超低分子量蛋白Marker IV(3.3～45kD)现货

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

超低分子量蛋白Marker IV(3.3～45kD)现货由老牌试剂供应北京百奥莱博供货并提供技术支持，本产品用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多超低分子量蛋白Marker IV(3.3～45kD)等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：超低分子量蛋白Marker IV(3.3～45kD)现货
编号：RFT047
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：10T(50μl)
本产品包含2种多肽和3种低分子量蛋白质组成，分子量范围为3.3kD-45kD。可以用来判断 SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。



使用说明：
第一次收到该产品，室温融化后，彻底混匀，离心快甩将溶液完全收集到管底，根据需要适量分装成小管，-20℃贮存，每次取一小管使用；本产品每次使用前，要95℃加热处理5分钟。

一. 制胶：
I 配制分离胶
1．按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(19:1)、凝胶缓冲液和乙二醇加入到小烧杯中混合。
2．加入10%APS和TEMED，立即混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。
3．在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 cm的水层，使凝胶表面保持平整。
4．静置5-10分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。
表一 (一块0.75mm mini胶用量)

 

	分离胶	浓缩胶
	18％T, 5%C /6.0ml	5％T, 3.3%C/2 ml
40% PAA(19:1)	2.7 ml	/
40% PAA (29:1)	/	0.25 ml
4×多肽电泳凝胶缓冲液	1.5 ml	0.5 ml
乙二醇(电泳级)	1.8 ml	/
ddH2O	/	1.25 ml
10％APS	50-65μl	20μl
TEMED	6μl	2μl

注：如非必须，不要使用1.0mm和1.5mm的凝胶，尽量使用厚度0.75mm的凝胶，这样会减少电泳后染色和脱色的时间。
II 配制浓缩胶
去除覆盖在分离胶上的水层，用滤纸将残留的水吸去。
1．按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA(29:1)和凝胶缓冲液加入到小烧杯中混合。
2．加入10%过硫*(代"酸")铵和TEMED，立即混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。
3．将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
4．静置20-30分钟装待凝胶聚合

二. 电泳：
1. 取一管分装好的Marker样品，彻底融化，95℃加热处理5分钟，充分混匀后备用。
2. 电泳前，将10×Tris-Tricine-SDS电泳缓冲液用蒸馏水稀释成1×缓冲液备用。将电泳槽的内外槽加入1×缓冲液，轻柔拔出梳子，将Marker或蛋白样品(样品已经过2×Tricine上样缓冲液处理)加入点样孔，根据表二条件进行电泳，至蓝色指示前沿至分离胶3/4位置时即可停止电泳。整个电泳过程大约需要2-3个小时。
注：如果电泳时间过短，染色时，指示前沿容易遮挡小于5kd的小肽。
表二 多肽电泳条件

恒电压	150 V
起始电流	45-55 mA
结束电流	10-15 mA
电泳时间	2-3小时

三. 染色
根据常规实验步骤进行染色和观察。

储存条件：-20℃，有效期12个月。

超低分子量蛋白Marker IV(3.3～45kD)现货极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·Timentin溶液(100mg/ml)
编号：RFT186
英文名称：Timentin Solution
规格：5×1ml

·高保真平末端pfu DNA聚合酶
编号：RFT101
英文名称：pfu DNA Polymerase
规格：100U(40μl)|5×100U(5×40μl)
本品是嗜热古细菌来源的DNA聚合酶，该酶除具有5’-3’DNA聚合酶活性外，还具有很强的3’-5’外切酶活性，增强了PCR扩增的保真度。与Taq酶相比，pfu聚合酶热稳定性更好，更能忍耐较高的变性温度。Pfu的保真性是Taq DNA聚合酶的10-15倍。延伸速度为0.5kb/分钟。PCR产物3’端不带碱基A，为平滑末端，要通过平滑末端克隆法进行克隆。适用于高保真的DNA片段的扩增、DNA片段的平滑化。

试剂盒组成：
pfu DNA Polymerase(2.5U/μl)-————————40μl
10×pfu PCR buffer(含Mg2＋)—————————1ml

活性定义：1单位(U) pfu DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。

贮存液：50 mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50 mM KCl ; Stabilizers; 50% glycerol

使用方法：
1、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系：

成分	20μl反应体系	50μl反应体系	终浓度
Template	0.04-0.2 μg	0.1-0.5 μg	as you wish
Primer 1(10μM)	0.4μl	1μl	0.2μM
Primer 2(10μM)	0.4μl	1μl	0.2μM
10×pfu PCR buffer(含Mg2+)	2μl	5μl	1×
dNTP Mixture(10 mM)	0.4μl	1μl	200μM each
pfu (2.5 U/μl)	0.4μl	1μl	0.05U/μl
ddH2O	up to 20μl	up to 50μl	-

