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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
688
- 英文名:
Human Genomic DNA(Male)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输、4℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应人基因组DNA(男性)价格,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:人基因组DNA(男性)价格
编号:BTN131031
英文名:Human Genomic DNA(Male)
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:100μg
本产品为人基因组DNA,来源于多位匿名的捐献者,其中BTN131031为男性基因组DNA;BTN131032为女性基因组DNA。利用脉冲电场凝胶电泳测量,90%以上的DNA的大小大于50kb。该DNA适用于Southern blot杂交,基因组分析(包括PCR)及基因组文库构建等实验。。
储存条件:低温运输、4℃保存、有效期一年。
除人基因组DNA(男性)价格外,我公司正在打折促销以下产品:
·ECD-G固定液
编号:BTN131294
英文名称:ECD-G Fixative Solution
规格:250mL
本产品为碳二亚酰胺、戊二醛等组成的混合固定液。常用于多肽类激素的固定,对酶等蛋白质的固定也有良好效果。ECD(1-(3-二甲*基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐*(代"酸")盐)单独应用时,边缘固定效应重,但与戊二醛、Tris及PB联合应用,效果明显改善,细胞质仍可渗透,利用细胞中抗原的定位,超微结构保存较好。ECD-G固定液是一种用于培养细胞电镜水平免疫细胞化学研究的很好的固定剂。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
·T7 RNA聚合酶
编号:BTN120310
英文名称:T7 RNA Polymerase
规格:1000U
T7 RNA聚合酶是一种高度特异识别T7启动子序列的DNA依赖的5´→3´RNA聚合酶,它可以催化单链或双链DNA T7启动子下游NTP的掺入,合成与T7启动子下游的模板DNA互补的RNA。
产品特点:
1.对于T7启动子有高度的特异性,用于体外RNA(含小RNA)的合成。
2.能识别修饰的NTP(生物素标记、地高*(代"辛")标记、荧光素标记的NTP),可用于标记探针。
3.所得RNA可用于下列后续实验:核酸杂交、基因组DNA序列分析、核糖核酸酶保护测定、反义RNA合成,体外翻译,RNA剪接、RNA二级结构分析、RNA-蛋白质相互作用、核酸扩增、siRNA、miRNA等小RNA。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| T7 RNA聚合酶(20U/μL) | 50μl |
| 5×反应缓冲液 | 250μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、制备DNA模板(本试剂盒不含所需试剂,此处信息仅供参考)
PCR片段和质粒DNA都可以用作体外转录的模板,但是必须注意以下几点。
⑴必须使用线性化的DNA。如果是质粒DNA,则必须先用适当的限制性内切酶切成线状。
⑵ 需要转录的DNA序列的上游必须有T7启动子。如果模板是PCR产物,则可以在设计引物时将T7启动子序列(5´TAA TAC GAC TCA CTA TAG GG 3´)加上。如果是将DNA片段克隆到载体上,则需要选择有T7启动子的载体,并且克隆位点必须位于T7启动子下游。
⑶ 需要转录的DNA序列的下游端最好不要是3´突出。如果是3´突出(比如选择了Pst I来线性化质粒),则最好用T4 DNA聚合酶修平。
⑷必须保证DNA模板中没有RNase。由于提取质粒DNA的过程中一般要使用大量的RNase A,因此质粒DNA一般都有严重的RNase A污染,所以在用作模板前,最好采取胶回收得方法回收质粒DNA。并且加入少量总RNA一起保温,然后电泳检测RNA是否被降解,以此来判断纯化的DNA模板是否有残留RNase A。
二、体外转录反应(本试剂盒不含除酶和反应液之外的相关试剂)
1.在一个RNase-free的塑料离心管中,在室温下(不是在4℃下)按次序加入下列成分:
| 成分 | 加入量 | 备注 |
| DNA模板 | 如果使用质粒DNA,必须反复酚-*仿抽提去除残留的RNase,然后再乙醇沉淀质粒DNA | |
| PCR片段 | 50ng左右 | |
| 质粒DNA | 1μg左右 | |
| RNase抑制剂 | ||
| 5×反应缓冲液 | 4μl | 需室温时使用 |
| NTP(2.5mM each) | 4μl | |
| T7 RNA聚合酶 | 0.5-1μL | |
| RNase-free水 | 补水到20μL |
注:此为20μL反应体系的用量,对其他反应体系,各成分的用量可以按比例增减。如果需要标记RNA探针,则需要订购NTP分开的试剂盒。如果需要得到加帽RNA,则需要加入自备的加帽修饰核苷酸。
2.37℃保温1-2小时。
注意:延长保温时间并不能提高产量。
3.70℃加热10分钟灭活T7 RNA聚合酶。
