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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
大量
- 英文名:
"Coomassie Brilliant Blue Staining Reagent(Staining Solution and Destaining Solution) "
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 保存条件:
2-8℃保存
- 规格:
100+500ML
考马斯亮蓝染色套装(染色液+脱色液)
英文名称 : "Coomassie Brilliant Blue Staining Reagent(Staining Solution and Destaining Solution) "储存条件 : 室温保存,至少一年有效。
单位 : 瓶
产品简介:
本考马斯亮蓝染色套装(Commassie Blue Staining Kit)采用了最经典的考马斯亮蓝染色和脱色方法,以考马斯亮蓝G-250为染料,可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色,或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。 产品内容:
考马斯亮蓝染色液 100ml
考马斯亮蓝脱色液 500ml
说明书 1份
使用方法:
1,电泳结束后,取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中(至少5倍胶体积),确保染色液可以充分覆盖凝胶。
2,将凝胶置于摇床上缓慢摇动,室温染色至少2小时,低丰度蛋白染色需4小时以上。
3,染色结束后移除染色液,染色液通常可重复利用2-3次,但染色效果会略有影响。
4,将凝胶浸泡于和染色液等量体积的脱色液中,摇床上脱色4-8小时,期间更换3-5次脱色液。
注意事项:
染色时间4小时以上效果最佳。
脱色可根据目的蛋白丰度和脱色效果随时终止,或延长脱色时间。
脱色越彻底,检测的蛋白量越低,脱色24小时一般可以检测出0.1ug蛋白量。
脱色后,将凝胶保存在水中,拍照或扫描保存图像。或制成干胶保存。
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文献和实验g ,加1mol/L HCl 48ml,加重蒸水80ml使其溶解,调pH6.7,定容至100ml, 4℃保存。5. TEMED(四乙基乙二胺)原液6.10%过硫酸铵(用重蒸水新鲜配制)7. pH8.3 Tris-甘氨酸电极缓冲液:称取Tris6.0g,甘氨酸28.8g,加蒸馏水约900ml,调pH8.3后,用蒸馏水定容至1000ml。置4℃保存,临用前稀释10倍。8. 考马斯亮蓝G250染色液:称100mg考马斯亮蓝G250,溶于200ml蒸馏水中,慢慢加入7.5ml 70%的过氯酸,最后补足水
ml,溴酚蓝0.5g,SDS l0g,溶于水,用HCI调PH至8.0,定容至500ml。( 11)脱色液 甲醇:乙酸:水=5:1 :5(体积比)( 12)染色液(0.25%考马斯亮蓝R250)1.00g考马斯亮蓝R250,用脱色液400ml溶解,过滤备用。( 13)低分子质量标准蛋白溶液,包括溶菌酶(MW=14400Da)大豆胰蛋白酶抑制剂(215000)、碳酸酐酶(310000)、卵白蛋白(450000)、牛血清白蛋白 (662000)、磷酸化酶B (925000)。用样品缓冲液配成2mg/ml
(脱色液I加入0.25%考马斯亮蓝R―250)的容器内,脱色摇床染色2h或过夜。②弃去染色液,将凝胶在脱色液I(乙醇:冰乙酸:水=25:8:65)中继续在摇床上震荡脱色。为脱色完全,需数次更换脱色液I。③当凝胶上的斑点清晰、凝胶背景较浅时,倒去脱色液I,加入脱色液Ⅱ,凝胶置于脱色液Ⅱ(乙醇:冰乙酸:水=10:15:175)中保存。 (2)快速银染的主要步骤:45%乙醇+5%乙酸固定60min,水洗每次45min,共2次。用0.02%Na2 S2 03 敏化l~2min,水洗每次1min
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