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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
863
- 英文名:
One-Stop Stable SDS-PAGE Pack(A)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")一站式长效期SDS-PAGE套装A(>30KD)北京厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:一站式长效期SDS-PAGE套装A(>30KD)北京厂家
英文名:One-Stop Stable SDS-PAGE Pack(A)
规格:30次
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:BTN100908A
本产品是在SDS-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)套装基础上改良而得,主要改良的地方有两处:一是配胶液的pH偏酸,二是将还原剂加入到电泳液中。
产品特点:
1.偏酸的pH使PAGE胶比常规SDS-PAGE 更加稳定,便于配预制胶,增加实验的可重复性。
2.能降低蛋白质的脱*反应和烷基化反应,也能阻止蛋白质的二硫键再生成。
3.把还原剂整合到电泳液中,避免了蛋白质在电泳过程中重新形成二硫键,蛋白条带比常规SDS-PAGE 更加锐利。
4.可把分离胶和浓缩胶配胶液整合成一个,成分更简单。
5.更换电泳液即可用于不同大小的蛋白(A型电泳液适合20 kD以上蛋白,B型适合2-50 kD蛋白),分离多肽时不需要Tricine-SDS-PAGE。
6.即开即用,用户不需单独准备各种成分,十分方便。
7.安全,免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙*(代"烯")酰胺。
8.电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。
产品组成:
| 成分 | 30T(A) | 30T(B) |
| 丙*(代"烯")酰胺(干粉) | 60g | 60g |
| 甲叉双丙*(代"烯")酰胺(干粉) | 3g | 3g |
| 长效期SDS-PAGE 配胶液,4× | 200ml | 200ml |
| 长效期SDS-PAGE还原剂 | 10ml | 10ml |
| TEMED | 1.5ml | 1.5ml |
| 过硫*(代"酸")铵 | 1g | 1g |
| 长效SDS-PAGE上样液,5× | 1ml | 1ml |
| 长效期SDS-PAGE电泳液A型 | 20L | - |
| 长效期SDS-PAGE电泳液B型 | - | 20L |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存(SDS-PAGE上样液需-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
一、使用本产品不需要浓缩胶,直接配制分离胶。如果使用A型电泳液(分离30 KD以上蛋白质用),最好配制10%的PAGE胶;如果使用B型电泳液(分离2-30 KD的蛋白质用),最好配制12%的PAGE胶。也可以选择其他胶浓度,但各成分用量需要按比例调整。
1.第一次使用本产品时需先配制30%丙*(代"烯")酰胺溶液:在本产品提供的装有60克丙*(代"烯")酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自备的去离子水,充分摇晃直到溶解即得200mL 30%丙*(代"烯")酰胺溶液(用手大约摇10-20分钟)。
2.第一次使用本产品时还需配制30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液(简称30% AB溶液,下同): 不同实验需要加入不同比例的甲叉双丙*(代"烯")酰胺。对长效期SDS-PAGE电泳,丙*(代"烯")酰胺与甲叉双丙*(代"烯")酰胺比例一般在19:1,因为此时PAGE胶的孔径最小,分辨率最高。制备方法是将3g甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉加入到200mL上步配好的30%丙*(代"烯")酰胺溶液中,摇晃溶解即得30%的AB溶液,该溶液最好4℃避光(可包上锡箔纸壁光)保存并在一个月内用完。30% AB溶液具有神经毒性,一定要戴手套操作。
3.新鲜配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵):按每0.1克过硫*(代"酸")铵干粉加1mL 去离子水的比例将去离子水加到装有硫*(代"酸")铵干粉的1.5mL EP 管中,摇晃到粉末全部溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
4.本产品不需要配制分离胶和浓缩胶两种胶,只需要配一种连续胶。配制方法如下(以下是以配制10mL的胶的用量为例,用户自己需要根据胶的大小决定所需体积):
| 胶浓度 | 用量(mL) | 总体积 (mL) |
||
| 去离子水 | 30% AB溶液 | 4×长效期SDS-PAGE配胶液 | ||
| 10%(对A型) | 4.20 | 3.30 | 2.50 | 10 |
| 12%(对B型) | 3.50 | 4.00 | 2.50 | 10 |
5.摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应,不去除的话将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
