北京现货快速银染试剂盒哪里卖

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名称：北京现货快速银染试剂盒哪里卖
品牌：百奥莱博
英文名：Fast Silver Stain Kit
产地：国产|进口
编号：RFT055
规格：25次
本快速银染试剂盒是一种快速简单、可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白银染的试剂盒。本试剂盒也可以用于2D凝胶的银染，并且染色后兼容后续的质谱检测。本试剂盒只需约90分钟内可以完成凝胶的银染。对于BSA蛋白，检测灵敏度可以达到0.3ng蛋白。本试剂盒可足够用于25块常规的8×10cm凝胶的银染。

试剂盒组成：

 

组份	规格	贮存
银染增敏液(100×)	26 ml	常温
银溶液(100×)	26 ml	常温，避光
银染基本显色液(10×)	250 ml	常温
银染显色加速液(2000×)	1.5 ml	常温，避光
银染终止液(20×)	125 ml	常温

注意事项：
1、由于银染非常灵敏，操作时请注意尽量使用高纯度的水，并确保所使用的器皿非常清洁，最好使用洁净的玻璃器皿。操作时必须戴手套，避免皮肤和凝胶直接接触。
2、需自备乙醇、冰醋酸及MilliQ级纯水或双蒸水。
3、下述使用说明中各种溶液的使用量适用于大小为8×10cm厚度为0.75-1mm的凝胶。对于更大的凝胶，各种溶液的使用量需按凝胶面积的比例放大，对于更厚的凝胶，作用时间需按照厚度的比例适当延长。
4、本说明书所指的常温温为20-25℃，操作温度较低时由于溶液的扩散能力下降，各步骤需适当延长时间。
5、银染基本显色液(10×)在低温环境下可能会出现沉淀，可在30-37℃水浴中溶解，并充分混匀后使用。

储存条件：室温，有效期12个月。

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·BSA溶液(PCR级)
编号：RFT161
英文名称：BSA Solution(PCR Grade)
规格：5×1ml
PCR反应体系中常添加BSA，它能降低模板贴附管壁的数量，使得有更多的模板参与扩增。另外，BSA能降低引物二聚体的形成。在扩增含有黑色素等PCR抑制剂的古DNA或模版时，BSA具有一定的促进作用。PCR反应中BSA终浓度在0.01μg/μl～0.1 μg/μl。

使用方法：
1、-20℃保存的BSA溶液常温融化，混匀。
2、根据根据PCR反应体系，加入适量体积的BSA。

	20μl 体系	反应体系终浓度
10×PCR Buffer	2μl	1×
BSA(10mg/ml)*	0.02-0.2μl	0.1-0.01 μg/μl
模板	0.05-0.5μg	as you wish
上游引物 10μM	0.5μl	0.2μM
下游引物 10μM	0.5μl	0.2μM
dNTP10mM	0.5μl	200μM
Taq	0.5-1μl	2.5-5 U
灭菌水	up to 20μl

注：不同模板，不同片段的扩增可能需要不同浓度的BSA，可以适当调节BSA加入体积，找到适合自己反应的BSA浓度。

储存条件：-20℃，有效期一年。

·DH5α化学感受态细胞
编号：RFT166
英文名称：DH5α Competent cell
规格：20×100μl
本公司生产的DH5α感受态细胞采用经特殊工艺处理得到，可用于DNA的化学转化。使用pUC18质粒检测，转化效率可达10^8cfu/μg。
基因型：supE44△lacU169(j80 lacZ△M15)hsdR17 recA1 end A1 gyrA96 thi-1 relA1

特点：一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重组缺陷的抑制型菌株。其j80 lacZ△M15基因的产物可与pUC载体编码的 b-半乳糖苷酶*基端实现a互补，可用于蓝白斑筛选。

操作方法：(以下操作均按无菌条件的标准进行)
1、取感受态细胞置于冰浴中，如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中，置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。应注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。以下实验以100μl感受态细胞为例。
2、向感受态细胞悬液中加入目的DNA(100μl的感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和)，轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置30分钟。
3、将离心管置于42℃水浴中放置45-90秒，然后快速将管转移到冰浴中，使细胞冷却2-3分钟，该过程不要摇动离心管。
4、向每个离心管中加入500μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)， 混匀后置于37℃摇床振荡培养45分钟(150转/分钟)，目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
5、将离心管内容物混匀，吸取100μl已转化的感受态细胞加到含相应抗生素的SOB或LB固体琼脂培养基上，用无菌的弯头玻棒轻轻的将细胞均匀涂开。将平板置于室温直至液体被吸收，倒置平板，37℃培养12-16小时。
注意：涂布用量可根据具体实验来调整。如转化的DNA总量较多，可取更少量转化产物涂布平板；反之，如转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。如果预计的克隆较少，可通过离心(4000 rpm, 2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。(涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少可以将剩下的菌液再涂布新的培养板)

注意事项：
1、感受态细胞应保存在-70℃，不可多次冻融和放置时间过长，以避免感受态细胞的转化效率。
2、进行转化操作时，应根据相应温度及无菌条件的要求进行。
3、为防止转化实验不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，将损失降到最低。

储存条件：-70℃，有效期6个月。


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