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- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
支原体肉汤培养基(不含葡萄糖)
- 保质期:
3年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
常温、避光、防潮保存
- 规格:
250g
| 名称 | 英文名称 | 编号 | 规格 | 价格 |
| 支原体肉汤培养基(不含葡萄糖) | 支原体肉汤培养基(不含葡萄糖) | LM7025-7 | 250g | 300元 |
| 产品说明及用途:.用于支原体培养 | ||||
用途:用于支原体培养
成分:
| 猪胃消化物 | 10.0 |
| 牛肉浸粉 | 5.0 |
| 酵母浸粉 | 5.0 |
| 氯化钠 | 2.5 |
| 酚红 | 0.02 |
| pH值7.6 ± 0.2 | 25℃ |
用法:
称取本品 22.52g,加热溶解于 800ml 蒸馏水中,121℃ 高压灭菌 15 分钟,冷至室 温,无菌操作加入灭活小牛血清或马血清 200ml 和 青霉素 80 万单位,混匀,分装无菌试管,备用。
简述培养基制备的要求使用脱水培养基和其他含有有害物质(胆盐或其它选择剂)的成分时,应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明配制。如质量/体积、pH、制备条件、灭菌条件和操作步骤等,并做好记录。
水
配制培养基使用蒸馏水或相同质量的水,以排除测试条件下抑制或影响微生物生长的物制。如果蒸馏水的用氯消毒的水制备的,在蒸馏前应先对氯进行中和(见GB/T6682)。盛放蒸馏水的容器最好是由中性材料制成的(如中性玻璃、聚乙烯等)。在初次使用前要确认容器中不含任何抑制因子。
支原体肉汤培养基(不含葡萄糖)为保证蒸馏水的质量,电阻率应至少达到300000Ωcm。
警告:采用离子交换器(去离子)生产的去离子水,微生物含量较高,这种水在过滤灭菌后仍可能带有细菌生长的抑制因子。所以配置培养基时最好不要使用这种方法生产的去离子水而应使用蒸馏水。
称量和复水
称量所需的脱水培养基(注意缓慢操作,必要时佩带口罩或在通风柜中操作,以防吸入含有毒物质的培养基粉末),支原体肉汤培养基(不含葡萄糖)先加入少量的水,充分混合(注意避免培养基结块),然后再加入至所需的量。
溶解
脱水培养基加水后适当加热,并不停搅拌使其快速溶解,必要时,重新溶解。含琼脂的培养基在加热前应先浸泡几分钟。用各别成分制备的培养基应将不同成分分别加入适量的水中,并充分溶解,然后再加入到所需的量。
pH值的测定和调整
用pH计测pH,必要时进行调整。在实验室用各别成分制备培养基,除特殊说明外,培养基灭菌后冷却到25℃时,pH的变化不应超过0.2个单位。一般使用浓度约为40g/L(约1mol/L)的氢氧化钠溶液或浓度为36.5g/L(约1mol/L)的盐酸溶液调整培养基的pH。
支原体肉汤培养基(不含葡萄糖)注:商品化的培养基高压灭菌后pH值可能变化很大,但采用优质蒸馏水或去离子水配配制时,灭菌前无需调节pH值。
分装
将制配制好的培养基分装到适当的容器中,根据不同用途,容器的体积可为培养基的1倍、2倍或3倍。
灭菌
培养基和试剂应采用湿热灭菌或过滤灭菌。亮绿培养基等特定的培养基中含有对光和热敏感的物质,只能煮沸灭菌。煮沸后应迅速冷却,避光保存(参见相关标准或供应商使用说明)。
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文献和实验污染了?答:1) 药典 2010 三部做支原体检测需要支原体半流体培养基和支原体肉汤培养基 (或支原体琼脂培养基)。作验证试验时:支原体肉汤培养基是用来培养肺炎支原体,利用葡萄糖变黄,则有肺炎支原体的生长,如果要分离,则接种到支原体琼脂培养基上。精氨酸支原体肉汤培养基是用来培养口腔支原体,利用精氨酸变红,则有口腔支原体的生长,如果要分离,则接种到精氨酸支原体琼脂培养基上。2)支原体肉汤培养基和支原体琼脂培养基不含精氨酸。3)支原体的生长现象是观察液体是否变色,培养后的液体仍是澄清,不是变混浊生长
类物质、部分种类需要精氨酸、O 2或葡萄糖,每一种支原体都有自身持点。多数支原体适合于偏碱条件下生存(PH7.6—8.0),对酸耐受性差。对热比较敏感,对一般抗生素不敏感。 支原体污染细胞后。培养液可不发生混浊。多数情况下细胞病理变化轻微或不显著,细微变化也可由于传代、换液而缓解。因此易被忽视。但个别严重者,可致细胞增殖缓慢。甚至从培养器皿脱落。 为确定有无支原体污染可做如下检酗: ①相差显微境检测:将细胞按种于事先放置于培养瓶内的盖玻片上,24h后取出,用相差油镜观察。支原体呈暗色微小
为阴性的细胞) 使用该试剂盒还有一些 ↓ 注意事项 1 使用试剂盒前请仔细阅读说明书全文。 2 为保证结果可靠性,建议每次实验都有阳性和阴性对照,每个反应各加4μl,阳性对照随试剂盒提供,阴性对照为灭菌ddH2O,需客户自己准备。 3 操作时应尽量少说话,或带口罩,因口腔中也含有支原体,可能引起样品污染,而造成假阳性。 4 细胞培养物中含有青霉素和链霉素等抗生物素不会影响检测结果,如果用户需要进一步提高检测灵敏度,建议用不含双抗的培养基
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