注1：如果需要改变Mg2+浓度，根据下表调节

PCR反应体系中Mg2+终浓度	2 mM	2.5 mM	3 mM	4 mM
20μl反应体系中25 mM MgSO4加入量	0μl	0.4μl	0.8μl	1.6μl
50μl反应体系中25 mM MgSO4加入量	0μl	1μl	2μl	4μl

注2：配制反应液时，请最后加入pfu，因为本酶有很强的3’-5’外切酶活性，有可能降解引物。
2、混匀后，离心快甩将反应液收集到管底。
3、PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。
4、PCR仪上执行以下程序：

步骤	温度	时间	循环数
初始变性	94℃	3-5 min	1
变性	94℃	30 sec	25-40*
退火	50-60℃*	30 sec
延伸	72℃	0.5kb/min*
最后延伸	72℃	5 min	1

注：PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件(温度、时间等)。

注意事项：
1、pfu 酶具有 3’-5’的外切酶活性，所以 pfu 酶扩增时延伸速度远比 Taq 酶低，应根据扩增产物的长度设置相应的延伸时间，一般情况下 pfu 酶的延伸速度为每分钟 0.5kb；同时 pfu 酶的 3’-5’的外切酶活性可能降解引物，所以应最后把pfu 酶到反应体系中，并立即进行 PCR 反应。
2、pfu 酶的热稳定性比 Taq 酶好，对于 GC 含量很高的模板，变性温度可以提高到98℃，对 pfu 酶的活性无影响。

储存条件：-20℃，有效期一年。


超低分子量蛋白Marker IV(3.3～45kD)现货关键词：超低分子量蛋白Marker IV,3.3～45kD,超低分子量蛋白Marker IV(3.3～45kD),百奥莱博,RFT047

ARB10642 人血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)Elisa方法检测 Human vascular endothelial cell growth factor d,vegf-d ELISA KIT
F030311 胶体金标记羊抗乙肝核心抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBcAg*GOLD
N-乙酰-L-赖*酸 Cesium sulfate 1946-82-3
细胞核蛋白与细胞浆蛋白提取试剂盒   50T|100T
ARB14206 人白介素32(IL-32)Elisa定量检测 Human interleukin 32,IL-32 ELISA KIT
ARB13523 鱼磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)尿液中含量检测 Fish ampk ELISA KIT
31282-04-9 潮霉素B Hygromycin B
α-甘油磷酸脱*酶 TBAB 9075-65-4
酒石酸* L-Leucine 6100-19-2
尿酮体定性检测试剂盒(Lange法)   50T
SJ0197 DEAE Sepharose CL-6B
*化底醚翁 Glycerol phosphate calcium salt 518-67-2?
植物总糖和还原糖检测试剂盒(硝基水杨酸法)   50T|100T
BTN60608 固相内毒素清除剂 Surface Endotoxin Erasol
BTN101121 柱式软骨RNAOUT Colume Cartilage RNAOUT
超低分子量蛋白Marker IV(3.3～45kD)现货关键词：超低分子量蛋白Marker IV,3.3～45kD,超低分子量蛋白Marker IV(3.3～45kD),百奥莱博,RFT047

氧钒酞菁 Astaxanthin 13930-88-6
碱性磷酸酶缓冲液(pH9.5)   500ml
硫堇 Kallikrein from porcine pancreas 581-64-*(代"6")
J0207                 兔抗乙肝E抗原抗血清                              
P:C:I(125:24:1,pH﹤5.0)   100ml
ARB14237 猪蓝耳病毒(PRRSV)Elisa定量检测 
硅钨酸 8-Hydroxyquinaldine 12027-43-9
BL0856 兔抗猴IgG纯化抗体
F020231 兔抗绵羊/山羊IgG抗体 Rabbit Anti-Goat IgG
丁胺卡那霉素溶液(50mg/ml) Amikacin 50mg/ml 10ml
3810-74-0 Streptomycin    硫*(代"酸")链霉素
邻*二甲*(代"酸")二己酯 Putrescine dihydrochloride 84-75-3
ARB11085 人肾损伤分子1(KIm-1)含量检测 Human kidney injury molecule 1,kim-1 ELISA KIT
L-组*酸盐*(代"酸")盐一水物 L-Asparagine 5934-29-2
548-62-9 结晶紫
聚氧乙*(代"烯")月桂醚 Sodium 1-heptanesulfonate 9002-92-0
BL0905 FITC标记羊抗鸡IgG抗体
18883-66-4 链脲佐菌素 Streptozocin (STZ)
*酚蓝* D-Ornithine HCL 34725-61-6
F030104 HRP标记小鼠抗HIS标签抗体 Monoclonal Mouse Anti-His*HRP

我公司生产供应销*(代"售")的蛋白质研究正全品类优惠促销，十分期待您的咨询选购超低分子量蛋白Marker IV(3.3～45kD)现货。