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- 上海雅吉生物科技有限公司
- 中国
- YC-12628RJ
- 2025年07月16日
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有效期一年
- 英文名：
Biological reagent
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150
- 供应商：
上海雅吉
- 规格：
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产品及特点
核糖核酸酶 HII（RNase HII）为核糖核酸内切酶，适用于在双链 DNA
内部切刻核糖核酸的 5’磷酸和 3’羟基末端。核糖核酸酶 HII 还可以在冈崎
片段的 RNA 部分进行多处切割。其反应示意图如下：
本产品具体有下列特点：
1. 属于重组酶。
2. 切刻聚合酶产物，掺入核糖核苷酸。
3. 除去杂交到 poly(dT)上的 mRNA poly(A)。
4. 在 cDNA 第二链合成时除去 mRNA。
5. 无核酸内切酶、核酸外切酶和 RNase 污染。
6. 与 T7 核酸内切酶 I 联合使用时，在掺入有核糖核苷酸区域位点处产生一
个双链的缺口。
7. 降解冈崎片段或其它 RNA-DNA 杂交链中的 RNA 部分。
反应条件
1×核糖核酸酶 HII 反应液：10 mM KCl，20 mM Tris-HCl，10 mM
(NH4
)2SO4，2 mM MgSO4，0.1% Triton X-100（pH 8.8，25℃），37℃
温育。
规格及成分 成份 编号 250U 塑料袋包装
核糖核酸酶 HII（5 U/μL） 130675A 50 μL
10×核糖核酸酶 HII 反应液 130675B 1 mL
使用手册 1 份
运输及保存 低温运输，-20℃保存，有效期一年。
自备试剂 模板 DNA、超纯水
使用方法 下例是本产品一个典型的应用：用于切刻双链 DNA 模板的单个核糖核苷
酸所在的位点，或者切刻冈崎片段 5’末端的 RNA 区与 3’端的 DNA 区域的
交界核糖核苷酸的 5’侧。
以 20 μL 反应体系为例：
1. 在离心管中加入 2 μL 10×核糖核酸酶 HII 反应液中。
2. 加入 100 pmol 的双链 DNA 模板。
3. 补超纯水使反应体积到 20 μL。
4. 加入 1 μL 核糖核酸酶 HII 到反应体系中并混合均匀。
5. 在 37℃下反应 15 分钟。
相关资料 本产品来源
重组 E. coli 菌株，携带来自 E. coli 的核糖核酸酶 HII 基因（rnhB）和
编码麦芽糖结合蛋白基因（MBP）的融合基因。亲和层析后，用 Xa 因子将核
糖核酸酶 HII 从融合蛋白中切割分离，然后再进行纯化去除 MBP 和 Xa 因子。
从MBP 中切割下来的核糖核酸酶HII在其N端多出四个氨基酸（Ile-Ser-GluPhe）。
酶活性定义
1 个活性单位指 1×核糖核酸酶 HII 反应体系中，37℃条件下，30 分钟
产生与切割 100 pmol 人工合成双链 RNA 底物相同的荧光信号所需的酶量。
该合成双链底物在荧光探针/淬火对的淬火域附近含有单个核糖核苷。
贮存液成分
20 mM Tris-HCl，100 mM NaCl，1 mM DTT，1 mM EDTA，50%
Glycerol。
灭活
与 0.1%SDS 一起温育足以灭活核糖核酸酶 HII。
参考文献 1. Rydberg, B. and Game, J. (2002). Proc. Natl. Acad. Sci.. 99.
2. Itaya, M. (1990). Proc. Natl. Acad. Sci.. 87.
3. Nichols, N.M. Unpublished Observation.
关联产品 核糖核酸酶 RNase If（CAT#:130672）、超纯水（CAT#:100935）
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文献和实验作用于 RNA切断核苷酸间的磷酸酯键，使分子解聚的核酸酶（一种磷酸二酯酶），缩写为 RNA酶（ RNase）。作为分解产物生成单核苷酸和寡核苷酸，但不产生游离的磷酸。广泛存在于动植物和微生物中。不同酶特异性也不一样。
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