AMPPD 蛋白质研究

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应AMPPD 蛋白质研究，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：AMPPD 蛋白质研究
编号：BTN131143
产地：国产|进口
规格：100mg
AMPPD的CAS号是122341-56-4。常用做碱性磷酸酶的化学发光底物，其发光的速度取决于碱磷酶的浓度。当碱磷酶偶合到杂交的探针时，便可以通过此系统检测到杂交分子的存在量。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。避免长时间暴露于光线下，请勿冷冻。

关于AMPPD 蛋白质研究的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
PY02-097  沙氏琼脂培养基  250克  
288-32-4 Imidazoie 咪唑
1,8-二氮杂-9-芴酮 Heparin lithiu*(代"m") 54078-29-4
PY02-121  锰盐营养琼脂  250克  
低聚半乳糖 VB12
BL1249 MarkerIDNA Ladder
磷酸**铵 PK 7783-13-3
碘硝基*化四氮唑蓝 Benzoin 146-68-9
DL-α-硫辛酸 3-Methylindole 1077-28-7
磺胺对甲氧嘧啶 MTT 651-06-9
D0102 脱纤维新生牛血(无菌 袋装)
甘*酸叔丁酯盐*(代"酸")盐 DEPBT 27532-96-3
ARB12739 小鼠I型胶原N末端肽(NTX)elisa检测说明书 Mouse cross linked n-teloPeptide of type i collagen,ntx ELISA KIT
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·Oligo dT12-18引物(0.5μg/μL)
编号：BTN100814
英文名称：Oligo dT12-18 Primer
规格：5μg
Oligo(dT)12-18为长度在12到18之间的Oligo(dT)混合物，可以用于以带polyA尾巴的RNA为模板的第一链cDNA合成。建议每20μL反应体系使用0.5μg oligo(dT)。

储存条件：低温运输和-20℃保存，有效期一年。

·大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS感受态细胞
编号：BTN130558
英文名称：E.coli Rosetta(DE3)plysS Rosetta Competent Cell
规格：0.1mL*10
 Rosetta(DE3)pLysS是Rosetta(DE3)的衍生菌株，为高度严紧表达宿主菌，一般用于毒性含真核蛋白靶蛋白表达，lac透性酶突变，可以控制表达水平，提供稀有密码子tRNAs。抗性为*霉素(34μg/ml)。

基因型：F-ompT hsdSB(rB- mB-)gal dcm lacY1(DE3)plysS pRARE(CmR)。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

·植物RNA提取专用高盐溶液
编号：BTN140402
英文名称：High-Salt Solution for Precipitation (Plant RNA extraction)
规格：250mL
植物RNA溶液中常富含多糖、多酚，会阻碍和影响后续实验。本产品主要用于去除植物RNA溶液中的多糖、多酚。向已经提取的植物RNA溶液中或在使用植物RNA提取试剂盒(产品编号:BTN3080)提取植物RNA过程中加入本产品，再经过异丙醇沉淀，可以达到去除多糖、多酚的目的，得到高纯度的RNA。本产品具有下列特点：
1. 本产品不含DNase和RNase。
2. 经本产品处理后的RNA纯度高，可以直接用于Northern杂交、斑点杂交、体外翻译、RNA分解酶的保护分析、RT-PCR、构建cDNA文库等各种分子生物学实验。
3. 本产品不能用于小分子量RNA中多糖、多酚的去除，会严重影响小分子量RNA的回收率。
4.在处理微量RNA样品时，在去除多糖、多酚的同时，RNA损耗也较大，此时可以添加百奥莱博产品微量核酸沉淀剂(BTN50903)以提高回收率。

使用及效果：
取RNA样品0.5倍体积的本产品与RNA样品溶液混匀，加入等体积异丙醇，室温放置10 min，12000rpm，4℃离心10 min，弃上清。加入1mL经RNase-free水配制的预冷的75％乙醇，12000rpm，4 ℃离心5 min。弃上清，室温干燥沉淀片刻。加入适量RNase-free水或TE Buffer溶解沉淀。



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·水蛭素溶液(2万ATU/mL)
编号：BTN130542
英文名称：Hirudin Solution
规格：0.1mL
本产品为水蛭素水溶液，浓度为20000ATU/mL，工作浓度为150-200ATU/mL。水蛭素是从水蛭及其唾液腺中提取的含65个*基酸残基的小分子蛋白，水蛭素对凝血酶有极强的抑制作用，是迄今为止所发现最强的凝血酶天然特异抑制剂。基因重组水蛭素是一种单链环肽化合物，相对分子量约为7000 道尔顿，是目前发现的最强的凝血酶特效抑制剂，其作用不依赖于抗凝血酶Ⅲ。

产品特点：
1.其优点是抗原性弱，少有过敏反应。
2. 不与血小板结合，极少导致血小板减少。
3. 稳定性好，毒性低。

储存条件：低温运输，-20℃保存。

活力单位定义：一个抑制单位ATU(anti-thrombin unit)指，37℃下，灭活一个NIH 单位凝血酶的量

使用方法：根据具体实验要求不同，加入所需要量的本产品。一般建议工作浓度为150-200ATU/mL。用户可以按照要求稀释本产品。后续按照常规操作即可。

·印迹膜抗体稀释液
编号：BTN81208
英文名称：Antibody Dilution Buffer
规格：250mL
本产品用于稀释Western Blot抗体，即开即用，方便快捷。

产品组成：

 

