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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
人视网膜母细胞瘤;WERI-Rb-1品牌
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 库存:
33
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
低温冷藏
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
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- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
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- 组织来源:
详见说明书
- 英文名:
详见说明书
- 规格:
株
细胞名称 人视网膜母细胞瘤;WERI-Rb-1品牌
形态特性 圆形细胞聚集成葡萄状
生长特性 贴壁生长
特征特性 WERI-Rb-I细胞株是1974年R.M. McFall 和 T.W. Sery建立的两株人眼癌细胞系中的一株。 细胞能在Difco Bacto-Agar中存活但不形成克隆。 扫描电镜显示在表面囊泡,板状伪足和微绒毛在数量上和频率上的改变。 细胞分化研究,肿瘤治疗的动物模型和生化评价都涉及这株细胞。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 优质胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:
2。3天内可长满。
传代情况
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 B类
人视网膜母细胞瘤;WERI-Rb-1品牌的操作流程:
1. 细胞收到后建议在培养箱稳定4小时左右再依据细胞密度,换液培养或传代。
2. 如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞及时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶中继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基,培养2-3天。若3天后细胞都没有出现增殖而是继续脱落死亡,请及时联系实验室,技术人员会跟进解决。
3. 贴壁细胞生长缓慢:适当提高血清浓度(最高不超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养。
4. 生长不均:贴壁细胞若出现生长不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重新打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
细胞周期的概念:
细胞周期是可再生细胞从准备时期到分裂为两个细胞的一个循环阶段。
细胞周期分为细胞间期和细胞分裂期,细胞间期较长,而细胞分裂期较短。
FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 马血清),对细胞而言差异极大,请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。
规格:96T/48T人抗BP180抗体(BP180-Ab)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-Bullous Pemphigoid 180 antibody,BP180-Ab ELISA Kit特价促销
规格:96T/48T人抗DNA酶B抗体(anti-DNase B)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-deoxyribonuclease B,anti-DNase B ELISA Kit 进口/原装
规格:96T/48T人抗EB病毒抗体(EBV)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-Epstein-Barr virus antibody,EBV ELISA Kit特价供应
规格:96T/48T人抗IgA抗体(anti-IgA-Ab)ELISA试剂盒 英文名称:Human anti-IgA antibody ELISA Kit特价供应
规格:96T/48T人抗IgE受体抗体ELISA试剂盒英文名称:Human anti-IgE receptor antibody ELISA Kit进口/分装
规格:96T/48T人抗IVIgG抗体ELISA试剂盒英文名称:Human anti-IVIgG antibody ELISA Kit进口/原装
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人视网膜母细胞瘤;WERI-Rb-1品牌2-Dec 英文名称: 转录调节因子DEC2抗体 0.1ml
phospho-Ep300 (Ser1834) 英文名称: 磷酸化转录接头蛋白EP300抗体 0.1ml
抗鸟氨酸脱羧酶抗体 anti-ODC 0.1ml
Anti-Smad7/FITC 荧光素标记Smad 7抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-NMDAR2B (Tyr1474) 磷酸化谷氨酸受体2B抗体 规格 0.1ml
Immunoglobuin binding protein-1(CD79A)IGBP-1 免疫球蛋白结合蛋白-1Multi-class antibodies规格: 0.5mg
人视网膜母细胞瘤;WERI-Rb-1品牌细胞总RNA的提取
1)、6孔板细胞(CNE-2)汇合度为90-100%时,取出无菌室,去其上清,用PBS洗两次后,每孔加TRIZOL试剂 1 ml,摇匀,无菌罩内消化3-5分钟(观察:液体变粘稠,细胞脱壁)。
2)、将各孔内消化好的细胞裂解液吸到一DEPC处理过的1.5 ml EP管中,加新开的氯仿0.2 ml,轻摇15秒。
3)、室温静置2-3分钟后,12000 rpm,15 min,4℃,离心。然后取上清无色水相(约0.6 ml)到 EP管(DEPC处理过),加0.5 ml新开的异丙醇,室温下静置10分钟。
4)、12000 rpm,10分钟,4℃,离心。观察总RNA在管底的白色沉淀,弃去上清(小心别丢了沉淀),75%乙醇1.0 ml洗涤(用DEPC水新配制)后,7500 rpm,5 min,4℃离心。
5)、去上清,点离,用小Tip吸干液体。气干沉淀5-10分钟, DEPC处理水20-30 ul加入,中枪打匀,按实验方法流程60℃水浴10分钟溶解总RNA,测OD值。
6)、电泳。
对于人视网膜母细胞瘤;WERI-Rb-1品牌培养,只要我们细心操作,注意细节,并不是大家说的那样困难。对于有经验和有条件的客户,我们提供专人指导。对于无培养经验和条件的客户,建议由公司代为培养细胞及进行后续研究。我司对每一位客户追踪服务,因材施教,对产品不仅售前负责,售后更负责。
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文献和实验与原癌基因编码的蛋白质促进细胞生长相反,在正常情况下存在于细胞内的另一类基因——肿瘤抑制基因的产物能抑制细胞的生长。若其功能丧失则可能促进细胞的肿瘤性转化。由此看来,肿瘤的发生可能是癌基因的激活与肿瘤抑制基因的失活共同作用的结果。目前了解最多的两种肿瘤抑制基因是Rb基因和P53基因。它们的产物都是以转录调节因子的方式控制细胞生长的核蛋白。其它肿瘤抑制基因还有神经纤维瘤病-1基因、结肠腺瘤性息肉基因、结肠癌丢失基因和Wilms瘤-1等。 Rb基因随着对一种少见的儿童肿瘤——视网膜母细胞瘤
RB基因即成视网膜细胞瘤基因,为视网膜母细胞瘤易感基因,是世界上第一个被克隆和完成全序列测定的抑癌基因。RB基因转录产物约4.7kb,表达产物为928个氨基酸组成的蛋白质,分子量约105kDa,称为P105-Rb。Rb蛋白分布于核内,是一类DNA结合蛋白。Rb蛋白的磷酸化/去磷酸化是其调节细胞生长分化的主要形式,在细胞周期的G。、G1期,它表现为去磷酸化,在G。、S、M期则处于磷酸化状态。
抗癌基因 也称为肿瘤抑制物。现在共发现了 10 种抗癌基因,其中研究得较为深入的是人的 Rb(Retinoblastoma 视网膜母细胞瘤 ) 和 p53 蛋白。 Kundson 早在 1971 年根据对遗传性和散发性视网膜母细胞瘤患者的调查研究,提出著名的“二次突变假设( two mutation hypothsis )”。认为视网膜母细胞变成瘤细胞必须要经过二次突变。第一次突变存在或发生于上一代的生殖细胞中,则患儿的体细胞已有了一次遗传下来的突变
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