无蛋白封闭液哪里卖

【求助】请教关于蛋白和NC膜结合的问题

glacierna6 如果是做western blot，有个电转的过程，蛋白可以和NC膜比较牢固的结合。 但是如果我前面步骤都不做，直接点二抗到NC膜上呢，放置10分钟，能否牢固结合？ 如果加封闭液，用摇床晃或者不晃，会不会把二抗从膜上晃下来（假设是没有饱和结合的）？ 谢谢高人指点！ shb-sangon 直接点二抗到NC膜上(膜下放置滤纸），放置10分钟，自然风干，能牢固结合。 用无蛋白封闭液

免疫组化常见十大问题与解析

或细胞中目的抗原表达水平低：可延长DAB显色时间或延长二抗孵育时间。 （3）试剂超过有效使用期：及时更换试剂。 （4）操作中，滴加试剂时缓冲液未沥干，致使试剂稀释：可每步滴加试剂前沥干切片中多余的缓冲液（但防止切片干燥）。 （5） 蛋白封闭过度：封闭时间不要超过 2h。 Q3：为什么出现高背景染色，怎么办？ （1）一抗浓度过高：对抗体进行滴定以确定获得特异性反应的最佳浓度。 （2）显色过度：缩短显色试剂 DAB 孵育时间。 （3）洗涤不充分：适当增加抗体孵育后的浸洗次数和延长浸洗时间。 （4）封闭

IHC原理、操作及注意事项

或终止内源性或外源性细胞内分解酶的反应，防止组织细胞自溶，更是为了保存组织或细胞内的抗原性，使抗原不失活，不发生弥散。不同的抗原对固定液耐受程度不同，因而要选择合适的固定剂。 现在常用的固定剂有中性甲醛液，4% 多聚甲醛-磷酸盐缓冲液。有些固定剂对特殊组织有更好效果，如苦味酸对于头皮、指甲固定有软化效果，Helly 固定液对于胰岛和垂体效果较好，PLP 固定液对于含糖组织抗原保存更好。 脱水、石蜡包埋和制片 脱水用梯度乙醇(由低到高)充分脱水，对于一些易脆的组织（如肝、脾等）应减少高浓度酒精里