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MiaoLingBio
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淼灵生物
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文献和实验生物发光是一种依赖于酶和底物的相互作用来产生光的化学过程。所需的酶被称为荧光素酶，底物因荧光素酶的类型而不同（如荧光素）。 常用荧光素酶信息表： 其中最有代表性的是来自萤火虫体内（Firefly）和海肾（Renilla）体内的两类萤光素酶，分别命名为萤火虫荧光素酶（FLuc）和海肾荧光素酶（RLuc），同时近年来研究得较多的是来源于高斯氏菌的高斯荧光素酶（GLuc）。 萤火虫荧光素酶（FLuc）作为最通用和最常见的报告基因，该蛋白质不需要翻译后修饰即可获得酶活性，可用于原核和真核细胞。FLuc
多色流式实验中，由于不同荧光素的发射波长的覆盖范围不同，可能产生重叠，对实验结果的数据分析造成一定干扰，我们通常会设置单阳管进行调节补偿。同时，单阳管还可以辅助我们调节通道电压，防止信号超出接收范围。 图示：常见荧光素的发射光谱 A. 如何设置单阳管 单阳管即单染管，是只添加一种荧光抗体的样本管。一般来说，实验 panel 有几种荧光，就需要设置几个单阳管。如：APC、PE、FITC 的三色 panel，需要设置三个单阳管。 B. 制备单阳管的要求 ①单阳管和全染管的样本类型、荧光素要保持
流式配色遵循以下基本规则： 强弱搭配 选择干扰少的荧光组合 使分析的复杂程度降到最低 谨慎使用串联染料 注意环境因素对荧光素的影响 我们要如何理解这段话呢？ 「强弱搭配」，指的是目标 Marker 表达量和荧光素的强度要做到强弱搭配，如果出现强强搭配时，强荧光对弱荧光有干扰的话，那么弱弱组合就像大象身边的狗尾巴草，或者白天的萤火虫，会被完全忽视掉。 不同于 WB、IHC、IF 或者 ELISA 检测等单指标检测方法，流式实验一般是多指标检测，仪器检测荧光素
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