Perfectstart Taqman qPCR maste

qPCR常见问题及其分析

-110%之间都是可以接受的。3. 如何评估实时定量PCR反应的效果PCR扩增效率：为了正确地评估PCR扩增效率，至少需要做3次平行重复，至少做5个数量级倍数(5logs)连续梯度稀释模板浓度。常见问题1. 无Ct值出现检测荧光信号的步骤有误: 一般SG法采用72℃延伸时采集，Taqman法则一般在退火结束时或延伸结束采集信号。引物或探针降解: 可通过PAGE电泳检测其完整性。模板量不足: 对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起。模板降解: 避免样品制备中杂质的引入及反复冻融的情况。2. Ct

定量PCR Taqman探针试剂之选

-PCR试剂盒还会有逆转录酶——这里有个一步法和两步法的区别，一般而言两步法较灵活，一次cDNA反应可以进行多次PCR反应，而一步法就相对简单快速。ABI有个通用型的一步法试剂盒（Universal PCR Master Mix），这个试剂盒其实也就是Core Reagents试剂盒的成份，但是已经预混合起来的，并且在此基础上加入了一些额外的成份帮助完成简单高效的Taqman探针定量PCR反应，反响不错，甚至对于一些“刻薄”的G/C富集的模板也得到了相当不错的结果。 Qiagen的Quantitect

Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手

。现在已经涉及到生命科学研究的各个领域，比如基因的差异表达分析，SNP 检测，等位基因的检测，药物开发，临床诊断，转基因研究等。 在 Real-time qPCR 技术的发展过程中，定量 PCR 仪的发展起了至关重要的作用。1995 年，美国 PE 公司（已经并入 Invitrogen 公司）成功研制了 Taqman 技术，1996 年推出了首台荧光定量 PCR 检测系统，通过检测每个循环的荧光强度，通过 Ct 值进行数据分析。从而荧光定量 PCR 获得广泛应用。现在的定量 PCR 仪有 ABI