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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
576
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")CN/DAB底物套装打折促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:CN/DAB底物套装打折促销
规格:1套
产地:国产|进口
编号:BTN131113
结合DAB的高灵敏性和CN的易于拍照成像的特性。4-CN和DAB经常因为其各自独特的性能被混合在一起使用。本试剂盒具有极好的灵敏性,产生的深黑色沉淀易于拍照成像。CN/DAB底物在免疫印迹和斑点印迹应用中表现优秀。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期一年。
我公司的CN/DAB底物套装打折促销,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·水蛭素溶液(2万ATU/mL)
编号:BTN130542
英文名称:Hirudin Solution
规格:0.1mL
本产品为水蛭素水溶液,浓度为20000ATU/mL,工作浓度为150-200ATU/mL。水蛭素是从水蛭及其唾液腺中提取的含65个*基酸残基的小分子蛋白,水蛭素对凝血酶有极强的抑制作用,是迄今为止所发现最强的凝血酶天然特异抑制剂。基因重组水蛭素是一种单链环肽化合物,相对分子量约为7000 道尔顿,是目前发现的最强的凝血酶特效抑制剂,其作用不依赖于抗凝血酶Ⅲ。
产品特点:
1.其优点是抗原性弱,少有过敏反应。
2. 不与血小板结合,极少导致血小板减少。
3. 稳定性好,毒性低。
储存条件:低温运输,-20℃保存。
活力单位定义:一个抑制单位ATU(anti-thrombin unit)指,37℃下,灭活一个NIH 单位凝血酶的量
使用方法:根据具体实验要求不同,加入所需要量的本产品。一般建议工作浓度为150-200ATU/mL。用户可以按照要求稀释本产品。后续按照常规操作即可。
CN/DAB底物套装打折促销关键词:CN/DAB底物套装,BTN131113,百奥莱博
·大肠杆菌TG1化学感受态细胞
编号:BTN80701
英文名称:E.coli TG1 Chemical Competent Cell
规格:0.1mL*10
本产品是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测本产品,转化效率可达108。本产品为dam-,dcm-的菌株,能够排除dam,dcm甲基化的影响。
菌株基因型:sup E hsd Δ5 thi Δ(lad-pro AB)F+[tra D36 pro AB+lacIQlacZΔM15]
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可根据实际情况使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μL 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μL转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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·羧苄青霉素*溶液
编号:BTN120683
英文名称:Carbenicillin Disodiu*(代"m") Salt
规格:1mL
本产品是浓度为50mg/mL的羧苄青霉素*溶液,澄清透明,pH值在6.0-8.0之间。羧苄青霉素*(羧苄青霉素二*盐;羧苄青霉素*;羧苄青;卡比西林),分子式:C17H16N2O6SNa2,分子量:422.37,CAS号:4800-94-6。溶于水和乙醇。抗菌谱包括革兰氏阴性和阳性细菌、假单胞菌属等,可用于配制细胞培养基。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期6个月。
·EDTA溶液(RNase-Free)(0.5M,pH8.0)
编号:BTN60308
英文名称:Carbenicillin Disodiu*(代"m") Salt
规格:250mL
本产品是浓度为50mg/mL的羧苄青霉素*溶液,澄清透明,pH值在6.0-8.0之间。羧苄青霉素*(羧苄青霉素二*盐;羧苄青霉素*;羧苄青;卡比西林),分子式:C17H16N2O6SNa2,分子量:422.37,CAS号:4800-94-6。溶于水和乙醇。抗菌谱包括革兰氏阴性和阳性细菌、假单胞菌属等,可用于配制细胞培养基。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期6个月。
·生物素化的碱性磷酸酶
编号:BTN131096
英文名称:Biotin-AP
规格:1mg
本产品为生物素标记的碱性磷酸酶,其灵敏性高,推荐用于利用亲和素、链亲和素或中性亲和素蛋白的三明治技术。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性单位定义:一个单位定义为在25℃每分钟在特定缓冲体系中将1.0μmol的对硝基酚磷酸盐水解需要的蛋白量。反应缓冲液为:0.1M 甘*酸,1.0mM ZnCl2,1.0mM MgCl2,6mM PNPP,pH10.4。
·软骨RNA提取试剂盒
编号:BTN70401
英文名称:Cartilage RNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒专门从各种软骨组织样品中快速提取总RNA的试剂盒,它能有效克服传统TRIzol方法提取软骨组织RNA时,十分容易产生糖蛋白和酸性多糖污染这一缺点。
试剂盒特点:
1. 能有效去除糖蛋白、粘蛋白污染,OD260/280一般均在1.9以上。
2. RNA产率一般为5-15μg/100mg。
3. 操作简单,整个提取过程一般只需要10多分钟。
