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- RFT103-GCV
- 北京
- 2025年07月07日
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- 详细信息
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- 技术资料
- 库存：
631
- 英文名：
Taq plus DNA Polymerase
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
冷藏
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")RFT103型高效高保真DNA聚合酶品牌，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。
名称：RFT103型高效高保真DNA聚合酶品牌
编号：RFT103
产地：国产|进口
英文名：Taq plus DNA Polymerase
规格：500U(100μl)|5×500U(5×100μl)
Taq plus DNA Polymerase是由pfu DNA Polymerase和Taq DNA聚合酶按照一定的比例混合而成，具有扩增效率高，错配率低的特点。与Taq DNA聚合酶相比，Taq plus DNA聚合酶具有扩增长度长，保真性好的优点；与pfu DNA聚合酶相比，具有扩增速度快，反应效率高的优点。此酶具有比Taq DNA聚合酶约3倍的PCR可信度。该酶的大多数PCR产物3’端带碱基A，可以通过TA克隆法进行克隆。适用于要求保真性和高效率的PCR反应，大多数情况下可以替代Taq DNA 聚合酶。
产品组成：
Taq plus DNA Polymerase(5U/μl)——————————100μl
10×Taq plus PCR buffer(含Mg2＋)——————————1ml
活性定义：1单位(U) Taq plus DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内，以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
贮存液：50 mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50 mM KCl ; Stabilizers; 50% glycerol
使用方法：
1、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系：
| 成分 | 体积 | 终浓度 |
| Template | 0.1-1μg | as you wish |
| Primer 1(10μM) | 1μl | 200nM |
| Primer 2(10μM) | 1μl | 200nM |
| 10×Taq plus PCR buffer | 5μl | 1× |
| dNTP Mixture(10 mM) | 1μl | 200μM each |
| Taq plus(5 U/μl) | 0.5-1μl | 2.5-5U |
| ddH2O | up to 50μl | - |
2、混匀后，离心快甩将反应液收集到管底。
3、PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。
4、PCR仪上执行以下程序：
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 初始变性 | 94℃ | 1-5 min | 1 |
| 变性 | 94℃ | 30 sec | 25-40* |
| 退火 | Tm-5℃* | 30 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 1 min/kb | |
| 最后延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
*注： PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
常见问题分析：
1、Taq plus DNA polymerase能扩增多长片段？
对简单模板(如λ噬菌体做模板)，可以扩增 kb片段；对复杂模板(如基因组DNA)，可以扩增 kb片段。
2、Taq plus DNA polymerase保真性怎样？
Taq plus含有3’-5’校对活性的聚合酶，有校对功能。保真性为普通Taq酶的3倍。
3、使用Taq plus DNA polymerase的扩增产物是否可以进行TA克隆？
由于使用Taq plus得到的PCR产物大多数带有A，可以进行TA克隆。
4、Taq plus DNA polymerase可以扩增高GC含量片段吗？
Taq plus可以扩增高GC含量片段，建议使用Taq plus配合2×GC buffer使用，而不建议使用10×Taq plus PCR buffer。
储存条件：-20℃，有效期一年。
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RFT103型高效高保真DNA聚合酶品牌关键词：Taq plus DNA Polymerase,RFT103,高效高保真DNA聚合酶
·1M Tris(pH6.8)
编号：RFT062
规格：100ml|500ml
本品用于SDS-PAGE浓缩胶制备。
·蛋白酶抑制剂混合物(真菌或酵母蛋白提取用)
编号：RFT197
英文名称：Protease inhibitor cocktail for fungal and yeast extracts
规格：1ml|5×1ml
本品是一种用于真菌或酵母蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物(100mM AEBSF，1.5mM E64，2mM Pepstatin A，500mM Phenanthroline in DMSO)。一个包装的本产品通常足够用于100ml裂解液的配制。
真菌或酵母提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰，从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。
本产品为经优化和测试的用于真菌或酵母蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物，包含了广谱的丝*酸、半胱*酸和酸性蛋白酶抑制剂、以及金属蛋白酶抑制剂。
本产品使用便捷，通常以1:100的比例把蛋白酶抑制剂混合物加入裂解液中，即可用于真菌或酵母蛋白的提取，并有效抑制蛋白降解。
本产品可以有效抑制真菌或酵母提取物中的各种蛋白酶活性，如丝*酸蛋白酶、半胱*酸蛋白酶、苏*酸和天冬*酸蛋白酶、金属蛋白酶等。其中AEBSF是一种水溶性的丝*酸蛋白酶不可逆抑制剂，其抑制常数与PMSF和DFP的抑制常数相似，可以有效抑制胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、纤溶酶(plasmin)、激肽释放酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白酶，作为PMSF和DFP的替代物，AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液稳定性更好。E64是半胱*酸蛋白酶不可逆抑制剂；Pepstatin A是天冬*酸蛋白酶可逆抑制剂；Phenanthroline是金属蛋白酶的可逆抑制剂。
使用方法：
1、本蛋白酶抑制剂混合物为100×的储存液，使用时按照1:100的比例加入到裂解液中(例如，1ml裂解液中加入10μl蛋白酶抑制剂混合物)，混匀后即可使用。含有蛋白酶抑制剂混合物的裂解液宜现用现配，不宜配制后冻存待后续使用。
2、待所需的抑制剂添加完毕混匀后，就可以开始进行常规细胞或组织的裂解和蛋白提取。
储存条件：-20℃，有效期12个月。
RFT103型高效高保真DNA聚合酶品牌关键词：Taq plus DNA Polymerase,RFT103,高效高保真DNA聚合酶
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文献和实验？ A）连接用室温保温1小时，能满足大多数克隆，为提高效率，需4oC过夜。 B）插入片段带有污染，使3`-T缺失，或抑制连接，抑制转化。为此，将插入片段和pGEM-T正对照混合，再连接。如降低了对照的菌落数，插入片段需纯化，或重新制备。如产生大量的蓝斑，插入片段污染有核酸酶，使pGEM-T或pGEM-T Easy载体3`-T缺失。 C）插入片段不适于连接。用凝胶纯化的插入片段，因受UV过度照射，时有发生。UV过度照射会产生嘧啶二聚体，不利于连接，DNA必需重新纯化。 D）带有修复功能的耐热DNA聚合酶
1、PCR括增的基本原理PCR (Polymerase Chain Reaction) 是体外高效复制DNA的技术，该技术几乎贯穿于现在分子生物学的各个领域。PCR体系由模板，特异性引物，高温聚合酶，脱氧核糖核酸几部分组成。反应过程分模板高温变性（Denaturation），引物与模板低温退火（Annealing）,引物在高温聚合酶的作用下延伸（Extention），在一定的条件下，退火和延伸可以合二为一。2、高温聚合酶分类高温DNA聚合酶主要用于DNA片段的高温快速扩增（合成），它以单链
对于多种聚合酶混合酶扩增如Invitrogen、Clontech、Promega的多数高保真Taq酶来说这个非常重要，因为Taq和校正酶的最佳反应温度可能有显著差异，优化延伸温度就显得很重要。多次实验可在一台仪器上完成，既节省实验时间提高效率，又节省实验成本。 对于带梯度功能的PCR仪，需要考虑梯度模式下不同梯度管排间的温度均匀性和准确性，还必须考虑仪器在梯度模式和标准模式下是否具有同样的温度特性。这种差异可能导致在梯度模式下得出的最佳条件与标准模式下单独做的结果出现差异
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