6.加入50μL新配制的10%APS和30μL TEMED(这是配制10mL胶的用量,配制更大体积的胶则按比例增加),迅速摇匀后倒胶。
7.在胶的液面达到顶部的时候停止灌胶并插入梳子,室温聚合30-60分钟(低温抑制聚合反应)。
8.拔出梳子,用水冲洗加样孔。
9.配制的PAGE胶可以在4℃长期放置数月,直到使用。注意:需要盖上1×长效期SDS-PAGE 配胶液,否则PAGE胶会变干而无法使用。
10.使用时,将凝胶板固定在电泳装置上,往上槽和下槽加入足够量的1×长效期SDS-PAGE电泳液(A型或B型)。
注意:长效期SDS-PAGE电泳液A型或B型均以干粉形式提供,足够配20 L 1×电泳液。配制时需将全部干粉(含多种没有充分混合的成分,必须一次性全部使用)溶解在去离子水中,并定容到1 L,得到20×长效期SDS-PAGE电泳液,使用时再用去离子水稀释成1×电泳液。20×长效期SDS-PAGE电泳液不需要调pH,可以室温放置。
11.在上槽中加入适量的1×长效期SDS-PAGE电泳液和1/200 体积(以电泳液体积为基数)的长效期SDS-PAGE还原剂并用玻璃棒搅拌混合均匀。
12.在蛋白质样品中加入5×长效期SDS-PAGE上样液(8μL样品加2μL上样液),72℃加热10分钟。注意:上样液中的一些成分在低温保存时会沉淀,所以用前需要65℃保温10分钟左右使沉淀溶解,混匀后才能使用。上样液中的2-巯基乙*(代"醇")容易挥发,使用多次后用户可以在10μl样品(蛋白质样品+上样液的混合液)中补加0.5μl自备的2-巯基乙*(代"醇")原液,以便使蛋白质充分变性。如果样品是蛋白质沉淀(如TCA沉淀得到的蛋白质),则需要用Tris缓冲液将其pH调到中性(可用pH试纸检测),否则残留溶剂可能会改变上样液的pH,严重影响电泳效果。
13.短暂离心,取上清液上样。上样的蛋白总量跟检测方法相关,如果用银染,可以只上样ng级别(对每条带的蛋白量而言),如果用考染,需要上样μg级别(对每条带的蛋白量而言)。
14.用150V恒压电压进行电泳,直到染料进入胶底部(在B型电泳液中,*酚蓝的速度相当于3-5 KD的蛋白质)。注意:在长效期SDS-PAGE中的电泳速度要快于普通SDS-PAGE。在B型电泳液中的速度又快于A型电泳液。过程中,电流会降低,属于正常现象。
15.终止电泳,取出凝胶进行后续的实验处理(如染色或转膜)。注意:Western转膜需要专门的转膜液(百奥莱博可以提供)。
二、如果需要更高分辨率,也可把上法配制的胶当成分离胶,并在其上再叠加4%的浓缩胶,操作如下:
16.按上面方法配制分离胶,只是倒胶后在胶面距离顶部1.5cm的时候,或者距梳子齿0.5cm时,停止灌胶。然后覆盖一层1-5 mm 厚的水,使胶顶部液面平整。室温聚合30-60分钟(低温抑制聚合反应)后,用1×长效期SDS-PAGE 配胶液洗涤凝固的胶的顶部,待用。
17.配制4%浓缩胶(参考上节第4-6 步)。倒胶后在液面达到顶部时停止灌胶,插入梳子,室温聚合30-60分钟(低温抑制聚合反应)。
18.拔出梳子,用1×电泳液(A型或B型)冲洗加样孔,后续处理接第7步。
我公司的一站式长效期SDS-PAGE套装A(>30KD)北京厂家,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
16672-87-0 乙*(代"烯")利 Ethephon
葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法) 3×50ml
PY02-365 糖、醇发酵培养基 20支
DL-异亮*酸 Fenofibrate 443-79-8
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硫*(代"酸")鱼精蛋白副凝固定检测试剂盒(3P凝固法) 60T
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ARB13437 鸡甲状旁腺激素(PTH)含量测试 Chicken paRathyroid hormone,pth ELISA KIT
BL0940 生物素化人IgG抗体
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磷酸组胺 Coronene 23297-93-0
一站式长效期SDS-PAGE套装A(>30KD)北京厂家关键词:一站式长效期SDS-PAGE套装A(>30KD),BTN100908A,One-Stop Stable SDS-PAGE Pack(A)
·Hoechst 33342干粉
编号:BTN130865
英文名称:Fluorescent Dye Hoechst 33342,Powder
规格:10mg
Hoechst 33342是一种可透过细胞膜并对DNA染色的细胞核染色试剂,它在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光。Hoechst 33342常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342-DNA的激发和发射波长分别为350nm和460nm。
CAS号:23491-52-3
分子式:C27H28N6O·3HCl
分子量:561.93
储存条件:低温运输,-20℃干燥避光保存,有效期一年。
·TEV蛋白酶
编号:BTN130873
英文名称:Tobacco Etch Virus protease
规格:300U
TEV蛋白酶(烟草蚀纹病毒蛋白酶)是来源于烟草蚀纹病毒(TEV)的Nla蛋白酶经改进后的50kDa的蛋白酶。其具有很强的位点特异性,能够识别EXXYXQ(G/S)的七*基酸序列(Glu-Asn-Leu- Tyr-Phe- Gln-Gly),切割位点在谷*酰胺和甘*酸或丝*酸之间。在PH 7.0,30℃时可达到最佳活性。切割后很容易利用其N端的HQ标签进行TEV蛋白酶清除。
