磷酸酶抑制剂混合物(100×) 蛋白质研究

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名称：磷酸酶抑制剂混合物(100×) 蛋白质研究
规格：1ml|5×1ml
产地：国产|进口
英文名：Phosphatase inhibitor cocktail
编号：RFT192
品牌：百奥莱博
本品是一种用于动物细胞或组织、真菌、细菌以及植物等蛋白提取及其它相关用途的磷酸酶抑制剂混合物(Imidazole，Sodium fluoride, Sodium tartrate dihydrate, Sodium molybdate，β-glycerophosphate and Sodium orthovanadate in H2O)，可广泛抑制蛋白提取物中的酸性、碱性、丝*酸/苏*酸和酪*酸磷酸酶。一个包装的本产品通常足够用于100ml的裂解液的配制。

细胞或组织等提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰，从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。本磷酸酶抑制剂混合物可以有效抑制常见磷酸酶对于蛋白的去磷酸化作用，保持蛋白原有的磷酸化状态。*化*是酸性磷酸酶可逆抑制剂；咪唑是碱性磷酸酶抑制剂；β-甘油磷酸是丝*酸/苏*酸磷酸酶可逆抑制剂；正钒酸*是碱性磷酸酶和酪*酸磷酸酶可逆抑制剂；酒石酸*是酸性磷酸酶抑制剂。

本产品为经优化和测试的用于动物细胞或组织、真菌、细菌以及植物蛋白提取的磷酸酶抑制剂混合物，包含了广谱的丝*酸/苏*酸、酪*酸、酸性及碱性磷酸酶抑制剂。

本产品使用便捷，通常以1:100的比例把磷酸酶抑制剂混合物加入裂解液中即可用于样品蛋白的提取，并有效抑制蛋白的去磷酸化。

使用方法：

1、使用前常温溶解磷酸酶抑制剂混合物 (100×)，混匀，按照1:100 比例加入到组织细胞裂解物中，如1 ml裂解物中加入10μl抑制剂混合物。磷酸酶含量特别丰富的组织，可以适当提高加入量，使其终浓度为2～3×。含有磷酸酶抑制剂混合物的裂解液宜现用现配，不宜配制后冻存待后续使用。根据需要，可以同时考虑添加适当的蛋白酶抑制剂混合物。
2、待所需的抑制剂添加完毕并混匀后，就可以开始进行样品的裂解和蛋白提取。

储存条件：-20℃，有效期12个月。

更多有关磷酸酶抑制剂混合物(100×) 蛋白质研究的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
ARB12541 大鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)代做ELISA实验 Rat insulin-like growth factor 2,igf-2 ELISA KIT
ARB12053 大鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10)含量检测 Rat interferon-inducible protein 10,ip-10 ELISA KIT
BTN130629 RecJf核酸外切酶 RecJf Exonulease
Lillie二价铁染色液   2×50ml
HC0154 进口离心管板
BL0900 FITC标记羊抗大鼠IgG抗体
9035-81-8 Trypsin inhibitor 胰蛋白酶抑制剂
DNA Ladder(100bp～1500bp) 
3-*基丁酸 D-Glucosamine HC1 2835-82-7或541-48-0
次碳酸铋 1,2-IND 5892-10-4
ARB11017 人层连蛋白/板层素(LN)酶联免疫定量检测 Human laminin,ln ELISA KIT
5-*尿嘧啶 Gallic acid 51-20-7
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·M-MLV反转录酶(RNase H-)
编号：RFT104
英文名称：Reverse Transcriptase M-MLV(RNase H-)
规格：2000U
M-MLV反转录酶(RNase H-)，是一种经过改造和优化的反转录酶。和普通的M-MLV反转录酶相比，缺失了Ribonuclease H (RNase H)酶活性，不能够选择性剪切RNA和DNA杂合双链中的RNA，可以合成长片段从DNA。本产品中M-MLV反转录酶(RNase H-)的浓度为200U/μl，用于体积为20微升的反转录体系时足够进行10次反转录反应。该反转录酶(RNase H-)由大肠杆菌表达。

