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pAAV-CMV-mCherry-U6-sgRNA病毒表达

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    • 腺病毒 F35 血清型是什么:靶向免疫细胞的嵌合腺病毒怎么用

      型包装"即可。 F35 换了纤突会影响启动子吗?不影响,启动子仍按常规腺病毒选(如 CMV/U6)。 F35 比 Ad5 好在哪儿?它走 CD46 受体,对免疫细胞、造血系细胞感染更友好。 F35 腺病毒表达多久?与普通腺病毒一致,1–2 天起步、7–14 天维持、不整合。 用 F35 需要先做预实验吗?建议先做带荧光对照病毒,确定合适 MOI 再正式实验。 把选择逻辑压缩成一句话 F35的重点不是名字里的“35”,而是受体偏好改变后带来的细胞适用性变化。 主要公开来源 吉凯基因内部公开技术

    • CRISPR KO慢病毒怎么选择

      (如某些原代细胞)。 无标记:适合短期池化实验,但无法富集。 2. 启动子 gRNA 一般用 U6 启动子(Pol III)。要注意 U6 对连续 T 敏感(poly-T 会导致转录提前终止),这也是 gRNA 设计时的禁忌之一。 Cas9 常用 EF1α、CMV、CAG 等。CMV 在某些细胞系(尤其是小鼠细胞和一些原代细胞)中容易沉默,长期实验建议选 EF1α 或 CAG。 3. 滴度:物理滴度 ≠ 功能滴度 这是最重要的一个坑。 物理滴度:p24 ELISA 或 qPCR 测基因组拷贝

    • 慢病毒、腺病毒、AAV 三大病毒载体怎么选:一张表看懂

      / 建稳株 / CAR-T 等 → 慢病毒 │ ├─ 难转染/原代/悬浮细胞、要快速大量蛋白 → 腺病毒 │ └─ 常规传代细胞、长期调控 → 慢病毒 └─ 体内动物实验 ├─ 长期、低免疫、组织靶向(脑/肝/心等)→ AAV ├─ 短期高表达、疫苗、溶瘤 → 腺病毒 └─ 需要整合稳定调控 → 慢病毒(体内并非优先选择) ``` 关键参数对照表 指标 慢病毒 腺病毒 AAV 常用启动子 CMV/CAG、U6(shRNA)、hSyn 等 CMV/CAG、U6 hSyn、CaMKIIα

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