北京小鼠MMP7重组蛋白价格

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名称：北京小鼠MMP7重组蛋白价格
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：100ng
来源：大肠杆菌
特异性：小鼠
应用：WB 阳性对照
形态：冻干粉
纯度：>98%，RP-HPLC&SDS-PAGE
保存条件：-20℃保存 1 年以上，避免反复冻融。

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·二乙酸荧光素(FDA)
编号：ZN1972
规格：1g/5g
产品性状：白色固体粉末
产品保存：避光-20℃保存，一年有效
产品说明：
二乙酸荧光素(Fluorescein Diacetate,FDA)是一种常用的培养动植物细胞以及植物细胞原生质体的生活力鉴定染料，其染色机理也利用了死活细胞在代谢上的差异：FDA本身不产生荧光，也无极性，能自由渗透出入完整的细胞膜。当 FDA 进入活细胞后，被细胞内的脂酶分解，生成有极性的、能产生荧光的物质——荧光素，该物质不能自由透过活的细胞膜，积累在细胞膜内，因而使有活力的细胞产生绿色荧光；而无活力的细胞因不能使 FDA 分解，而无法产生荧光。FDA 也可用于流式细胞仪。荧光素的激发和发射波长分别是 488nm和 530nm。
使用方法：
(1)配制溶液：将 FDA 溶于丙*(代"酮")中，配成浓度为5 mg./ml的溶液，置于 4℃冰箱中保存。染色时将 FDA 加入到细胞液中，使其终浓度为100μg/ml。
(2)活细胞染色：取处于对数增长期的细胞液，离心浓缩，生理盐水清洗1次，加入 FDA，在室温黑暗处放置 5 min 染色；染色后离心，生理盐水清洗1-2次，最后用蒸馏水悬浮细胞，涂片观察。
(3)死亡细胞胞染色：取鲁哥氏溶液固定的死亡细胞按活细胞相同的方法进行染色。
(4)观察：用荧光显微镜观察和拍照(明场和荧光分别拍照，物镜使用 20×)。活细胞被 FDA 染成亮绿色，当细胞膜受损，荧光素无法在细胞内累积，而使细胞无法发出荧光。活性高的细胞发出强烈的绿色荧光，活性弱或死亡的细胞发光较弱或不发光。
注意事项：
(1)使用方法可依据细胞的具体情况适当调整。
(2)鲁哥氏即 Lugol’s 溶液，也就是碘液。取 6 克碘化*溶于 20 毫升蒸馏水中，搅拌到溶解后，加入 4 克碘，等碘充分溶解，再加入 80 毫升蒸馏水，贮存在棕色
试剂瓶内。


北京小鼠MMP7重组蛋白价格关键词：小鼠MMP7重组蛋白,百奥莱博,ZN1786


·PKL mRNA原位杂交试剂盒
编号：ZN1142
规格：100T
基本信息：
保存条件：4℃保存一年
工作量：100张切片。
有效期：一年。
适用种属：rat
标记方式：3’—尾段标记
试剂盒中内容：
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml；
2.预杂交液 2ml；
3.PKL mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml；
4.封闭液 5ml；
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml；
6.SABC-POD 5ml；
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂：
原位杂交专用盖玻片；POLY-L-LYSINE；DEPC；20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC，0.5×SSC，0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一．培养细胞和冰冻切片
准备工作：
固定液：4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)；1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g，柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O，分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序：
注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2．细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛")：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染，充分水洗。
16.酒精脱水，二甲*透明，封片。
二．石蜡切片
如果有条件的话，应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后，及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6)，含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。
1．常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2．玻片的处理：一般采用多聚赖*酸或APES。
3．石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀)，37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间，例如5分钟,10分钟，20分钟，30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察：
PKL的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项：
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数，加上基因仅由四个碱基排列组合而成，因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照，基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时，用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释，一般稀释2—10倍；并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况；如果出现大量的细胞核着色，往往和标本固定时间过长有关，应重新处理标本。


北京小鼠MMP7重组蛋白价格关键词：小鼠MMP7重组蛋白,百奥莱博,ZN1786

三(2-羧乙基)膦盐*(代"酸")盐 Glutathione Reductase from baker"s yeast 51805-45-9
Weil髓鞘染色液   4×50ml
9039-53-6 尿激酶 Urolinase
ARB11445 人核糖核酸酶(RNASE)Elisa分析 Human ribonuclease,rnase ELISA KIT
ARB14227 鸡新城疫病毒抗体(NDV-Ab)Elisa方法检测 
ARB12445 大鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)代做ELISA实验 Rat helicobacter pylori igg,hp-igG ELISA KIT
TMB显色液(沉淀型，组化或膜HRP显色用) 100ml
ARB12289 大鼠抗内皮细胞抗体(AECA)酶标法分析 Rat anti-endothelial cell antibody,aeca ELISA KIT
BOC-D-谷*酸 DNJ 34404-28-9
L-来苏糖 CHAPS 1949-78-6
詹纳斯绿B染色液  0.2%|0.5% 10ml
PY08-066  PH7.0*化*蛋白胨缓冲液 225ml  20瓶/箱，用于样品的稀释液
嗪草酮 Cinnamamide, Predominantly trans 21087-64-9

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