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- 2026年04月25日
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- 提供商：
深圳市拓普生物科技有限公司
- 服务名称：
细胞转染
1、瞬时转染
采用瞬时转染的方法能够方便快捷地对基因功能进行研究与分析，且基因表达水平高，但通常只持续几天，多用于启动子和其它调控元件的分析。
服务流程
（1）进行预实验，通过转染含有GFP报告基因的质粒或荧光标记的siRNA优化转染条件；
（2）转染条件确定后，按照客户方案进行转染；
（3）Q-PCR或Western Blot检测转染效率.
客户提供
（1）待转染细胞株及细胞培养的相关信息；
（2）待转染的质粒；
（3）目的基因信息；
（4）目的蛋白抗体。
我们提供
（1）细胞培养及转染试剂；
（2）带有绿色荧光的细胞照片；
（3）实验原始数据，实验方法和结果报告单。
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文献和实验到细胞完全从壁上脱落下来为止。 （4） 加入1ml的含血清培养基终止反应。 （5） 用Tip头多次吹吸，使细胞完全分散开。 （6） 将培养液装入离心管中，1000rpm离心5min。 （7） 用培养液重悬细胞，细胞计数后选择0.8X106个细胞加入一个35mm培养皿。 （8） 将合适体积完全培养液加入离心管中，混匀细胞后轻轻加入培养皿中，使其均匀分布。 （9） 将培养皿转入CO2培养箱中培养，第二天转染。 2、细胞转染 （1）转染试剂的准备 A. 将400ul去核酸酶水加入管中
细胞转染的方法主要有三种，分别是磷酸钙-DNA 共沉淀法、DEAE-葡聚糖转染、脂质体介导 DNA 转染法，今天师兄就先从磷酸钙-DNA共沉淀法讲起。 磷酸钙-DNA共沉淀法 核酸以磷酸钙-DNA 共沉淀物的形式出现时，可使 DNA 附在细胞表面，这回利于细胞吞入摄取核酸，或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内，进入细胞的DNA，仅有1%～5%可以进入细胞核中，其中仅有不到1%的DNA可以与细胞 DNA 整合，在细胞中进行稳定表达，基因转导的频率大约为10-4，这项技术
稳定细胞株构建的第一个步骤就是细胞转染，这项实验的原理大家都清楚，但是为什么一上手就会出现多种问题，在实验第一步就栽了跟头呢？ 是细胞转染方法不对头？还是实验过程中的某个因素影响了转染效率？了解本文这11个注意事项，让你的细胞转染实验顺利通关！ 所谓转染，是指在真核细胞里导入具有生物功能的核酸并核酸的生物功能。通常选用的转染方法包括物理介导法（如电穿孔法、显微注射和基因枪等）、化学介导法（如磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、多种阳离子物质介导法）、生物介导法（如原生质体转染、病毒介导转染
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