图注:用本产品和市场上进口 Q 公司同类产品分别提取 0.2 mL 培养的 B 型流感病毒上清液(含1000 拷贝/mL 病毒),RNA 溶于 200 uL 水中,取 10 uL 进行荧光 PCR(50 uL 体系,使用 MJ
Research 的 CHROMO4 荧光 PCR 仪)。红线表示本产品,蓝线表示进口的 Q 公司同类产
Q:提取液体样品/病毒核酸(RNA 或 DNA)为何很难?
A:原因一是量少。病毒颗粒中的 RNA 或 DNA 是作为遗传物质保存,每个病毒最多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万个 RNA 分子),同时其长度也十分有限(是细胞基因组的万分之一以下),样品中病毒数往往也不是很多,使得样品中核酸的绝对量几乎是微乎其微,十分容易丢失。另外,由于得到的核酸量少,不能使用电泳和测 OD 检测,只能通过 PCR 或 RT-PCR 检测,而病毒 RNA 往往具有稳定的二级结构,进一步增加了鉴定的难度(即不知道是 RNA 提取的问题还是 RT-PCR 的问题)。
Q:如何判断是病毒 RNA 没提取出来还是提取出来了但没有 RT-PCR 成功?
A:在 RT-PCR 反应中加阳性和阴性对照。
备忘录
常见人类疾病相关 RNA 病毒
病毒 简称 疾病名称 类型 长度(Kb)
Measles virus MV measles ssRNA 4.5~8.5
Hepatitis A Virus HAV hepatitis type A ssRNA 7.5
Poliomyelitis virus PV polio ssRNA 7.8
Rubella virus RV German
measles ssRNA 7.9
Hepatitis C Virus HCV hepatitis type C ssRNA 9.3~9.4
Human immunodeficiency
virus HIV AIDS ssRNA 9.7
Dengue Virus DV dengue ssRNA 11
Yellow fever virus YFV yellow fever . ssRNA 11
Rabies virus RV rabies ssRNA 11.9
Influenza A virus IAV influenza ssRNA 13.5
Mumps virus MuV mumps ssRNA 15.4
Ebola virus EBV
virus
hemorrhagic
fever
ssRNA 19
一管式病毒RNAout关联产品 一管式病毒 DNAout(CAT#:3674)
柱式病毒 RNAout(CAT#:71001)