产品特点:
➤在广泛的PH值和温度范围内都有活性,用最适条件切割每个融合蛋白,使之保持活力和正确的构象。
➤ 有HQ标签,切割后可用镍亲和树脂方便的清除TEV蛋白酶。
➤可直接在液相和亲和树脂的固相切除融合蛋白:TEV蛋白酶可在在多种实验模式下方便使用。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
一站式长效期SDS-PAGE套装A(>30KD)北京厂家关键词:一站式长效期SDS-PAGE套装A(>30KD),BTN100908A,One-Stop Stable SDS-PAGE Pack(A)
·ABTS溶液(7mM)
编号:BTN131114
英文名称:ABTS Solution
规格:100mL
ABTS是一种水溶性HRP底物,在过氧化物酶的作用下产生绿色终产物。该绿色产物在410nm 及650nm具有两个主要吸收峰。在ELISA应用中,ABTS的灵敏度比OPD和TMB稍差。它会被缓慢氧化并显色(大约20分钟)。相对于OPD或TMB底物高灵敏度造成的不可接受的高背景,该性质可能是ABTS底物的优势。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期一年。
·革兰氏阴性菌DNA提取试剂盒(Southern级)
编号:BTN130950
英文名称:Gram negative bacteria DNA extraction kit(Southern Grade)
规格:10次
ABTS是一种水溶性HRP底物,在过氧化物酶的作用下产生绿色终产物。该绿色产物在410nm 及650nm具有两个主要吸收峰。在ELISA应用中,ABTS的灵敏度比OPD和TMB稍差。它会被缓慢氧化并显色(大约20分钟)。相对于OPD或TMB底物高灵敏度造成的不可接受的高背景,该性质可能是ABTS底物的优势。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期一年。
·SDS-PAGE预制胶
编号:BTN100915
英文名称:Instant SDS-PAGE Gel
规格:10块
本产品是一种高性能低成本聚丙*(代"烯")酰胺预制凝胶,广泛应用于遗传学,分子生物学,细胞生物学,微生物学,植物学等各个学科领域中蛋白质的分离及分子量的测定。本产品是将凝胶事先配制好,制成预制胶,使用者可直接上样进行电泳。
产品特点:
1.分辨率高,条带清晰,电泳效果极佳;
2.保存期长,常温12个月;
3.胶夹打开极为轻松,无需起撬工具;
4.专利loading guide,加样方便;
5.兼容目前市场各种电泳槽,如BIORAD(11/3/Tetra System),天能和君意东方等;
6.可用于SDS变性及非变性电泳;
7.8%,12%及6%-18%梯度等多种不同浓度供选择;
8.电泳时间短,在200V电压下,电泳30分钟即可完成。
使用效果:
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 预制胶 | 10块 |
| 电泳缓冲液粉末 | 1包 |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
自备试剂:SDS-PAGE上样液。
使用方法:
1.在操作前请将产品配套的电泳缓冲液粉末溶解至3L待用。
2.撕开包装取出胶,将预制胶固定在电泳槽(Bio-Rad Mini-PROTEAN(11/3/Tetra System)或Hoefer Mighty Small(SE 250/ SE 260/ SE 280))中,加入电泳缓冲液没过梳齿部位,推荐的缓冲液使用量为300mL。
3.双手按住梳子左右部位将其平稳缓慢拔出,上样后电泳。使用150v -200v电压,30-40分钟,电泳过程中无需变换电压。
4.电泳结束后,取出胶板。由于本预制胶特殊设计,胶夹很容易打开。使用镊子或者梳子即可轻轻撬开。
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赛圣昆丁大学 Marie-Anne Rameix-Welti 研究组以及法国萨克雷大学 Jean-François Eléouët 研究组联合在 Nature 杂志上发表论文 A condensate-hardening drug blocks RSV replication in vivo。该研究发现了小分子药物 CPM 以及 A3E 的处理会造成呼吸道合胞体病毒内含体凝聚物的硬化,而这一硬化过程依赖于 M2-1 蛋白,揭开了阻碍体内呼吸道合胞体病毒复制的凝聚体硬化类固醇生物碱类环丙胺药物的具体工作
-100除去了部分杂蛋白,但接着再用阳离子交换柱SP分离(20mM PB ph=7.00),发现目的蛋白根本挂不上.我想试用硫酸铵分级沉淀除去部分杂蛋白,再过s-100.但不知硫酸铵分级沉淀该如何具体操作? 你可以先把缓冲液pH调到6试试能不能挂柱,此外其实你的蛋白分子量很小,杂质应该大多分子量比它大,你直接过sephadex G50那么大于30kd的很快就出来,或者上superdex 30 大于10KD的先出来,而你要的在后面,然后你再用离子交换试试,S-100分离范围比较宽,去杂质没有前面说
商品名称。所以你理解是有偏差的,此外agarose不一定是琼脂糖凝胶,而Glutathione-agarose(4%cross-linked beaded agarose)和Glutathione Sepharose 4B是同一类东西,只是厂家不同。 GST融合蛋白纯化过,5ml的凝胶你可以装在1.6x20的柱子上用,也可以按照分子克隆的做法做,取决于你的喜好和方便。1ml不好装,除非有专门的小柱子,对于直径和高度没有特别的要求,我们的做法是: 1、GST琼脂糖凝胶FF装柱,0.7X2.5cm
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