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文献和实验铺上2ml Percoll分层液(Ⅱ)(密=1.069g/ml),后再于第二层液面上轻轻铺上2ml的Percoll分层液(Ⅲ)(密度=1.060g/ml)2. 20℃,在旋转转子中1000×g离心上步所形成的密度梯度90分钟(慢慢增加速度,无制动停转)。(三)单核细胞的分离1. 离心后单核细胞存在于Percoll分层液(Ⅱ)和(Ⅲ)(密度较小的部分)之间的界面中。2. 用毛细吸管仔细收集单核细胞。3. 用含1-5%胎牛血清的PBS 1×液洗涤细胞3次,4℃,400×g离心5分钟,弃
=1.069g/ml),后再于第二层液面上轻轻铺上2ml的Percoll分层液(Ⅲ)(密度=1.060g/ml)2. 20℃,在旋转转子中1000×g离心上步所形成的密度梯度90分钟(慢慢增加速度,无制动停转)。(三)单核细胞的分离1. 离心后单核细胞存在于Percoll分层液(Ⅱ)和(Ⅲ)(密度较小的部分)之间的界面中。2. 用毛细吸管仔细收集单核细胞。3. 用含1-5%胎牛血清的 1×PBS液洗涤细胞3次,4℃,400×g离心5分钟,弃上清液。4. 若需要进一步实验,将细胞重新悬浮于培养基中
SP2/0骨髓瘤细胞染色体数为72,Balb/c鼠脾细胞染色体数为40,杂交瘤细胞系A4为97.80±3.87;A5为 100.93±5.50;C4为98.10±4.47。 3.马传贫杂交瘤细胞分泌抗体的动力学 对A 4、A5 和C4三株杂交瘤细胞1~60代培养上清液进行了ELISA检测,A4、A5两株抗体分泌较为稳定,C4株的抗体分泌有逐渐减少的趋势。 4.马传贫杂交瘤细胞分泌抗体的特异性 以A 4、A5 和C4杂交瘤细胞培养液分别给Balb/c鼠腹腔接种后引起的腹水
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