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PIWIL2 mRNA原位杂交试剂盒哪里卖

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  • ¥140 - 1560
  • 百奥莱博
  • ZN1128-JVW
  • 北京
  • 2025年07月10日
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      一年

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

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      4℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括PIWIL2 mRNA原位杂交试剂盒哪里卖在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。


    名称:PIWIL2 mRNA原位杂交试剂盒哪里卖
    品牌:百奥莱博
    产地:国产|进口
    编号:ZN1128
    基本信息:
    保存条件:4℃保存一年
    工作量:100张切片。
    有效期:一年。
    适用种属:hμman
    标记方式:3’—尾段标记
    试剂盒中内容:
    1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
    2.预杂交液 2ml;
    3.PIWIL2 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml;
    4.封闭液 5ml;
    5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml;
    6.SABC-POD 5ml;
    7.生物素化过氧化物酶 5ml。
    用户自备试剂:
    原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
    缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
    一.培养细胞和冰冻切片
    准备工作:
    固定液:4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
    3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
    2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
    0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
    0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
    20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
    原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
    操作程序:
    注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
    1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
    2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
    3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
    4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
    5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
    6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
    7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
    8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
    9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
    10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
    11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛"):37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
    12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
    13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
    14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
    15.必要时苏木素复染,充分水洗。
    16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
    二.石蜡切片
    如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
    1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
    2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
    3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
    4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
    结果观察:
    PIWIL2的细胞胞浆着色呈棕黄色。
    注意事项:
    由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。

    更多有关PIWIL2 mRNA原位杂交试剂盒哪里卖的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
    硼*(代"酸")标记缓冲液(pH9.2)   500ml
    ARB12809 小鼠一氧化*(代"氮")合成酶(NOS)Elisa定量检测 Mouse nitric oxide synthase,nos ELISA KIT
    1637-39-4 Trans-Zeatin  反玉米素
    5-*基乙酰丙*(代"酸")盐*(代"酸")盐 Heptadecanoic acid 5451-09-2
    ARB11607 人脱*表雄酮S7(DHEA-S7)elisa检测操作说明书 Human dehydroepiandrosterone s7,dhea-s7 ELISA KIT
    BTN120412 微球菌核酸酶 Micrococcal Nuclease
    TEMED   5×1ml|10ml
    十五醇 MDH 629-76-5
    ARB14133 人SlIt2 酶免分析 
    ARB11765 人腺苷脱*酶(ADA)ELISA检测服务 Human adenosine deaminase,ada ELISA KIT
    ARB11840 人凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA代测服务 Human coagulation factor Ⅸ,fⅨ ELISA KIT
    BL0628 赖*酸-琼脂糖凝胶4B lysine Sepharose 4B
    链脲佐菌素 CBZ-L-Tryptophan 18883-66-4
    BTN131123 考马斯亮蓝G-250 Coomassie Blue G-250
    F030808 BIOTIN标记山羊抗小鼠IgG1抗体 Goat Anti-Mouse IgG1*BIOTIN
    ARB10599 人血小板活化因子(PAF)ELISA检测服务 Human platelet activating factor,paf ELISA KIT
    ARB12075 大鼠内皮型NO合酶(eNOS)Elisa定量检测 Rat endothelial nitric oxide synthase enos  ELISA KIT
    ARB12730 小鼠60000SSA抗体尿液中含量检测 Mouse 60000ssa ELISA KIT
    PIWIL2 mRNA原位杂交试剂盒哪里卖关键词:百奥莱博,ZN1128,PIWIL2 mRNA原位杂交试剂盒


    ·人P-cadherin重组蛋白
    编号:ZN1693
    规格:100ng
    来源:大肠杆菌
    特异性:人
    应用:WB 阳性对照
    形态:冻干粉
    纯度:>98%,RP-HPLC&SDS-PAGE
    保存条件:-20℃保存 1 年以上,避免反复冻融。

    ·KCNK3 mRNA原位杂交试剂盒
    编号:ZN0810
    规格:100T
    基本信息:
    保存条件:4℃保存一年
    工作量:100张切片。
    有效期:一年。
    适用种属:hμman,rat,mouse
    标记方式:3’—尾段标记
    试剂盒中内容:
    1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
    2.预杂交液 2ml;
    3.KCNK3 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml;
    4.封闭液 5ml;
    5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml;
    6.SABC-POD 5ml;
    7.生物素化过氧化物酶 5ml。
    用户自备试剂:
    原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
    缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
    一.培养细胞和冰冻切片
    准备工作:
    固定液:4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
    3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
    2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
    0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
    0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
    20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
    原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
    操作程序:
    注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
    1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
    2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
    3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
    4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
    5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
    6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
    7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
    8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
    9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
    10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
    11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛"):37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
    12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
    13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
    14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
    15.必要时苏木素复染,充分水洗。
    16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
    二.石蜡切片
    如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
    1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
    2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
    3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
    4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
    结果观察:
    KCNK3的细胞胞浆着色呈棕黄色。
    注意事项:
    由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。


    PIWIL2 mRNA原位杂交试剂盒哪里卖关键词:百奥莱博,ZN1128,PIWIL2 mRNA原位杂交试剂盒


    ·人HSP90重组蛋白
    编号:ZN1640
    规格:100ng
    来源:大肠杆菌
    特异性:人
    应用:WB 阳性对照
    形态:冻干粉
    纯度:>98%,RP-HPLC&SDS-PAGE
    保存条件:-20℃保存 1 年以上,避免反复冻融。

    ·大鼠CXCL1重组蛋白
    编号:ZN1801
    规格:100ng
    来源:大肠杆菌
    特异性:大鼠
    应用:WB 阳性对照
    形态:冻干粉
    纯度:>98%,RP-HPLC&SDS-PAGE
    保存条件:-20℃保存 1 年以上,避免反复冻融。

    ·AEC显色试剂盒(红色)
    编号:ZN1963
    规格:1盒
    保存:频繁使用时置 4℃,不常使用时置-20℃。
    有效期:一年。
    3 *9乙基卡唑(AEC)是过氧化物酶重要的显色剂之一。显色呈鲜艳的红色,可用于免疫组化及各种斑点检查法。AEC的缺点是溶于有机溶剂,须用水溶性封片剂封片。
    试剂盒中内容:
    显色剂 A:AEC×20倍浓缩液,3ml。
    显色剂 B:×20倍醋酸盐浓缩缓冲液(含 H2O2,PH5.6),3ml。
    使用方法:
    1.在过氧化物酶的检测完成以后,TBS 或 PBS 充分洗涤,一般 5分钟×4次。
    2.按 1ml 蒸馏水加 1 滴显色剂A和1滴显色剂B,混匀,加至标本上。一般避光显色 10-30分钟。若无背景出现则可继续显色。
    3.蒸馏水充分洗涤以终止反应。必要时甲基蓝 3-5分钟或不含酒精的苏木素(Mayer"s)复染。
    4.水溶性封片剂封片,也可简单地用甘油封片,显微镜观察。
    注意事项:不得使用含酒精的苏木素复染。



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