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-20
- 保质期:
3个月
- 英文名:
MiaoLingBio
- 库存:
1000
- 供应商:
淼灵生物
- 规格:
1管
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文献和实验ono1180 求助各位同道: 我想过表达一个基因,想选用一个质粒载体连接此基因再转染入细胞,选用的载体需要有绿色荧光标记,而且能筛选出稳定转染的细胞系,上网查了一下觉得pEGFP系列的好像符合我的要求。 请问这个载体怎么样,大家还有什么载体觉得挺好,请指教,感谢了。 xiaokangkuaile 我用的是pEGFP-C1表达载体,但我的目的基因对GFP表达有影响,转染效果很差
出来,可能两个原因,第一个是抗体不好,第二个可能是质粒没做好,发生移码了,因为你用的是pEGFP-N2载体,gfp是在n端,就算发生了移码一样可以检测到绿色萤光,仔细检查下你做的质粒看看是否正确。 liuruya 谢谢大家的回复 1.WB应该是没有技术问题,用的是GFP或flag的标签抗体,而且设置了之前做过的基因做阳性对照 2.GFP质粒测序过是完整的且没有移码,flag的是自己构建的也反复check过没有问题 觉得很妖怪 问了当时给我质粒
-1,pBADHis, pBADHislacZ,pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C 共表达质粒:pCDFduet-1 以及pCDNA3.1,pEGFP-N2等 大肠杆菌Rosetta(DE3),Rasettagame(DE3),Top10F', BL21(DE3)plySS 等 酵母表达质粒: pPICZαA, pGAPZαA, 酵母细胞 KM71, X33 yingzi
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