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上海古朵生物科技有限公司
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9014-24-8
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500u
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文献和实验。） 使用不同的聚合酶 通常用于体外转录的三种 RNA 聚合酶可以相互不同地转录给定的模板。当转录不能完成时，可以充分利用这种转录给定模板序列的不同能力。改变转录模板前面的聚合酶启动子序列是一种劳动密集型修复，因为它可能需要设计 PCR 引物或亚克隆。Ambion 具有可简化过程的载体和引物。pTRIPLEscript 系列载体具有串联排列的 SP6、T7 和 T3 启动子，这些载体特别适用于亚克隆转录模板。或者，Ambion 的无克隆启动子添加试剂盒 Lig'nScribe 可用于改变可 PCR 扩增
RNA（用 T7RNA 聚合酶体外合成）经一系列稀释，实验结果表明通过 PCR 的方法可 检测出 10 个分子或低于 10 个分子，这是反映其灵敏度的一个实例。用此技术现已从不到 1 个 philadelphia 染色体阳性细胞株 K562 中检测到了白血病特异的 MRNA 的转录子。 因此没必要分离 polyA+RNA，RNA/PCR 法有足够的灵敏度来满足绝大多数实验条件的需要。 将 PCR 缓冲液同时用于反转录酶反应和 PCR 反应，可简化实验步骤。我们发现整个 反应过程皆用 PCR 缓冲
本月旧帖整理活动专题: T-A克隆技术 大家可以在以下基础上进行整理或对具体问题进行讨论 (1)如何筛选合适的宿主菌株 ◇ 所选的宿主菌株应对所用质粒的抗生素抗性基因敏感。 ◇ 如进行蓝/白斑筛选，宿主菌β-半乳糖苷酶的α-肽编码区应在染色体或附加体上缺失掉（lacZΔΜ15）。TOP10和DH5α都能用于蓝/白斑筛选。 ◇ 要表达重组蛋白，可使用带有可诱导的T7 RNA聚合酶基因的菌株，如BL21（DE3）。 ◇ 使用pGEM载体克隆大片段时（>7-8 kb），经转化
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