M-MLV反转录酶(RNase H-)可以合成长达9-13kb的cDNA。该反转录酶的最适反应温度为42-45℃并且在55℃时仍然有很高活性，可以避免普通的M-MLV反转录酶(RNase H-)在37℃反应时的一些不足。

M-MLV反转录酶(RNase H-)常用于在获得总RNA或mRNA后cDNA第一条链的合成。合成的cDNA第一条链后续可以用于PCR、real-time PCR、cDNA第二条链的合成等。

产品组分：
M-MLV(200U/μl)——————2000U
5×RT buffer———————0.2ml

质量控制：不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶，可以满足常规反转录合成cDNA第一条链等的需要。

贮存液：50 mMTris, pH 8.3,100mMNaCl,1 mMEDTA,5 mMDTT, 0.1% Triton X-100 and 50% glycerol。

5×RT buffer：250 mMTris, pH 8.3 at25℃,250 mMKCl,20 mMMgCl2,50 mMDTT。

失活或抑制：70℃孵育10分钟可以导致M-MLV反转录酶(RNase H-)失活；EDTA、EGTA等螯合剂、无机磷酸盐或焦磷酸盐以及聚*(polyamine)对该反转录酶(RNase H-)有抑制作用。

储存条件：-20℃。


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·10×Tris-Tricine-SDS缓冲液(干粉)
编号：RFT061
英文名称：10×Tris-Tricine-SDS Buffer
规格：500ml
本品开封后将全部干粉溶于500ml蒸馏水中即配成10×TrisTricine-SDS缓冲液，电泳时稀释成1×缓冲液即用液，不要调节pH。用于超低多肽电泳使用。

·100bp DNA ladder(100～1500bp)
编号：RFT001
英文名称：10×Tris-Tricine-SDS Buffer
规格：100T(2×250μl)
本产品是由11条带状双链DNA组成即用型DNA Ladder，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。包含1×loading buffer，可根据实验需要，直接取2-5μl电泳，使用方便，电泳图像清晰。 条带为100，200，300，400，500，600，700，800，900，1000，1500bp，其中500bp条带为100ng/5μl，其余条带浓度为50ng/5μl。



使用方法：
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中(每1mm×1mm加样孔加1μl，如果加样孔宽于5mm，可以适当增加上样量)进行电泳。
2. 建议电泳条件：凝胶浓度为1.0％，凝胶长度8-10cm，电泳电压4-10v/cm，电泳时间30-35分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注：如果使用Goldview等染料就行染色，由于灵敏度比EB低，请酌情增加Marker的上样量。

注意事项：
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响，电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳，以保证Marker良好的分离效果。

储存条件：-20℃，有效期1年。

·BSA溶液(PCR级)
编号：RFT161
英文名称：BSA Solution(PCR Grade)
规格：5×1ml
PCR反应体系中常添加BSA，它能降低模板贴附管壁的数量，使得有更多的模板参与扩增。另外，BSA能降低引物二聚体的形成。在扩增含有黑色素等PCR抑制剂的古DNA或模版时，BSA具有一定的促进作用。PCR反应中BSA终浓度在0.01μg/μl～0.1 μg/μl。

使用方法：
1、-20℃保存的BSA溶液常温融化，混匀。
2、根据根据PCR反应体系，加入适量体积的BSA。

 

	20μl 体系	反应体系终浓度
10×PCR Buffer	2μl	1×
BSA(10mg/ml)*	0.02-0.2μl	0.1-0.01 μg/μl
模板	0.05-0.5μg	as you wish
上游引物 10μM	0.5μl	0.2μM
下游引物 10μM	0.5μl	0.2μM
dNTP10mM	0.5μl	200μM
Taq	0.5-1μl	2.5-5 U
灭菌水	up to 20μl

注：不同模板，不同片段的扩增可能需要不同浓度的BSA，可以适当调节BSA加入体积，找到适合自己反应的BSA浓度。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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