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- 文献和实验
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99
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北京诺博莱德科技有限公司
产品简介:
MTT比色法是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。MTT检测原理在于活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色Formazan并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。在特定溶剂 (如DMSO)存在的情况下,可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快,则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。
产品组成:
| 编号 名称 |
C4825 | Storage |
| MTT solution(5mg/ml) | 10ml | -20℃ 避光 |
| 使用说明书 | 1份 | |
自备材料:
1.细胞培养液
2.胰蛋白酶消化液
3.低速离心机
4.96孔培养板
5.细胞计数板或计数器
6.DMSO或Formazan solvent
7.摇床
8.显微镜
9.酶联免疫检测仪
MTT 溶液(5mg/ml)
注意事项:
1.MTT solution(5mg/ml)尽量减少反复冻融的次数,以免失效,当颜色变为灰绿色时,请勿使用。
2.由于使用96孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,应注意蒸发问题。
3.MTT solution在低温情况下会凝固,使用前请置于室温或20~25℃水浴至全部融解后使用。
4.观察formazan是否完全溶解,亦可以借助光学显微镜观察。
5.培养细胞时尽量细菌避免污染。
6.应注意设立OD调零孔和对照。
7.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
MTT 溶液(5mg/ml)
有效期: 12个月有效。
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文献和实验加药,或两小时,或半天时间,但我们常在前一天下午铺板,次日上午加药.一般5-7个梯度,每孔100ul,设3-5个复孔.建议设5个,否则难以反应真实情况3.5%CO2,37℃孵育16-48小时,倒置显微镜下观察。4.每孔加入20ulMTT溶液(5mg/ml,即0.5%MTT),继续培养4h。若药物与MTT能够反应,可先离心后弃去培养液,小心用PBS冲2-3遍后,再加入含MTT的培养液。5.终止培养,小心吸去孔内培养液。6.每孔加入150ul二甲基亚砜,置摇床上低速振荡10min,使结晶物充分溶解。在酶联
Protein A ,HRP 2mg 1500 进口分装 C0354 Protein A (金黄色葡萄球菌蛋白 A) 2mg 300 进口分装 *-以上二抗的工作浓度如下(可提供2ml包装产品):
浓度药物的培养基,这样能保证药物浓度的准确。另外,需注意的是,如果用这种方法,不要把 96 孔板的培养液全部吸走后再加药,应该吸完一部分后立即加样,避免由于 96 孔板干燥引起细胞死亡。4. 5%CO2,37℃ 孵育 16-48 小时,倒置显微镜下观察药物的作用效果。下图为一典型的药物梯度为细胞的毒性作用。5. 每孔加入 10ulMTT 溶液(5 mg/ml,即 0.5%MTT),继续培养 4 h。若药物与 MTT 能够反应,可先离心后弃去培养液,小心用 PBS 冲 2-3 遍后,再加入含 MTT
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