- ￥1800
- 彩佑
- 见说明书
- 中国
- Im-07183B
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
150
- 供应商：
上海彩佑
- 检测范围：
见说明书
- 检测方法：
免疫组化法
- 应用：
免疫组化观察成像
- 适应物种：
见说明书
- 标记物：
见说明书
- 样本：
见说明书
- 规格：
50T/100T
该试剂盒以HRP标记的链霉亲和素复合物（HRP Streptavidin Conjugate，HRP-SA）为基础，可用于检测细胞、组织内的特异性抗原。该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、定性定位准确、背景清晰。在所用的一抗与相应靶抗原结合后，用生物化二抗与一抗特异性结合，最后加入HRP-SA，形成抗原—特异一抗—生物素化二抗—HRP-SA复合物，显微镜下观察成像。
注意事项：
1. 修复后缓冲液须自然冷却，自来水冲洗后方能把切片取出，骤冷有可能导致结晶或抗原封闭。
2. 缓冲液的量必须保证所有切片都能浸泡到，用过的柠檬酸缓冲液不能反复使用。
3. 若试剂为微量浓缩液，用前应低速离心，将内盖和管壁附着的溶液离到底部。
4. 封片前一定要换用TBS充分洗涤，以便洗去组织上残留的Tween 20，否则会影响结果观察。
5. 如须复染细胞核，则在封片前复染或直接采用含有染核试剂的封片剂进行封片。
小鼠多聚组氨酸标签(HIS-Tag)试剂盒，试剂盒所含试剂：
试剂A 通透液：0.1% Triton-X 100 10 mL（选用）
试剂B 封闭缓冲液（封闭用） 20 mL
试剂C （原装进口分装）已稀释的即用型一抗（2.5ml）
试剂D （原装进口分装）生物素化羊抗兔IgG 1支（浓度1.5 mg/mL，稀释比为1:300~1:500）50 μL+抗体稀释液20ml
试剂E HRP-SA复合物1支（浓度1 μM，稀释比1:50~1:200）100 μL
试剂F DAB显色液 5ml
小鼠多聚组氨酸标签(HIS-Tag)试剂盒在这里，我们更加建议各位老师和同学，可以考虑购买我们公司该产品的一抗和Sp免疫组化试剂盒一起做免疫组化实验，这样可以熟悉实验，增加实验成功率，优化实验成果步骤。
即用型SP(Streptavidin-Peroxidase)免疫组化检测试剂盒是利用LAB-SA第二代技术生产的免疫组化检测试剂，最大特点是高灵敏度，低倍景染色，直接滴加，操作方便，孵育时间短，适用于冷冻切片、石蜡切片及固定的细胞涂片。可用于检测我公司的一抗。SP试剂盒内容：
无色试剂：内源性过氧化物酶阻断剂
试 剂 A：封闭用正常山羊血清工作液
试 剂 B：生物素标记二抗工作液：生物素标记羊抗兔IgG
试 剂 C：辣根酶标记链酶卵白素工作液
用户自备试剂：
1．10mM TBS（pH7.2~7.4），三羟基氨基甲烷1.21g，氯化钠7.6g
加蒸馏水800mL，浓盐酸调pH值至7.2~7.4，最后定容至1000mL
TBS-T：TBS+Tween 20（0.05%体积比）
2．抗原修复液（依检测抗原不同而选择不同的修复液）10mM pH6.0 柠檬酸缓冲液柠檬酸0.38g柠檬酸三钠2.45g加蒸馏水900mL，浓盐酸调pH值至6.0，最后定容至1000mL或：0.5M EDTA修复液（pH8.0）EDTA·2H2O 186.1g柠檬酸三钠2.45g加蒸馏水 700mL，用10mM NaOH调pH值至8.0，最后定容至1000Ml
3. 缓冲甘油封固剂10 mL
4. Tween 20 5 mL
小鼠多聚组氨酸标签(HIS-Tag)试剂盒，石蜡包埋组织切片免疫染色
实验步骤（建议方案）：
石蜡包埋组织切片3~4μm 厚度
1.烤片： 将待做切片置于切片架上，于60℃恒温烤箱中至少烤1 hr；