4. 得到的RNA可以直接用于RT-PCR、Northern杂交、mRNA纯化、Primer Extension、RNA Protection、in vitro translation等研究。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 15ml |
| 溶液C | 25ml |
| 溶液D | 25ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 先将50-200mg新鲜或冷冻的软骨组织液氮研磨成粉,加入1mL溶液A(使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解)溶解,然后将研磨物转移到新的1.5mL离心管中,振荡混合30秒。也可以将软骨组织剪碎后与溶液A一起匀浆,再转移到离心管中。
2.在装有研磨物/匀浆物的离心管中加入0.3mL的溶液B,振荡器振荡30秒混匀。注意:振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
3. 加入0.2mL自备*仿,振荡器振荡30秒混匀。注意:振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
4.室温12000~15000g离心2-5分钟。
5. 将上清液(约0.8mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中,下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质,避免触及或吸取。最好留下100μl上清液不取。
6.在上清液中加入0.5mL的溶液C,振荡器振荡30秒混匀。注意:振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
7. 加入0.2mL的自备*仿,振荡器振荡30秒混匀。注意:振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
8.室温12000~15000g离心3分钟,两相间将有白色膜状物(蛋白质)形成。
9. 将上清液(约1mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中,避免触及或吸取有机相及其上面的白色膜状物。
10.在上清液中加入0.5倍体积的溶液D,振荡器振荡30秒混匀,此时溶液呈白色浑浊状。注意:振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
11.室温12000~15000g离心5-10分钟,RNA将在管底形成白色沉淀(约黄豆大小)。如果组织样品量少或需要提高RNA回收率,也可以延长离心时间到20-30分钟。
12.在离心管中加入1mL 75%的乙醇,振荡器上振荡混匀30秒。
13.室温12000~15000g离心5分钟,RNA将在管底形成细小沉淀(约芝麻大小)。
14. 重复上步75%的乙醇洗涤一次,RNA将在管底形成细小沉淀。
15.小心吸弃上清液,注意不要吸弃RNA沉淀。
16. 再短暂快速离心,用移液枪小心吸弃残留液。注意:不要吸弃沉淀。此步将有效去除残留的乙醇,否则后续反应会受到影响。
17. 加入适量(一般为20-50μl)RNase-free水使RNA沉淀溶解,存放于-80℃或立即使用。千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥,否则RNA将变得十分难溶。
18. 检测
a)RNA完整性的电泳检测
如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。如果是简单检测,可以使用TAE或百奥莱博的SuperBuffer-2 DNA/RNA两用快速电泳液,但文献报道必须使用变性上样液(BioTechniques,9:558,1990)。普通DNA上样液不含变性剂,也没经过去RNase处理,所以最好不要使用。
尤其需要注意的是不要使用TBE进行RNA电泳,因为TBE所含硼*(代"酸")是研究多糖的经典方法----硼*(代"酸")络合法中的关键成分,硼*(代"酸")通过与RNA核糖中的羟基发生络合反应,形成RNA分子内或RNA分子间的络合复合物,使同样长度的RNA具有不同的泳动速度,电泳条带弥散,同时有大的RNA络合复合物迟留在加样孔中(一般会误以为是基因组DNA污染)。RNA分子内或RNA分子间的络合物的形成的多少和比例又与硼*(代"酸")与RNA的数量比例有关,而RNA样品中污染的其他多糖也会参与此反应,使硼*(代"酸")对RNA电泳的影响更复杂,所以TBE对RNA电泳的影响没有规律性和重复性。有的样品可以使用有的又不行,最好是避免使用。
由于动物细胞中70-80%的RNA为rRNA,后者又由28S(约4800nt),18S(约1900nt)和5.8S(约120nt)三种组成,所以变性胶电泳后应该在UV下看见三条清晰的rRNA带。由于核酸长度与结合EB的数量成正比(当然还与RNA的二级结构有关,双链部分结合能力比单链部分强),所以28S rRNA条带的荧光强度一般比18S rRNA条带的荧光强度强1.5-2.3倍。如果这两条rRNA带不清晰或比例小于此范围则表示RNA有降解(因为大的RNA被酶降解的可能更大)。
b)RNA产量产率测定
将5-10μl RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度X体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
注意不要将RNA稀释在DEPC水中检测OD260和OD280,否则光吸收比在TE中测得的低10%-15%。
c)RNA纯度测定
无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),OD260/OD230一般在2.0-2.3之间,如果低于或高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质或多糖的污染,但一般不影响RT-PCR等反应。蛋白质污染可以通过酚/*仿抽提一次然后酒精沉淀去除,DNA和多糖污染可以分别用百奥莱博的DNA Scavenger和PS Scavenger去除。
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