4.取1-3μL电泳检测转录效果。一般1μg DNA可以合成5-10μg的RNA。
5.得到的RNA可以放-80℃保存。
三、如果需要去除DNA模板(仅产品不提供所需试剂)
1.在体外转录体系中加入1μL自备的RNase-free DNase(3-5U/μL)。
2.37℃保温15-30分钟。
3.补水到100μL。
4.用自备的等体积(100μL)的Tris饱和酚-*仿抽提一次去除残留的DNase和RNA聚合酶。
5.加200μL微量核酸沉淀剂(用前需要摇晃混匀),振荡后15000rpm离心3~5分钟,弃上清。
6.加入1mL 75%乙醇,震荡10秒后15000rpm离心3~5分钟,弃上清。
7.短暂离心数秒,用枪头吸弃上清。晾干,所得沉淀即体外转录所得的RNA。可溶于RNase-free水中后立即使用或放-80℃长期保存。
人基因组DNA(男性)价格关键词:Human Genomic DNA(Male),人基因组DNA(男性),BTN131031
·cDNA第一链合成试剂盒(逆转录试剂盒)(RT试剂盒)
编号:BTN60906
英文名称:1st-Strand cDNA Synthesis Kit
规格:50次
本试剂盒提供合成cDNA第一链所需要的全部试剂。其原理是用突变的莫洛尼氏鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV RT)高效合成mRNA的全长cDNA拷贝。
产品特点:
1. 使用突变的反转录酶,内源RNase H活性低。
2. 最长可合成13Kb的cDNA。
3.可以使用oligo-dT、随机引物和RNA 专一性引物三种引物(前两种本试剂盒提供)。
4. 总RNA、poly(A)+RNA或特殊RNA 均可作为模板。
5.可用于cDNA文库构建、RT-PCR、探针标记等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| MMLV(含RI) | 100μl |
| RT Buffer(含dNTP) | 300μl |
| Oligo(dT)18引物(0.5μg/μL) | 50μl |
| Random Primer(0.2μg/μL) | 50μl |
| RNase-free水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:合成PCR用的1st-strand cDNA
1. 按下表配制RT反应体系:
| RNA 模板 | |
| 总RNA | 100-500ng |
| 或poly(A)mRNA | 10-500ng |
| 或专一的RNA | 0.01pg-500ng |
| 注意:RNA样品不能含有基因组DNA污染。 | |
引物
| Oligo(dT)18(0.5μg/μL) | 1μl |
| 或随机引物(0.2μg/μL) | 1μl |
| 或RNA 模板专一性引物 | 15-20 pmol |
| 注意:随机引物与RNA 模板的比例跟cDNA 合成的平均长度成反比。 | |
| RNase-free水 | 补水到13μL |
2. 70℃保温5分钟后立即冰浴。
3. 再加入5μl RT Buffer(含dNTP)。
4. 37℃保温5分钟。对富含二级结构的高GC RNA 模板,可以改成45℃保温5分钟。如果使用随机引物,则改成25℃ 5分钟。
5. 加入2μL MMLV逆转录酶(含RI),反应终体积为20μL。
6. 42℃保温60分钟(但如果使用随机引物,需要先25℃保温10分钟,然后再转移到42℃保温60分钟)。此步为RT反应。
7. 70℃保温10分钟以终止反应,然后放置在冰上待用。合成的cDNA可以直接作为PCR 模板使用,不需要纯化。
二:合成建文库用的1st-strand cDNA
1. 按下表配制RT反应体系:
| RNA模板 | |
| poly(A)mRNA | 1μg |
| 或专一的RNA | 0.5-1μg |
| 注意:RNA样品不能含有基因组DNA污染。 | |
| 引物 | |
| Oligo(dT)18(0.5μg/μL) | 1μl |
| 或随机引物(0.2μg/μL) | 1μl |
| 或RNA模板专一性引物 | 100 pmol |
| 注意:随机引物于RNA模板的比例跟cDNA合成的平均长度成反比。 | |
| RNase-free水 | 补水到13μL |
2. 70℃保温5分钟后立即冰浴。
3. 再加入5μl RT Buffer(含dNTP)。
4. 37℃保温5分钟。对富含二级结构的高GC RNA模板,可以改成45℃保温5分钟。如果使用随机引物,则改成25℃ 5分钟)。
5. 加入2μl MMLV逆转录酶(含RI),反应终体积为20μL。
6. 42℃保温60分钟(但如果使用随机引物,需要先25℃保温10分钟,然后再转移到42℃保温60分钟)。此步为RT反应。
7. 70℃保温10分钟以终止反应,放置在冰上待用。合成的cDNA可以用于第二链cDNA的合成或放置在-20℃长期保存。
三:用对照模板合成cDNA(需要用同位素,需要对照的客户需要单独跟我司联*(代"系"))
1. 按下表配制RT反应体系:
| 对照RNA模板(0.5μg/μL) | 2μl 引物 |
|
| Oligo(dT)18(0.5μg/μL) | 1μl | |
| 或随机引物(0.2μg/μL) | 1μl | |
| 或对照专用引物 | 2μl | |
| RNase-free水 | 补水到13μl |
2. 70℃保温5分钟后立即冰浴。
3. 再加入5μL RT Buffer(含标记dNTP,本试剂不提供)。