成分	规格
抗体稀释液成分一	100ml
抗体稀释液成分二	0.5g
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、转膜(湿法电转移，本产品不含相关试剂)
1．制备湿法电转液：将湿法电转液干粉全部溶解在1L去离子水中得20×湿法电转液，用时用去离子水稀释20倍预冷待用。
2．根据PAGE胶的大小剪切同样大小的滤纸和各边都大1mm的硝酸纤维素膜(以下简称膜)。避免手直接接触膜。
3．将切好的膜浸泡在新鲜稀释的1×湿法电转液(下简称转移液)中15-20分钟。
 注意：最好用镊子夹住膜的一边轻轻置于转移液上，只让膜下层不转移液接触，通过毛细管作用使整个膜浸湿。避免让膜沉入转移液中，否则膜不转移液之间形成的气泡会阻止膜的湿润。
4．在容器中将两块海绵垫、六层滤纸用转移液浸湿。
5．在转移夹上依次放上一张浸湿的海绵垫、三层浸湿的滤纸、一块PAGE胶(只要分离胶部分)、一张浸湿的膜、三层浸湿的滤纸、一张浸湿的海绵垫。
 注意：每叠加层一定要用玻棒来回擀几遍以擀走里面的气泡。膜两边的滤纸绝对不能相互接触，否则电转移时会发生短路，烧坏装置。
6．合起转移夹幵放入转移槽中(一定要注意方向，转印带负电荷的蛋白质时电极方向是膜正胶负；转印带正电荷的蛋白质时，电极方向是膜负胶正)，然后用预冷的转移液灌满转移槽。
7．插上电极，一般在冷却条件下用100V恒压转移30-60分钟或冷室中14V转移过夜。
 注意：一定要检查电流的大小，电流一般在0.1-0.4A。应根据蛋白分子量的大小确定转膜时间，对于小分子量的蛋白，转膜时最好垫2张或更多张膜(最多可10 张)，即使白质已经转过了第一张膜，还会在其它膜上检测到；对于大分子量的蛋白，转膜时电压要高一点，时间也要延长一点，开始最好也用两块或多张膜。转移时间长的时候特别要注意加强降温措施。如果目的蛋白转移效率低，可以在转移液中加终浓度为20%的甲醇或0.1%的SDS。
8．终止转移后，取出膜，幵在膜上剪去一个小角以标记方向。如有必要可用自备的各种染液对胶或膜进行染色以确定蛋白质转移效率。

二、封膜(本产品不含相关试剂)
1．将膜转移至杂交袋中，加5-10mL Western封膜液后热密封杂交袋开口。
2．室温下用脱色摇床摇动杂交袋30-60分钟。

三、与一抗二抗结合
1．用5mL Western抗体稀释液(配制方法：将抗体稀释液成分二干粉到入成分一溶液中，溶解后即可。未用完的抗体稀释液需-20℃保存)将自备的一抗稀释至适当的倍数(一般需要稀释10-100000倍使用，最佳稀释倍数跟一抗效价相关，需摸索)。
2．剪开杂交袋的一角，倒去封膜液，加入5mL新鲜稀释的一抗溶液，加热密封杂交袋开口。
3．室温下在脱色摇床上摇动杂交袋30-60分钟。
4．用抗体稀释液将自备的HRP或AP标记的二抗稀释至适当浓度(一般需要稀释500-4000倍。最佳稀释倍数跟二抗效价相关，需摸索)。
5．剪开杂交袋的一角，倒去一抗溶液(可留存)，加入5mL新鲜稀释的二抗溶液，加热密封杂交袋开口。
6．室温下在脱色摇床上摇动杂交袋30-60分钟，也可过夜孵育。
7．剪开杂交袋的一角，倒去二抗溶液(可留存)。
8．剪开杂交袋，用镊子取出膜，用Western洗膜液在器皿中洗3次，每次10分钟。
9．根据二抗的标记酶选择下面两种显色方法之一。

四、HRP显色检测(对HRP标记的二抗，本产品A型，本产品不含相关试剂)
1．将膜平放，在吸附了抗原抗体的一面加入100-500μL TMB溶液A和100-500μL TMB溶液B，铺满整个膜表面(具体用量可按膜的大小增减)。
2．置于平式摇荡仪上，在室温下孵育2至5分钟，直至深蓝色条带出现。
3．用镊子夹起膜，放入去离子水中洗膜3次终止反应，每次30分钟。
4．空气中晾干后照相保存。
 注意：膜显色后的颜色在数小时后将会褪色，不能永久存在，故需要及时照相。

五、AP显色检测(对AP标记的二抗，本产品B型，本产品不含相关试剂)
1．用新鲜配制的1×AP缓冲液洗涤硝酸纤维素膜5分钟。
2．将膜转移到新配制的BCIP-NBT法AP显色液中，每cm2膜需要0.1mL显色液。新鲜配制BCIP-NBT法AP显色液(以10mL为例)的方法：将9mL去离子水、1mL 10×AP缓冲液、50μl BCIP溶液和50μl NBT溶液混匀。此溶液必须在1小时内使用。
3．室温摇晃5-30分钟显色(37℃可加速反应)。
4．显色到合适程度后用自备去离子水洗膜3次终止反应，每次30分钟。
5．用吸水纸吸干膜上的水分，避光干燥保存或在一周内照相。

六、Western抗体清除剂(说明：此处理可能会使蛋白质失去某些表位，本产品不含相关试剂)
1．将膜浸泡在Western抗体清除剂中，70℃摇晃孵育30分钟，去除一抗和二抗。用Western洗膜液洗膜两次，每次10分钟。
2．膜即可用于下一次Western检测的膜封堵步骤。

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