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蛋白质银染检测试剂厂家现货

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  • ¥140 - 2160
  • 百奥莱博
  • ZN1894-ZBA
  • 北京
  • 2025年07月15日
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      ,一年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

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      4℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专业生产销*(代"售")蛋白质银染检测试剂厂家现货,我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:蛋白质银染检测试剂厂家现货
    编号:ZN1894
    规格:40次
    产地:国产|进口
    产品规格:
    可使用 30次
    增敏液 30ml(100×)银染液 30ml(100×)
    显色液 A 1.5ml 显色液 B 120ml×5(5×)
    产品保存:4℃保存,一年有效。银染液和显色液 A 需避光保存。
    使用方法:
    1.电泳结束后,取凝胶放入约 100ml 固定液中,在摇床上室温摇动 20分钟,摇动速度为60-70rpm。
    固定液的配制(自备):加入 50ml 乙醇、10ml 冰乙酸和 40ml 去离子水,混匀。
    2.弃固定液,加入 100ml 30%乙醇,在摇床上室温摇动 10min,摇动速度为60-70rpm。
    30%乙醇的配制(自备):70ml 去离子水中加入 30ml 乙醇,混匀。
    3.弃 30%乙醇,加入 200ml 去离子水,在摇床上室温摇动 10分钟,摇动速度为60-70rpm。
    4.弃水,加入 100ml 增敏液(1×),在摇床上室温摇动 2分钟,摇动速度为60-70rpm。
    增敏液(1×)的配制:99ml 去离子水中加入 1ml 增敏液(100×),混匀。增敏液(1×)配制后需在2小时内使用。
    5.弃原有溶液,加入 200ml 去离子水,在摇床上室温摇动 1min×2,摇动速度为60-70rpm。
    6.弃水,加入 100ml 银染液(1×),在摇床上室温摇动 20分钟,摇动速度为60-70rpm。
    银染液(1×)的配制:99ml 去离子水中加入 1ml 银染液(100×),混匀。银染液(1×)配制后需在2小时内使用。
    7.弃原有溶液,加入 100ml 去离子水,在摇床上室温摇动 0.5min×2,摇动速度为60-70rpm。
    8.弃水,加入 100ml 显色液,在摇床上室温摇动 3-10分钟,直至出现比较理想的预期蛋白条带,摇动速度为60-70rpm。
    显色液的配制:80ml 去离子水中加入 20ml 显色液 B(5×),再加入 0.05ml 显色液 A,混匀后即为显色液。显色液配制后需在 20分钟内使用。
    9.弃显色液,加入 100ml 终止液,在摇床上室温摇动 10分钟,摇动速度为60-70rpm。
    终止液的配制(自备):95ml 去离子水中加入 5ml 冰乙酸,混匀。
    10.弃终止液,加入去离子水,在摇床上室温摇动 2-5分钟,摇动速度为60-70rpm。
    11.保存显色出的蛋白质条带并记录。
    注意事项:
    1.需自备乙醇和冰乙酸(分析纯)。
    2.请严格按照产品使用说明书进行操作。
    3.显色过程很快,要注意把握时间,避免染色过度。
    4.所用器皿要很洁净,不用手直接接触,以免杂蛋白污染。
    5.尽量用高纯度去离子水,蒸馏水更佳,可以减少背景着色。
    6.本试剂盒也可以用于2D凝胶的银染,并且染色后和后续的质谱检测兼容。
    7.使用说明中的使用次数及各种溶液的使用量适用于大小为8×10cm厚度为0.75-1mm的凝胶。
    对于更大的凝胶,各种溶液的使用量需按凝胶面积的比例放大,对于更厚的凝胶,作用时间需按照厚度的比例适当延长。
    8.对于 BSA 蛋白,检测灵敏度可以达到 0.5ng
    9.使用本试剂盒只需 90分钟即可完成银染实验。

    蛋白质银染检测试剂厂家现货正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:

