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/粮食、水质、转基因、化妆品和纺织品等领域,涉及微生物、营养成分、添加剂、非法添加
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文献和实验片段,这表明提取物中有植物DNA 。2和8中的118 bp 条带代表大豆凝集素的基因,这可以证实大豆DNA的存在。在另两组中,假如我们分别在727bp (NOS 扩增产物)和199bp (35S的扩增产物)处看到产物片段,就可确定所分析的大豆粉中含有转基因成分。同时,即使只扩增出这两个产物中的其中一个,仍可认为该样本含转基因成分。 图2显示的实验结果,我们可以看到在转基因大豆中可扩增出所有4个序列,而非转基因大豆中只扩增出叶绿体基因和Lectin基因序列。
、空白对照和进口大豆的双重PCR产物以及阴性非转基因大豆的内源基因PCR产物同时用毛细管电泳和琼脂糖凝胶电泳进行了比较实验,传统的琼脂糖凝胶电泳结果可见,进口大豆和阳性对照的转基因大豆标准均扩增出2个条带,分别为125bp和142bp;作为阴性对照的非转基因大豆仅能扩增出内源基因的118bp条带;用无菌水作模板的空白对照不能扩增出任何条带。比较琼脂糖凝胶电泳与毛细管电泳的结果,两者基本一致。 毛细管电泳采用上万伏的高电压,能更有效地分离差异较小的片段.并能在较短的时间内完成分析。本实验目标DNA
可以同时检测出转基因大豆样品中三种外源基因,双重PCR扩增产物经测序证实与原基因序列完全一致,表明本研究设计的引物合理,扩增结果可靠。毛细管电泳进样量仅需5nl,分析时间为24min,迁移时间的相对标准偏差≤3.2。结论本方法较常规琼脂 糖凝胶电泳特异性高,分析时间短,重现性好,检测灵敏,适合于大豆中转基因成分的快速检测。 【关键词】双重PCR ;激光诱导荧光-毛细管电泳;转基因大豆PCR产物检测;羟丙基甲基纤维素 随着转基因农作物的大量种植,其安全性问题也日益受到人们的重视。2002
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