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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
18
- 供应商:
圻明
- 检测范围:
最低检测限0.28ng/ml
- 检测方法:
酶联免疫吸附试验法
- 应用:
论文文献
- 适应物种:
血清组织等
- 标记物:
同一名称不同种属
- 样本:
血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1200.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1800.0 |
人Zeste同源物增强子2(EZH2)酶联法试剂盒酶联免疫吸附实验,是目前广泛应用于各种抗原抗体检测的方法,主要有灵敏度高和特异性强的特点。免疫检测法的精确性表现为单次实验孔间
(批内)的重复性和多次实验之间(批间)的重复性。CV值高则表明精确度低,通常由以下两个原因造成:
移液技术:移液时,枪头应对准孔中央,避免接触孔壁及底部;移液后轻轻晃动混匀试剂;如果您的样品具有黏性,请预先润洗枪头以消除表面张力的影响;吸液时等待片刻使体积平衡后再取出;移液不充分或移液体积不均,说明移液器需要校正;必要时请检查移液器并重新校正;加样时,不同的试剂标准品和样本间都要确保更换枪头,避免交叉污染;确保使用合适的枪头;不合适的枪头无法正确量取吸液和加样的体积
洗涤技术:如果使用自动洗板机或多通道移液器,请确保进出口能正常运作;最后一次洗涤后,翻转酶标板倒出多余的洗涤液,并在吸水纸上拍干液体。洗板太快或太慢都会降低精确度。不能让孔内液体自然风干,需立即进行下一步操作;按照说明书,添加足量的洗涤液至孔内,并保证洗涤完全;由于洗涤液不是通用的,当试剂盒内的洗涤液用完时,请不要使用其他试剂盒中的洗涤液。如有需要,可联系技术支持寻求帮助;不要减少洗涤时的浸泡时间或跳过浸泡的步骤;按照说明书上推荐的洗涤次数清洗,随意改变洗涤的次数会影响实验的精确性。
人Zeste同源物增强子2(EZH2)酶联法试剂盒操作步骤看似简单,整个测定过程中却有诸多影响因素,导致检测结果可能与实际结果偏差较大。为帮助大家分析实验中常见问题,我们将常见问题的可能原因和解决方法归纳总结:
一、高背景或阴性对照值偏高问题及解决方法
1.阴性对照孔被阳性对照或样品污染:洗涤时,勿将洗液溢出孔外
2.抗体非特异性结合:封闭液不适合,更换封闭液
3.酶结合物过浓:请检查酶结合物是否按说明书规定稀释
4.孵育温度过高:检查孵育箱的温度是否正确、稳定
5.底物在使用前曝光:应保存在暗处,避光
6.读板前停留时间过长:加终止液后3分钟内读数
二、阳性对照值偏低或低吸光度
1.试剂未平衡至室温:实验开始前,将试剂盒从冰箱取出平衡至室温
2.检测体积偏小:检查移液器吸液管道是否堵塞
3.孵育时间过短:使用计时器,准确孵育时间
4.底物受污染:使用新配置的试剂,重新实验
5.包装袋中有湿气:检查袋中是否有干燥剂
6.样本中有抑制剂:叠d钠会抑制HRP酶的活性
三、标准曲线不佳
1.倍比稀释标准品时未混匀:稀释标准品的每一步均需混匀
过早稀释:标准品在快要使用时稀释
加入的体积不正确:使用校准过的移液器,快速、等量的将标准品分配到各个微孔中
四、标准曲标准曲线良好,但样本无检测信号
1.样本中无检测物或检测物含量极低:设置内参,重新实验
2.样本中其他物质影响/掩盖检测:作适当稀释,降低其他物质的干扰,或作系列稀释,检测回收率
3.样本中检测物浓度过高,Hook效应导致假低值:适当倍数稀释样本,检测物浓度尽量在试剂盒检测范围内
五、重复性较差
1.微孔中有气泡:用针尖挑破气泡
2.试剂未混匀:确保充分混匀试剂
3.样本中有杂质或沉淀物:使用前离心
4.微孔包被面被吸头划破:加液时小心操作
5使用用过的封板胶纸:每次须使用新的封板胶封住反应孔
QM-007AB 鼠抗人IgM单抗
QM-008AB 鼠抗人IgM单抗
QM-047AB 鼠抗人IgM单抗
QM-030AB 鼠抗人IgG单抗
QM-062AB 鼠抗人IgE单抗
QM-061AB 鼠抗人IgA单抗
QM-036AB 兔抗鼠 IgG抗体
QM-037AB 羊抗兔 IgG抗体
QM-038AB 兔抗鸡IgY抗体
QM-045AB 羊抗人IgG抗体
QM-055AB 羊抗鼠IgG抗体
QM-056AB 羊抗鸡IgY抗体
QM-057AB 羊抗人IgG Fc抗体
QM-066AB 兔抗羊IgG抗体
QM-084AB 兔抗大鼠IgG抗体
QM-085AB 兔抗豚鼠IgG抗体
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文献和实验家公司的免疫沉淀试剂盒还是 SimpleChIP® 试剂盒,结果均是如此。在分析稳定性较低的相互作用,比如 polycomb 蛋白(Ezh2 [D] 或 SUZ12 [E])与特定基因的结合时,这一点尤其明显。 第 3 步 - 选择抗体 非高度特异的靶标抗体可能会出现不可预见的结合并增加背景信号,从而增加检测低丰度或低稳定性相互作用的难度。 您的抗体应该满足以下标准: 靶标特异性: 抗体应与阳性/阴性对照细胞系、敲除细胞或经过 siRNA
怎么办? ChIP 是一项富集技术,不是纯化方法。大部分我们感兴趣的蛋白或组蛋白修饰分布在整个基因组,只是不同区域的富集度不同。因此,有意义的结果需要高效的富集。 传统的 ChIP 实验需要至少两百万细胞作为起始材料,这对于有些珍贵细胞样本是非常困难的。解决这个问题的关键是通过 ChIP 的 buffer 及条件优化,降低非特异性的背景,实现最优的信噪比。 针对这个问题,一方面通过 buffer 条件优化,提供高灵敏 ChIP 试剂盒,最少可用 1000 个细胞进行 ChIP
Active Motif ChIP 技术专家经验分享:如何才能做好 ChIP 实验?
,DMA,DSG,DSP,EGS[11-13]。第二步 染色质片段化染色质交联之后,需要通过超声或酶切的办法将染色质片段化。大部分实验室偏好于用前者,而很多做 ChIP 试剂盒的公司根据客户的需求(有些没有超声仪,有些把握不好超声条件),也大都推出了用广谱的核酸内切酶 MNase(Micrococcal Nuclease)酶切将染色质片段化的试剂盒。不管是用超声还是酶切,染色质片段化大小是 ChIP 实验的一个关键点。以超声为例,打断后的 DNA 片段大小以 200~1 000 bp 为宜。DNA
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