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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
555
- 英文名:
Western Blocking Solution
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京Western封堵液现货,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京Western封堵液现货
规格:250mL
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:Western Blocking Solution
本产品含有鲑鱼血清,不与哺乳动物抗体发生相互作用,背景极低或不产生背景。无哺乳动物蛋白,降低非特异相互作用风险。可用缓冲液按1:10稀释后使用。
产品特点:
1.作为通用的Western 封闭试剂使用。
2.保证低背景。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
北京Western封堵液现货正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·生物素化蛋白L
编号:BTN131101
英文名称:Biotin-Protein L
规格:0.5mg
本产品为生物素标记的蛋白L,可以结合含有特别kappa轻链的所有种类的IgG(IgG,IgM,IgA,IgE和IgD),与kappa轻链结合而不干扰抗原的结合。其还可以结合单链抗体可变区基因片段(ScFv)。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·柱式细菌RNA提取试剂盒
编号:BTN80103
英文名称:Bacterial RNA Column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是细菌RNA提取试剂盒(BTN51102)的柱式升级产品,用于快速从各种常见的革氏阴性细菌中提取总RNA。如需提取革氏阳性细菌的RNA,可以选择柱式真菌RNA提取试剂盒。跟细菌RNA提取试剂盒相比 它具有下列特点:
1. 操作更加简单快速,省去了最费时的离心步骤。
2. 所得 RNA 纯度更高,OD260/OD280一般在 2.0左右.
3.一般不含基因 DNA污染。
4.适用于各种革氏阴性细菌。
5. 性价比高于进口同类产品。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 30ml |
| 溶液B | 20ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
下面的操作步骤是针对在 1.5mL塑料离心管中进行的微量提取的。
1. 新鲜配制裂解液。将溶液A和溶液B 按 1:1的比例混合。注意:溶液A和溶液B 混合后必须立即使用,不要放置,否则会产生沉淀。一次处理1.5mL左右的细菌需要0.6mL新鲜配制的裂解液(即0.3mL溶液A和0.3mL溶液B的混合液)。
2.在 1.5mL塑料离心管中离心收集0.2-1.5mL 新鲜细菌。注意:由于细菌RNA 半衰期十分短,所以,必须使用最新鲜的、处于对数生长期的细菌。
3. 吸尽液体培养基,加入0.6mL 新配制的裂解液,用枪充分吹打细菌沉淀,确保细菌全部裂解,没有块状物。
4. 将裂解物转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中,然后加入0.2倍体积的自备*仿(1mL 裂解物需 0.2mL *仿),振荡器上充分振荡混均 30秒。
5. 12000~15000g室温离心 3~5分钟。
6. 将上清液(约0.6-0.8mL)转移到离心吸附柱中。注意:离心后下层有 机相和中间层含有 DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下 100μL上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的丝状 DNA。
7. 12000~15000g室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
8. 加 0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。但如果样品 OD260/280 比值不高,可以再用0.3mL通用洗柱液重复此步一次。
9.室温 12000~15000g离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响 RNA的使用。
10. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中,加入50-100μL RNA 洗脱液。
11.室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
12. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做 Northern杂交,强烈建议用户使 用甲醛变性胶进行 RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
13. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之 间)检测其在 OD260的光吸收。通过光吸收可以得出 RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出 RNA的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
14. RNA 纯度测定:无污染的总 RNA的OD260/OD280一般在 1.8-2.1 之 间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分 别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响 RT-PCR等反应。
疑难解答:
Q:上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗?
A:不是。用 TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳 RNA时容易产生此现象,百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基 互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用 TBE作电泳液的话)形成的复合物,加 RNase处理后,这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象,建议 最好使用甲醛变性胶电泳和RNA 专用上样液(如我们的RNAload)。
Q:如何确认和去处除污染的基因组 DNA?
