同源盒蛋白A1抗体WB应用免疫印迹又称蛋白质印迹(western blot),它是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。
Western blot是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。由于免疫印迹(western blot)具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫测定的高特异性和敏感性,现已成为蛋白分析的一种常规技术。
免疫印迹(western blot)常用于鉴定某种蛋白,并能对蛋白进行定性和半定量分析。
Western blot膜的封闭和抗体孵育:PVDF膜在5%脱脂奶粉溶液中室温孵育1小时以封闭膜上的非特异结合,然后将封闭过的膜加入一抗室温孵育1.5小时,抗原抗体结合。再加入HRP标记的二抗以结合一抗,室温孵育膜1小时;
Western blot结果检测:化学发光法检测,膜与化学发光底物孵育,经X胶片曝光显影。图片扫描保存为电脑文件,并用Image J分析软件将图片上每个特异条带灰度值的数字化;