北京现货BSA TBS缓冲系统封闭液品牌

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货BSA TBS缓冲系统封闭液品牌，我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货BSA TBS缓冲系统封闭液品牌
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：500ml
产品保存：4℃保存，一个月有效
产品特点：
1.相容性好，可用于其它的免疫检测封闭。
2.快速。
3.高信噪比，背景更干净。

北京现货BSA TBS缓冲系统封闭液品牌极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：
ARB11337 人胎盘蛋白(PP)酶免分析 Human placental protein,pp ELISA KIT
ARB13182 小鼠胰岛素(INS)血清中含量检测 Mouse insulin,ins ELISA KIT
乙酸*溶液(3mol/L,pH6.0,无菌)   500ml
10127-02-3 Acridine Orange  吖啶橙
ARB13517 鱼类皮质醇(CortIsol)含量测试 Fish cortisol ELISA KIT
BL0906 FITC标记兔抗猴IgG抗体
F030837 BIOTIN标记山羊抗人IgG FC抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG FC*BIOTIN
PY02-079  明胶培养基基础  250克  
ARB11173 人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA检测服务 Human monocyte chemotactic protein 4,mcp-4 ELISA KIT
ARB10163 人TGF-β诱导早期基因1(TIEG1)酶免分析 Human tgf-beta-inducible early response gene-1,tieg1 ELISA KIT
肉桂酰胺 Lysing Enzymes 621-79-4
BL0764 Oligo(dT)15 Prirner
磷酸化蛋白提取试剂盒 Phosphorylated protein extraction kit  50T|100T
ARB10005 人11-去*血栓烷B2(11-DH-TXB2)免费代测 Human 11-dehydro-thromboxane b2,11-dh-txb2 ELISA KIT
ARB11456 人特异性免疫球蛋白E(sIgE)elisa测定使用说明书 Human specific immunoglobulin e,sige ELISA KIT
BTN130957 免RNA提取RT-PCR试剂盒 Cell Lysate RT-PCR Mix
PY02-170  支原体琼脂培养基基础  50克  
ARB12724 小鼠17羟孕酮(17-OHP)ELISA检测服务 Mouse 17-hydroxyprogesterone,17-ohp ELISA KIT
海因 Ficoll70 461-72-3
BTN70602 DNA快速连接试剂盒 Rapid DNA Ligation Kit
BL1386 SABC小鼠IgG-FITC/POD双标kit
北京现货BSA TBS缓冲系统封闭液品牌关键词：ZN1908,百奥莱博,BSA TBS缓冲系统封闭液

70024-90-7 人血清白蛋白 Albumin  Human
ARB13197 小鼠脂蛋白α(Lp-α)Elisa方法检测 Mouse lipoprotein α,lp-α ELISA KIT
BTN130638 核酸内切酶IV Endonuclease IV
HC0082 0.5mlPCR管
脂肪组织固定液   500ml
ARB14161 植物细胞分裂素(CYT)酶免分析 
ARB12481 大鼠前列腺酸性磷酶(PACP)血清中含量检测 
DNA非变性加样缓冲液(2×)   5ml
橙黄Ⅳ HPCD 554-73-4
2-*酚 Amylose from potato 135-19-3
ARB14225 猪口蹄疫抗体(FMD-Ab)elisa检测说明书 
ARB10420 人丙*酸转*酶/谷丙转*酶(ALT/GPT)含量检测 Human alanine aminotransferase,alt/gpt ELISA KIT
ARB12567 大鼠胶原酶Ⅱ(CollAgenAse Ⅱ)Elisa定量检测 Rat collagenase type Ⅱ ELISA KIT
ARB12114 大鼠可溶性白介素6受体(sIL-6R)ELISA检测服务 Rat soluble interleukin 6 receptor,sIL-6r ELISA KIT
J0301 兔抗人IgG(H+L)抗血清 1ml/10ml
ARB13013 小鼠抗凝血酶受体(ATR)Elisa分析 Mouse anti-thrombin receptor,atr ELISA KIT
BTN101113 柱式软体动物RNAOUT Column Mollusk RNAOUT
甘油激酶 Strepomycin sulfate 9030-66-4
超低分子量蛋白Marker(3.3-22KD) 10次
17504-044 B-27无血清添加剂
ARB10468 人白三烯D4(LTD4)尿液中含量检测 Human leukotriene d4,lt-d4 ELISA KIT
北京现货BSA TBS缓冲系统封闭液品牌关键词：ZN1908,百奥莱博,BSA TBS缓冲系统封闭液


·人IL8重组蛋白
编号：ZN1662
规格：100ng
来源：大肠杆菌
特异性：人
应用：WB 阳性对照
形态：冻干粉
纯度：>98%，RP-HPLC&SDS-PAGE
保存条件：-20℃保存 1 年以上，避免反复冻融。

·WNT9A mRNA原位杂交试剂盒
编号：ZN1500
规格：100T
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：hμman
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.WNT9A mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛")：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
WNT9A的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。

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