A:如果怀疑有 DNA污染,可以用 RNase处理 RNA样品,然后再电泳。如 果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组 DNA污染。进一步确认可以使用 PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用百奥莱博的非酶的DNA 去除剂 DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一 般都有残留 RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用手册进行操作。
北京Western封堵液现货关键词:Western封堵液,Western Blocking Solution,BTN131104
·柱式凝固血液DNA提取试剂盒
编号:BTN71204
英文名称:Coagulated blood DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是凝固血液DNA提取试剂盒(BTN71002)的升级产品,专门用于从新鲜或冻存的凝固全血(包括人和禽类)中提取基因组DNA。
产品特点:
1. DNA更加纯净,OD260/280在1.8-2.0之间,可直接用于PCR、酶切、杂交等。
2. 操作更加简单快捷,比凝固血液DNA提取试剂盒快十分钟以上。
3. 每克新鲜凝固全血DNA产量为20-50μg DNA。
4. 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 50ml |
| 溶液C | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 65℃预热溶液A,待其沉淀溶化后,充分混匀,取1mL到10mL或15mL塑料离心管中并将离心管放置于65℃待用。
2. 称取凝固血液0.1-0.5 g,加入到预热的溶液A中短暂匀浆。匀浆过程中将产生大量泡沫,属于正常现象。
注意:如果是干的血块,用量不要超过0.2g,但需将干血块剪成微小的碎片。
3. 将匀浆液置于65℃水浴保温5分钟,然后将不超过0.75mL的匀浆液上清转移到新的1.5mL离心管中。
注意:尽量不要转移凝固血液碎片。
4.在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒充分混匀后冰浴5分钟。
5. 12000~15000g室温离心3分钟,将上清液转移到新的1.5mL离心管中。
注意:如果上清液呈红色,属于正常现象。
6. 加入0.2mL的自备*仿,震荡器上充分振荡30秒混匀。
7. 12000~15000g室温离心3分钟,两相交界面将有白色膜状物。将不超过0.6mL的上清液小心转移到新的1.5mL离心管中。
8. 加入1.5倍体积的溶液C,上下颠倒30秒混匀后分两次转移到离心吸附柱中,每次转移后需要12000~15000g离心半分钟并弃穿透液。
9.在离心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液,12000~15000g离心半分钟。
10.在离心吸附柱中加入0.3mL的通用洗柱液,12000~15000g离心半分钟(此步为第二次洗涤,一般可以省略)。
11. 12000~15000g离心半分钟以去除残留通用洗柱液。注意:此步不能省略,否则残留的通用洗柱液会影响DNA的后续反应。
12. 将离心吸附柱转移到一新的离心管中,加入100μL 通用洗脱液,12000~15000g离心半分钟,管底溶液即DNA溶液,可立即使用或放冰箱长期保存。
北京Western封堵液现货关键词:Western封堵液,Western Blocking Solution,BTN131104
PY04-050 磺胺嘧啶* 12mg/支×10支 每支添加于100ml亚硫*(代"酸")盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(SPS)培养基中,用于产气荚膜梭菌的平板计数
间*二酚蓝指示剂 100ml
胃蛋白酶(猪胃粘膜) Silver acetate 9001-75-6
十二烷基三甲基*化铵 4-Nitrophenyl palmitate 1119-94-4
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9025-70-1 β-葡聚糖酶 β-Dextranase
F040203 人类乙型肝炎病毒重组C抗原 HBcAg
吐温65 Sodium D-glucuronate 9005-71-4
Western转移缓冲液(5×) 500ml
2-亚硝基-1-*酚 Ammoninm nickel sulfate 132-53-6
ARB12271 大鼠防御素5(D-5)酶免分析 Rat defensin-5 ekisa kit
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文献和实验不容易转通。基本都是进口膜!质量应该不差。 P0021A Western转膜液 1L 30.00元 P0022 丽春红染色液 120ml 85.00元 四、抗体孵育 P0023B Western封闭液 100ml 96.00元 (PS:也可以用5%脱脂牛奶代替专用封闭液,光明牌,大约三十一包,超市有卖!如用牛奶配请自行调整浓度一般在3-10%之间) P0023A Western一抗稀释液 100ml 96.00元 一抗 请订购外国公司产品如sant cruse、sigma
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师妹们。 Biorad的一套系统得两万多,西部能玩得起伯乐的还真不多。好在咱中国人聪明,上海天能的外观和构造和伯乐的MINI3几乎一模一样,而且可以通用,不带电泳仪 是5千多一套,挺好用的。唯一的不足是塑料寿命不如伯乐,胶架容易断裂。不过仔细算算,三套天能也就是一套伯乐的价格,值了。北京六一的垂直槽很转移槽很好用,但垂直槽配胶不方便,玻板太厚,散热不好,但能用,六一的电泳仪(电源)还是很好用的。 3、Western Blot实验条件 Western Blot实验条件我基本
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