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- 北纳生物
- NY1701006
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- 2025年12月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
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- 供应商：
北纳生物
- 规格：
1mL
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文献和实验的配体结合而吸附在层析柱上，其他杂蛋白流出，最后将与配体结合的特异蛋白洗脱下来。 蛋白质在组织和细胞中是以复杂的混合形式存在。每种类型的细胞都含有上千种不同的蛋白质，因此蛋白质的分离、提纯和鉴定是生物化学中的重要部分。至今还未有一种单独或一套现成方法可把任何一种蛋白质从复杂的混合蛋白质中提取出来。往往需要几种方法的联合使用。 (三)核酸的提取 核酸都溶于水，不溶于有机溶剂。因此，利用此性质进行提取。在细胞中，DNA以DNP、RNA以RNP形式存在，在不同浓度的盐溶液
)、4-氨基水杨酸钠和萘-1，5二磺酸钠。它们具有溶解病毒、细菌的作用，可使核酸从蛋白质上游离出来。并且还具有抑制核糖核酸酶 的作用。 除去核酸中蛋白质的有效方法是用酚—氯仿混合液，它可使蛋白质变性并对核酸酶有抑制作用，氯仿的比重大可使有机相与水相完全分开减少在水相中的酚。 操作时需要剧烈震荡。 为防止起泡和促使水相与有机相分离，可在酚—氯仿抽提液中加入一定量的异戊醇。 组织细胞破碎后，加入0.5mol•L-1NaCl溶液，离心去上请液→沉淀
步骤如下： a. 在加秋水仙素前48-36小时将杂交瘤细胞传代。 b. 秋水仙素处理：在培养瓶中加入秋水仙素（100ug/ml，除菌，-20℃保存），使最终浓度为0.1-0.4ug/ml（若改用秋水仙胺则最终浓度为0.02-0.05ug/ml）；继续培养4-6小时，然后吹打细胞，移入离心管中，1000r/min 10分钟，弃上清。 c. 加入已预温到37℃的0.075mol/L KCl溶液5ml，将沉淀细胞悬浮并混匀，37℃水浴15-20分钟。 d. 向悬液中加入新配制的固定液（甲醇与冰醋酸3：1混合）1ml
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