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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
18
- 供应商:
圻明
- 检测范围:
最低检测限0.28ng/ml
- 检测方法:
酶联免疫吸附试验法
- 应用:
论文文献
- 适应物种:
血清组织等
- 标记物:
同一名称不同种属
- 样本:
血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1200.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1800.0 |
(批内)的重复性和多次实验之间(批间)的重复性。CV值高则表明精确度低,通常由以下两个原因造成:
移液技术:移液时,枪头应对准孔中央,避免接触孔壁及底部;移液后轻轻晃动混匀试剂;如果您的样品具有黏性,请预先润洗枪头以消除表面张力的影响;吸液时等待片刻使体积平衡后再取出;移液不充分或移液体积不均,说明移液器需要校正;必要时请检查移液器并重新校正;加样时,不同的试剂标准品和样本间都要确保更换枪头,避免交叉污染;确保使用合适的枪头;不合适的枪头无法正确量取吸液和加样的体积
洗涤技术:如果使用自动洗板机或多通道移液器,请确保进出口能正常运作;最后一次洗涤后,翻转酶标板倒出多余的洗涤液,并在吸水纸上拍干液体。洗板太快或太慢都会降低精确度。不能让孔内液体自然风干,需立即进行下一步操作;按照说明书,添加足量的洗涤液至孔内,并保证洗涤完全;由于洗涤液不是通用的,当试剂盒内的洗涤液用完时,请不要使用其他试剂盒中的洗涤液。如有需要,可联系技术支持寻求帮助;不要减少洗涤时的浸泡时间或跳过浸泡的步骤;按照说明书上推荐的洗涤次数清洗,随意改变洗涤的次数会影响实验的精确性。
人肌腱蛋白X(TNX)酶联法试剂盒操作步骤看似简单,整个测定过程中却有诸多影响因素,导致检测结果可能与实际结果偏差较大。为帮助大家分析实验中常见问题,我们将常见问题的可能原因和解决方法归纳总结:
一、高背景或阴性对照值偏高问题及解决方法
1.阴性对照孔被阳性对照或样品污染:洗涤时,勿将洗液溢出孔外
2.抗体非特异性结合:封闭液不适合,更换封闭液
3.酶结合物过浓:请检查酶结合物是否按说明书规定稀释
4.孵育温度过高:检查孵育箱的温度是否正确、稳定
5.底物在使用前曝光:应保存在暗处,避光
6.读板前停留时间过长:加终止液后3分钟内读数
二、阳性对照值偏低或低吸光度
1.试剂未平衡至室温:实验开始前,将试剂盒从冰箱取出平衡至室温
2.检测体积偏小:检查移液器吸液管道是否堵塞
3.孵育时间过短:使用计时器,准确孵育时间
4.底物受污染:使用新配置的试剂,重新实验
5.包装袋中有湿气:检查袋中是否有干燥剂
6.样本中有抑制剂:叠氮钠会抑制HRP酶的活性
三、标准曲线不佳
1.倍比稀释标准品时未混匀:稀释标准品的每一步均需混匀
过早稀释:标准品在快要使用时稀释
加入的体积不正确:使用校准过的移液器,快速、等量的将标准品分配到各个微孔中
四、标准曲标准曲线良好,但样本无检测信号
1.样本中无检测物或检测物含量极低:设置内参,重新实验
2.样本中其他物质影响/掩盖检测:作适当稀释,降低其他物质的干扰,或作系列稀释,检测回收率
3.样本中检测物浓度过高,Hook效应导致假低值:适当倍数稀释样本,检测物浓度尽量在试剂盒检测范围内
五、重复性较差
1.微孔中有气泡:用针尖挑破气泡
2.试剂未混匀:确保充分混匀试剂
3.样本中有杂质或沉淀物:使用前离心
4.微孔包被面被吸头划破:加液时小心操作
5使用用过的封板胶纸:每次须使用新的封板胶封住反应孔
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文献和实验糖凝胶上检测分析。如图一所示 图一:2.2 超声破碎后,8000g,30秒,4°C,离心。将上清移入新的管子中。开始准备进行染色质免疫共沉淀(IP)。2.3 每份超声样品取50ul,这时的样品标记为INPUT,用于定量DNA浓度和作为PCR的空白对照。超声后的染色质应立刻冻入液氮中或者储存于-70°C可储存2个月。避免多次反复冻融。3检测DNA浓度1INPUT样品用于为后来的IP样品计算DNA浓度。DNA可采用PCR纯化试剂盒(加入70ul洗脱液,接着进入3.2a)或者采用酚/氯仿抽提(加入350ul
facility以及其下的标准安全步骤。腺病毒可通过加热或照射紫外线使其失去活性。 完整的基因表达系统 Adeno-X表达系统包括可连接的Adeno-X病毒DNA,pShuttle载体,PI-SceⅠ和I-CeuⅠ以及双消化缓冲液。我们同样提供仅包含线形化的Adeno-X病毒DNA或双消化缓冲液和酶的附属试剂盒用于补充基础系统。
计算出底物消耗速度或产物生成速度,将速度换算为μmol/min即是以国际单位表示的酶活性。 例如: 假设某一样品种的酶活性记为X U/L,取样品量VS(mL)与底物缓冲液Vr(mL)孵育,t min后加入终止液Ve(mL),检测到的净吸光度增加为A,该产物的摩尔消光系数为ε(一般可通过带标准求得),比色皿光径为 b cm。③ 连续监测法计算 酶与底物在特定条件下孵育,每隔一定时间(2-60 s)连续测定酶促反应过程中某一底物或产物的特征信号的变化,从而计算出每分钟的信号变化速率。连续监测法
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