BTN131008型弱RIPA裂解液特价优惠

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应BTN131008型弱RIPA裂解液特价优惠，产品信息：

类别：蛋白质研究

英文名：RIPA Lysis Buffer(Weak)

产品名	产品编号	包装规格
弱RIPA裂解液	BTN131008	250mL

编号：BTN131008

英文名：RIPA Lysis Buffer(Weak)

品牌：百奥莱博

规格：250mL

RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等实验。本产品裂解强度较强，对膜蛋白、胞浆蛋白、核蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子均有很好的效果，本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂，能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。我公司各种RIPA裂解液产品特点见下表：

 

产品名称	RIPA裂解液(强)	RIPA裂解液(中)	RIPA裂解液(弱)
有效裂解成分	1% Triton X-100,1% deoxycholate,0.1% SDS	1% NP-40，0.5% deoxycholate,0.1% SDS	1% NP-40，0.25% deoxycholate
裂解强度	强	中	温和
对膜蛋白的提取	很好	较好	一般
对胞浆蛋白的提取	很好	很好	很好
对核蛋白的提取	很好	较好	较好
胞浆磷酸化蛋白提取	很好	很好	很好
细胞核转录因子提取	很好	很好	很好
含蛋白酶抑制剂	是	是	是
含磷酸酯酶抑制剂	是	是	是
主要用途	WB,IP	WB,IP	WB,IP,co-IP

 

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。

 

使用方法：

 

对于培养细胞样品：

1. 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。

2. 裂解细胞

2.1 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。

2.2 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。

3. 充分裂解后，10000-14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

注意：通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。

 

对于组织样品：

1. 把组织剪切成细小的碎片。

2. 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。

3. 按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)

4. 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。

5. 充分裂解后，10000～14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

6. 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。

注意：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。

 

备注：

1.为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。

2.裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。

3.用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，建议使用BCA蛋白浓度测定试剂盒，不建议使用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

BTN131008型弱RIPA裂解液特价优惠专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

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编号	类别	名称
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BTN130560	克隆与表达	大肠杆菌Rosetta-gami (DE3)pLys化学感受态细胞
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BTN90602A	核酸电泳和回收	DNA marker(λDNA/HindIII)
BTN101104	基因结构和功能	3´RACE试剂盒
BTN130971	RNA纯化	柱式病毒RNA-DNA共提试剂盒
BTN90309	DNA纯化	红细胞裂解液B型(流式细胞分析用)
BTN101121	RNA纯化	软骨RNA柱式提取试剂盒
BTN140587	其他细胞生物学试剂	B-5固定液
BTN130833	核酸扩增(PCR)	LAMP可见光染料
BTN70503T	核酸电泳和回收	DNA marker(250-15000bp)
BTN131195	工具酶	Deep Vent DNA聚合酶
BTN131087	蛋白质研究	AP标记亲和素
BTN100604	探针标记及检测	鲑鱼精DNA溶液
BTN130558	克隆与表达	大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞
BTN120601	DNA纯化	革兰氏阳性菌质粒DNA提取试剂盒
BTN131216	核酸扩增(PCR)	ATP溶液(2.5mM)
BTN60403	DNA纯化	红细胞裂解液A型(核酸纯化)
BTN130505	RNA纯化	RNA溶解液
BTN130956	DNA纯化	柱式酱油DNA提取试剂盒
BTN120403	工具酶	虾碱性磷酸酶(SAP)
BTN130923	核酸扩增(PCR)	LAMP扩增阳性对照
BTN120419	工具酶	大肠杆菌DNA连接酶
BTN131236	蛋白质研究	牛血清白蛋白封堵液
BTN131034	基因结构和功能	人基因组DNA混合液
BTN111116A	蛋白质研究	一站式GST标记蛋白质微量纯化套装

 

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