北京现货大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-R

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名称：北京现货大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞优惠价
编号：BTN140378
品牌：百奥莱博
规格：10*100μl
产地：国产|进口
本产品来源于Stratagene公司的BL21-Gold菌株，缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶，从而减少对重组蛋白的降解，补充大肠杆菌缺乏的4 种稀有密码子(AGA、AUA、CCC、CUA)对应的tRNA(argU、ileY、proL、leuW)，提高外源基因，尤其是富含AT-或GC-的真核基因在原核系统中的表达水平。该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3 区(DE3 区含有T7 噬菌体RNA聚合酶)，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达，同时具有四环素，*霉素，链霉素，壮观霉素抗性。本产品由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。
菌株基因型为：F- ompT hsdS(rB-mB-)dcm+ Tetr galλ(DE3)endA Hte [argU proLCamr] [argU ileY leuW Strep/Specr]。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以100μl感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含有相应抗生素的LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm ，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
4. 诱导时，IPTG浓度可选(0.1-2mM 均可)。
5. 为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。

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ARB12111 大鼠可溶性P选择素(sP-Selectin)酶联免疫定量检测 Rat soluble P-Selectin,sP-Selectin ELISA KIT
BL0867 羊抗人免疫血清
Caspase 6 活性检测试剂盒   20T|50T|100T
ARB12186 大鼠白细胞介素3(IL-3)免费代测 Rat interleukin3,IL-3 ELISA KIT
风味酶 Tunicamycin from Streptomyces lysosuperficus
BL1361 红细胞保存液(阿氏液)
ARB12078 大鼠内皮素1(ET-1)Elisa定量检测 Rat endothelin 1,et-1 ELISA KIT
ARB12791 小鼠β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA代测服务 Mouse interferon β,ifn-β/ifnb ELISA KIT
ARB10272 人干扰素调节因子(IRF)Elisa方法检测 Human interferon regulatory factor,irf ELISA KIT
抗坏血酸氧化酶 Stavudine 9029-44-1
BL0910 FITC标记兔抗Avidin抗体
LB Lennox培养基   500ml
PY02-088  马丁氏肉汤  250克  
ARB12535 大鼠胰岛细胞抗体(ICA)酶标法分析 Rat islet cell antibody,ica ELISA KIT
ARB13234 小鼠淋巴细胞因子Elisa方法检测 Mouse lymphocyte factor ELISA KIT
PY04-036  *啶酮酸(III)  5mg/支×10支  每支添加于225ml缓冲蛋白胨水(BPW)培养基中制成MBP，用于沙门氏菌和李斯特氏菌前增菌培养
ARB11766 人腺苷酸环化酶1(AC-1)ELISA代测服务 Human adenylyl cyclase 1,ac-1 ELISA KIT
ARB10097 人EB病毒IgG(EBv IgG)检测服务 Human epstein-barr virus igg,ebv igG ELISA KIT
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*检测试剂盒(Calmagite微板法)   100T
SJ0298 Glufosinate-ammonium 草铵膦
达旦黄 Carboxypeptidase Y(Yeast) 1829-00-1
司盘20 Ammonium formate 1338-39-2
ARB12548 大鼠胰脂肪酸酶免分析 
PY02-225  *化*多粘菌素B肉汤基础(SCPB)  250克  
ARB11702 人雄烯二酮(ASD)ELISA检测服务 Human androstenedione,asd ELISA KIT
苏丹黑B Evans blue 4197-25-5
L-组*酸盐*(代"酸")盐 Mouse percoll 645-35-2
Tween20/TBS溶液(20×TBST,pH8.0)   500ml
74-79-3 L-Arginine  L-精*酸
D-地衣酸 Phenosafranine 7562-61-0
ARB13734 兔脂蛋白α(Lp-α)elisa测定使用说明书 Rabbit lipoprotein α,lp-α elsia kit 
ARB10578 人早老素2(PS-2)含量检测 Human presenilin 2,ps-2 ELISA KIT
N-辛酰基-N-甲基葡糖胺 Pyridoxal hydrochloride 85316-98-9
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·电泳级尿素
编号：BTN100873
英文名称：Urea
规格：100g
本产品是电泳级尿素干粉，专门用于尿素-PAGE胶的制备。PAGE电泳中尿素的作用是增加膜蛋白的溶解度，抑制核酸样品核苷酸碱基配对，使其迁移率与核酸序列和碱基组成无关，此外它还能提高多肽在SDS PAGE中的分辨率。它主要用于下列实验：
1. 核酸的尿素-PAGE变性电泳。
2. 多肽的SDS-PAGE电泳。
3. 膜蛋白的SDS-PAGE电泳

储存条件：常温运输及保存，有效期两年。

·昆虫RNA柱式提取试剂盒
编号：BTN81220
英文名称：Insect RNA column Extraction Kit
规格：50次
本试剂盒是专门用于从富含多糖、糖蛋白、粘蛋白的动物样品(尤其是昆虫样品)中提取总RNA的试剂。

试剂盒特点：
1. 操作简单快速，处理一个样品只需要约十分钟。
2. RNA纯度高，平均 OD260/280一般都在2.0左右，能够有效去除大多数昆虫中的多糖污染。
3.适用于各种昆虫组织，每100mg组织能提取到20-30μg 总RNA。
4. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。
5.一站式，提供RNase-free的样品收集管。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	15ml
溶液C	50ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
RNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存(RNA洗脱液最好4℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1. 将50-300mg昆虫组织放入10-15mL塑料离心管中，加入1mL溶液A，然后用匀浆器匀浆5-20秒。匀浆时会产生泡沫，但不影响提取效果。也可以使用液氮砚磨法破碎昆虫组织，砚磨完后加入1mL溶液A。
注意：溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
2. 将匀浆物或砚磨物转移至干净的1.5mL塑料离心管中(可以不必转移非液体的细胞碎片)。
3.在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备*仿，在振荡器上振荡30秒混匀，此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
4.室温12000 rmp离心3～5分钟，两相间将有约5-10毫米厚的细胞破碎物。
5. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中，下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。最好留下100μl上清液不取。
6. 加入等体积的溶液C，充分颠倒混匀。
7. 将一半的溶液转移到离心吸附柱中，12000 rmp室温离心半分钟，弃穿透液。
8. 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中，12000 rmp室温离心半分钟，弃穿透液。
9. 加0.7mL通用洗柱液，室温12000 rmp离心半分钟，弃穿透液。
10. 加0.3mL通用洗柱液，室温12000 rmp离心半分钟，弃穿透液。此步可以省略。
11.室温12000 rmp离心半分钟。此步十分重要，否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
12. 将离心吸附柱转移到RNase-free收集管中，加入50-100μl RNA洗脱液，室温放置1-2分钟。
13. 12000 rmp室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
14. RNA完整性的电泳检测：如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。注意：大部分昆虫的28S RNA被切割成两个小的片段，彼此用*键相连，所以在甲醛变性胶中，没有28S带出现(文献见：Eva C. Winne*(代"b")eck，Craig D. Millar and Guy R. Warman，Why does insect RNA look degraded? Journal of Insect Science: Vol. 10：1-7)
15. RNA产量产率测定：将5-10μl RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度X体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
16. RNA纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。

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