    ·Tau mRNA原位杂交试剂盒
    编号:ZN1356
    规格:100T
    基本信息:
    保存条件:4℃保存一年
    工作量:100张切片。
    有效期:一年。
    适用种属:hμman,rabbit,rat,mouse
    标记方式:3’—尾段标记
    试剂盒中内容:
    1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
    2.预杂交液 2ml;
    3.Tau mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml;
    4.封闭液 5ml;
    5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml;
    6.SABC-POD 5ml;
    7.生物素化过氧化物酶 5ml。
    用户自备试剂:
    原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
    缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
    一.培养细胞和冰冻切片
    准备工作:
    固定液:4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
    3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
    2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
    0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
    0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
    20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
    原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
    操作程序:
    注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
    1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
    2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
    3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
    4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
    5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
    6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
    7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
    8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
    9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
    10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
    11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛"):37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
    12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
    13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
    14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
    15.必要时苏木素复染,充分水洗。
    16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
    二.石蜡切片
    如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
    1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
    2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
    3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
    4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
    结果观察:
    Tau的细胞胞浆着色呈棕黄色。
    注意事项:
    由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。


    蛋白质银染检测试剂厂家现货关键词:蛋白质银染检测试剂,百奥莱博,ZN1894


    ·Casein Kinase Iα mRNA原位杂交试剂盒
    编号:ZN0187
    规格:100T
    基本信息:
    保存条件:4℃保存一年
    工作量:100张切片。
    有效期:一年。
    适用种属:hμman,rat,mouse
    标记方式:3’—尾段标记
    试剂盒中内容:
    1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
    2.预杂交液 2ml;
    3.Casein Kinase Iα mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml;
    4.封闭液 5ml;
    5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml;
    6.SABC-POD 5ml;
    7.生物素化过氧化物酶 5ml。
    用户自备试剂:
    原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
    缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
    一.培养细胞和冰冻切片
    准备工作:
    固定液:4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
    3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
    2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
    0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
    0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
    20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
    原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
    操作程序:
    注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
    1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
    2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
    3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
    4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
    5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
    6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
    7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
    8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
    9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
    10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
    11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛"):37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
    12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
    13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
    14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
    15.必要时苏木素复染,充分水洗。
    16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
    二.石蜡切片
    如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
    1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
    2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
    3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
    4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
    结果观察:
    Casein的细胞胞浆着色呈棕黄色。
    注意事项:
    由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。


    蛋白质银染检测试剂厂家现货关键词:蛋白质银染检测试剂,百奥莱博,ZN1894

    SJ0755 *化锰
    CYB164010 兔抗狗IgG-HRP
    ARB13530 兔β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)代做ELISA实验 Rabbit amyloid beta Peptide 1-40,aβ1-40 ELISA KIT
    ARB13557 兔子内皮型一氧化*(代"氮")合成酶3(eNOS-3)Elisa方法检测 Rabbit endothelial nitric oxide synthase 3,enos-3 ELISA KIT
    NF-202 羊抗人APO-B血清
    BL0884 兔抗猴IgG免疫血清 0.5ml
    Mallory PTAH染色液(化学氧化法)   100ml
    ARB10842 人抗呼吸道合胞病毒抗体(RSV)ELISA代测服务 Human anti-respiRatory syncytial virus antibody,rsv ELISA KIT
    ARB10311 人巨噬细胞趋化因子(MCF)含量测试 Human macrophage chemotatic factor,mcf ELISA KIT
    ARB11609 人脱氧吡*(代"啶")酚/脱氧吡*(代"啶")啉(DPD)尿液中含量检测 Human deoxypyridinoline,dpd ELISA KIT
    考马斯亮蓝快速染色液   "100ml
    酚酞单磷酸环己*(代"胺")盐 Besmarck brown Y 14815-59-9
    ARB12677 大鼠颗粒酶B(Gzms-B)酶免分析 Rat granzymes b,gzms-b ELISA KIT
    ARB10786 人抗巨噬细胞抗体(Anti-mAcrophAge Ab)酶标法分析 Human anti-macrophage antibody ELISA KIT
    BL1365 2×RNA Loading Buffer(变性) 
    62758-13-8 Resazurin sodiu*(代"m") salt刃天青
    白蛋白检测试剂盒(*甲*(代"酚")绿比色法)   100T
    ARB13962 猪氧化低密度脂蛋白(OxLDL)Elisa定量检测 Porcine oxidized lowdensity lipoprotein,oxldl ELISA KIT

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