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- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
小鼠肾足细胞;Mousepodocyte品牌
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
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- 供应商:
上海抚生
- 库存:
43
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
低温冷藏
- 器官来源:
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- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
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- 英文名:
详见说明书
- 规格:
株
细胞名称 小鼠肾足细胞;Mousepodocyte品牌
形态特性 多边
生长特性 贴壁生长
特征特性 利用稳定敏感的SV40T转染建立的条件性永生化的肾足细胞;33℃/干扰素存在条件下,细胞增殖;37℃培养6天以上,细胞分化;表达WT-1,对缓激肽有反应。
培养条件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;r-IFN(r-干扰素)
传代方法 1:
3传代;2~3天换液1次。
传代情况 P24
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
小鼠肾足细胞;Mousepodocyte品牌细胞总RNA的提取
1)、6孔板细胞(CNE-2)汇合度为90-100%时,取出无菌室,去其上清,用PBS洗两次后,每孔加TRIZOL试剂 1 ml,摇匀,无菌罩内消化3-5分钟(观察:液体变粘稠,细胞脱壁)。
2)、将各孔内消化好的细胞裂解液吸到一DEPC处理过的1.5 ml EP管中,加新开的氯仿0.2 ml,轻摇15秒。
3)、室温静置2-3分钟后,12000 rpm,15 min,4℃,离心。然后取上清无色水相(约0.6 ml)到 EP管(DEPC处理过),加0.5 ml新开的异丙醇,室温下静置10分钟。
4)、12000 rpm,10分钟,4℃,离心。观察总RNA在管底的白色沉淀,弃去上清(小心别丢了沉淀),75%乙醇1.0 ml洗涤(用DEPC水新配制)后,7500 rpm,5 min,4℃离心。
5)、去上清,点离,用小Tip吸干液体。气干沉淀5-10分钟, DEPC处理水20-30 ul加入,中枪打匀,按实验方法流程60℃水浴10分钟溶解总RNA,测OD值。
6)、电泳。
小鼠肾足细胞;Mousepodocyte品牌的操作流程:
1. 细胞收到后建议在培养箱稳定4小时左右再依据细胞密度,换液培养或传代。
2. 如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞及时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶中继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基,培养2-3天。若3天后细胞都没有出现增殖而是继续脱落死亡,请及时联系实验室,技术人员会跟进解决。
3. 贴壁细胞生长缓慢:适当提高血清浓度(最高不超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养。
4. 生长不均:贴壁细胞若出现生长不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重新打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
细胞周期的概念:
细胞周期是可再生细胞从准备时期到分裂为两个细胞的一个循环阶段。
细胞周期分为细胞间期和细胞分裂期,细胞间期较长,而细胞分裂期较短。
FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 马血清),对细胞而言差异极大,请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。
本公司所经营产品均为科研产品,为科研实验使用,小鼠肾足细胞;Mousepodocyte品牌不得用于人体注射,服用等,望注意,谢谢合作!
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