2.5 |
3´RACE引物B(10μM) | 2.5 | 2.5 | 2.5 | 2.5 |
98℃ 5分变性RNA-cDNA杂交链,短暂离心后再加入下列成分 | ||||
PCR MagicMix 2.0 | 25 | 25 | 25 | 25 |
RNase-free水 | 19 | 15 | 10 | 5 |
合计 | 50 | 50 | 50 | 50 |
成分 | 用量 |
PCR MagicMix 2.0 | 25μl |
上步得到的PCR反应液(稀释20倍后) | 1μl |
基因专一性引物B(10μm) | 2.5μl |
3´RACE引物C(10μm) | 2.5μl |
超纯水 | 补至50μL |
成分 | 规格 |
转录预配液(2×) | 0.5mL |
阳性对照DNA(1.3 Kb片段) | 20μL(10ng/μL) |
T3 RNA聚合酶混合液 | 50μL |
RNase-free水 | 1mL |
说明书 | 1份 |
成分 | 加入量 | 备注 |
DNA模板 | xμl | 总量在50 ng-1μg(如果模板是PCR片段,建议用50ng左右;如果模板是质粒DNA,建议用1μg左右;如果用本产品提供的阳性对照,建议用4μL) |
转录预配液,2× | 10μl | 需室温时使用 |
T3 RNA聚合酶混合液 | 1μl | 本成分还含其他促进剂,所以是混合物 |
RNase-free水 | 补水到20μL |
成份 | 规格 |
T3 RNA聚合酶 | 50μL(20U/μL) |
5×转录缓冲液 | 0.25mL |
使用手册 | 1份 |
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购3´RACE试剂盒厂商。
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