4. 37℃保温5分钟。如果使用随机引物,则保温温度只能是25℃。
5. 加入2μL MMLV 逆转录酶(含RI),反应终体积为20μL。
6. 42℃保温60分钟(但如果使用随机引物,需要先25℃保温10分钟,然后再转移到42℃保温60分钟)。
7. 加1μL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8.电泳检测。合成的cDNA的量一般有加入RNA总量的50%以上,电泳一般能出现1.1Kb的片段(如果使用随机引物,将出现多个小片段)。
人基因组DNA(男性)价格关键词:Human Genomic DNA(Male),人基因组DNA(男性),BTN131031
·ABTS溶液(7mM)
编号:BTN131114
英文名称:ABTS Solution
规格:100mL
ABTS是一种水溶性HRP底物,在过氧化物酶的作用下产生绿色终产物。该绿色产物在410nm 及650nm具有两个主要吸收峰。在ELISA应用中,ABTS的灵敏度比OPD和TMB稍差。它会被缓慢氧化并显色(大约20分钟)。相对于OPD或TMB底物高灵敏度造成的不可接受的高背景,该性质可能是ABTS底物的优势。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期一年。
·柱式粪便DNA提取试剂盒
编号:BTN80102
英文名称:Stool DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是动物粪便DNA提取试剂盒(BTN70601)的柱式升级产品,专门用于从各种动物粪便中快速提取高质量的DNA。
产品特点:
1. 操作更加简单快速,一个样品只需要十多分钟的时间。
2. DNA 更加纯净,OD260/280一般都在1.8以上,得到的DNA样品原液或稀释液可以直接用于PCR扩增。
3. 每次微量提取可以处理100-300mg左右的样品,能得到5μg左右DNA,片段长度在30 Kb左右。
4.可以同时提取到肠道上皮细胞和可能的肠道病原菌的DNA。
5. 试剂无毒无害,环保。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 25ml |
| 溶液B | 25ml |
| 溶液C | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
1. 65℃预热溶液A,待其沉淀溶化后充分混匀,取0.5mL加入到1.5mL塑料离心管中并放置于65℃待用。
2. 称取 0.1-0.3 g的粪便,加入到含预热溶液A的离心管中,震荡器上剧烈震荡5-10分钟。如果是扩量操作,可以使用更多粪便和较大离心管。也可以将同一种粪便在较大离心管中震荡处理,然后再分到1.5mL离心管中。注意:不论使用大的还是小的离心管,一定要让管底的粪便震荡起来。
3. 将离心管置于65℃水浴中保温至少5分钟。
4. 12000~15000g室温离心3分钟,将上清转移到一新离心管中(上清液一般呈淡黄色或深棕色,实际颜色随样品而异,上清液的体积一般为300-400μL)。
5.在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒充分混匀,溶液将呈白色或淡黄色混浊状。
6. 将离心管冰浴至少5分钟。
7. 12000~15000g室温离心3分钟,转移上清到新的1.5mL离心管中,上清液颜色将比第4 步得到的上清的颜色稍淡,体积在0.7mL左右。
注意:下面第8-第9 步的*仿抽提操作可以省略,直接进入第10 步,但DNA的产量会低50%左右,OD260/280在1.7-1.8。如果直接进入第10 步,则转移的溶液体积不要超过0.6mL,否则没有空间加溶液C。
8. 加入0.2mL的*仿(自备),震荡器上充分振荡30秒混匀。注意:一定要让管底的溶液震荡起来。
9. 12000~15000g室温离心3分钟,小心转移上清到新离心管中。说明:离心后两相交界面将有白色膜状物,其中有机相部分颜色较深,一般呈淡棕色。将上清转移到新的1.5mL离心管时,不要超过0.6mL,否则没有空间加溶液C。如果有多余的可以弃之不用。
10. 加入1.5倍体积的溶液C,上下颠倒30秒混匀。
11. 分两次上柱(即先转移一半的混合液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液,然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液)。
12. 加 0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
13. 如果有必要,可以再加0.3mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。增加一步洗涤能使最后得到的DNA的纯度稍有提高,但产量稍微有所降低。
14. 12000~15000g室温再离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
15. 将离心吸附柱转移到一新的1.5mL塑料离心管中,加入50-100μl DNA洗脱液2.0。
16.室温放置离心吸附柱1-2分钟。
17. 12000~15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为DNA样品,可以立即使用或存放于冰箱待用。
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