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- 2025年12月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
长期
- 英文名：
Hi T7 RNA聚合酶
- 库存：
9999
- 供应商：
上海圻明生物
- 规格：
科研试剂
Hi T7高产RNA合成试剂盒是基于Hi T7 RNA聚合酶而组建的试剂盒，20 μl反应即可获得150-200 μg的总产量（产量超过 MegaScript T7 Transcription kit）。利用该高产RNA试剂盒可在体外高效合成多种类型的 RNA，如mRNA、lncRNA、shRNA等。Hi T7 RNA聚合酶识别T7 promoter（TAATACGACTCA CTATA G G）以倒数第二个G碱基为起点开始转录，转录长度可达5000nt以上。利用该试剂盒得到的RNA适用于多种下游应用，如RNA结构和功能研究、核酸酶生物化学研究、RNase保护分析探针、印迹杂交、反义 RNA 及 RNAi 实验、微阵列分析、显微注射、体外翻译和 RNA 疫苗等。
应用
制备放射标记的 RNA 探针
合成用于体外翻译的 RNA
合成用于结构、加工和催化性能研究的 RNA
合成 RNA 反义链，调控基因表达
1X T7 Transcription Buffer
40 mM Tris (pH 7.8), 10 mM NaCl, 6mM MgCl2,2 mM Spermidine HCl, 10 mM DTT 。
酶储存液
10 mM Tris-HCl, 0.1 M NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 50% Glycerol, 0.01% (w/v) Triton X-100 , pH 7.5。
储存
-20°C可保存2年，避免反复冻融。
热失活
75°C，10min。
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文献和实验一般是指 DNA依存性 RNA聚合酶。是催化以 DNA为模板（ template）、三磷酸核糖核苷为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成 RNA的酶。因为在细胞内与基因 DNA的遗传信息转录为 RNA有关，所以也称转录酶。反应以下式示： n1 -n4 表示各个模板的 DNA链的胸腺嘧啶、胞嘧啶、鸟嘧啶、腺嘌呤的碱基数。通过特异的碱基配对的形成，合成具有与模板 DNA链完全互补的碱基排列的 RNA。反应是由（ 1） DNA与酶的结合
，则可计算其直径约为100A，即约为双链DNA的30bp节段的长度。然而全酶可结合约60个核苷酸 ，提示其形状应为椭圆球形。 结构 为什么细菌 的RNA聚合酶需要这么大和复杂的分子结构呢?而某些噬菌体特有的RNA聚合酶则要小得多，仅由一条多肽链组成。这证明RNA合成所需的机构可以远比宿主的酶小。这种情况说明，噬菌体内的转录仅需一条"最小"的机构。然而这种酶只能识别噬菌体本身所有的少数几个启动子;它们不能识别其他启动子。例如噬菌体T3和T7的RNA聚合酶分子很相似
mRNA Amplification with T7 RNA Polymerase
on a 42ºC oven and set PCR machine to hold at 70ºC. In an Eppendorf tube add: 1 µg Total RNA 1 µL T7 oligo(dT) primer q.s. to 12 µL with Nuclease-free H2 O Incubate 10 min. at 70ºC. Spin briefly to pull
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