2.脱蜡： 切片放入盛有二甲苯的容器中脱蜡3次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次10 min；
3.水化： 切片经下行酒精水化，无水乙醇5min，95%乙醇2次（每次2min），85%乙醇2 min；75%乙醇2min，自来水冲洗，ddH2O洗2×2min；
4.抗原修复：根据抗体说明书推荐方法进行抗原修复，常采用高压、微波（温度达到98~100℃）或酶消化修复法，室温自然冷却，自来水冲洗，ddH2O洗2×2min，TBS洗涤（2×2min）（具体修复方法见附1）
注：有些抗原勿需修复，直接进入第5步封闭。
5.封闭： 滴加试剂B，37℃湿盒孵育30 min；
6.加一抗：滴加用试剂C（即用型一抗），37℃湿盒孵育2 hr 或4℃过夜；
7.洗涤： TBS-T洗涤（3×5 min）；
8.封闭： 滴加试剂B，37℃湿盒孵育10 min；
9.加二抗： 滴加用抗体稀释液稀释的生物素化二抗（试剂D），37℃湿盒中孵育30 min；
10.洗涤： TBS-T洗涤（3×5 min）；
11.封闭： 滴加试剂Tween 20，37℃湿盒孵育封闭20 min；
12.加HRP-SA： 滴加用抗体稀释液稀释的试剂E（1：50~200，终浓度5~20 nM），37℃湿盒中孵育30 min；
13.洗涤： TBS-T洗涤（3×5 min），TBS洗涤（2×5 min）；
14.显色：应用DAB溶液（试剂F）显色；
15.复染：自来水充分冲洗，复染，脱水，透明；
16.封片： 待组织标本干后，用试剂缓冲甘油封固剂封片；
17.观察成像： 显微镜下观察成像。
更多详情信息请来电咨询我们，欢迎新老客服咨询订购：小鼠多聚组氨酸标签(HIS-Tag)试剂盒
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文献和实验科技公司，而Nextal是一家研究蛋白质晶体学的公司，他们拥有一套体系可以简化制备用于蛋白质晶体成像的蛋白的过程。它的加入为Qiagen在蛋白质研究这一块注入了新鲜的血液。用基因工程的手段表达蛋白质，必需经过纯化才能实现最终目的。不同性质的蛋白质纯化条件各不相同太难摸索，这一点和核酸相差甚远，所以将目的蛋白和一个亲和纯化标签融合表达，通过亲和纯化Tag蛋白来纯化目的蛋白，就成为常用的迂回手段。大的Tag最后要经过切割得到目的蛋白，而His-Tag，这个只有6个组氨酸大小的标签在pH8.0时不带电，很小，几乎没有
3 清洗 Step4 洗脱 收集目的细胞 4、Fab-TACS 免疫亲和层析细胞分选技术优势 这样结合了抗体高特异性与层析的分选方法，具有的优点如下： 实验流程简单快速 细胞上没有试剂残留 选后目的细胞不受刺激 免去费时的离心步骤 可以直接从全血等其他血液样本进行分选 每根重力柱可处理多达 50 ml 全血 可根据细胞量自由搭配试剂盒 5、实验数据 当应用于 CD3 +T人/小鼠细胞分选时，实验数据为怎样呢？ 实际测试之后，同样以亲和层析重力柱分选为例
近年来，重组蛋白的应用有了显著增长，与此同时，用于重组蛋白表达和纯化的技术和产品也得以增长。自从亲和标签融合技术出现以来，多种多样的短肽或蛋白亲和标签极大地方便了外源表达重组蛋白的分离与蛋白质复合体的纯化，已成为蛋白质研究领域不可或缺的工具。多聚组氨酸标签（His-tag）是目前高通量蛋白纯化最普遍使用的亲和标签，His 标签融合蛋白的固定化金属离子亲和层析（immobilized metal-ion affinity chromatography, IMAC）被作为主要的蛋白纯化方法。从重
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