TRIGene

TRIGene
TRIGene是一种通用的总RNA提取试剂，方法简便、快捷，适用于动植物细胞、组织、酵母细胞以及细菌的总RNA抽提，也可从同一样品中同时提取DNA和蛋白质。本试剂基于异硫氢酸胍/酚/氯仿法，能快速裂解细胞，溶解细胞内含物，抑制核酸酶，有效防止RNA在提取过程中的降解。加入氯仿后，溶液分为水相和有机相。RNA保留在上层水相中，分离后可用异丙醇沉淀回收；DNA存在于中间层，可用乙醇沉淀回收；蛋白质在下层有机相中，用异丙醇沉淀可回收。获得的DNA可用作标准参照，比较不同样品的RNA得率。TRIGene提取的总RNA产量大、纯度高，无基因组DNA和蛋白质污染，可直接用于RT-PCR、Northern blot、dot blot、polyA 筛选、体外翻译、RNase保护实验和分子克隆等一系列操作。
用途
• 动植物细胞、组织、酵母细胞以及细菌的总RNA抽提
特点
• 高产率：产量远高于过柱纯化
• 高纯度：OD_260/280值在1.8~2.0之间
• 简便快速：全过程2小时内完成
保存条件
4℃避光密闭保存一年
使用方法
用户需自备的试剂和仪器：氯仿、异丙醇、 75％乙醇（ DEPC水配制）、台式离心机

FAQ
Q1: 提取的RNA中有基因组DNA残留时应如何处理？
A1: 基因组DNA污染可能是由于样品初始用量过大，TRIGene用量不足造成的。增加TRIGene的用量可能消除DNA污染。对于已提取的有DNA污染的RNA溶液，可用无RNA酶的DNA酶（Cat.No. A216-01）进行消化。
Q2: 提取的RNA难以溶解怎么办？
A2: 乙醇洗涤后如果干燥过度可能导致RNA难以溶解。此时可将体系于50~60oC加热5分钟，可有效地解决难溶问题。
Q3: 如何避免提取的RNA降解？
A3: RNA酶如果抑制不彻底将会造成RNA降解。因此实验过程要严格遵循RNA操作规程，使用专用的无RNA酶污染的试剂和容器。采用的样品最好是新鲜材料。采样后如不能及时提取RNA，最好保存在-80oC或液氮中，取出样品时，应立即加入TRIGene试剂进行匀浆，而不能等到样品升温后再加入TRIGene。1 ml TRIGene试剂可处理的样本上限是100 mg，如果样本过量则需相应增加试剂用量。
Q4: 如何提高TRIGene提取植物RNA的效率？
A4: TRIGene本身不能有效去除植物组织的多糖多酚，因而影响RNA的产率，干扰后续实验操作。在处理多糖多酚含量较高的植物组织样品时，可采取匀浆后离心和异丙醇沉淀时添加植物RNA提取高盐溶液（Cat. No. P120）的措施来提高RNA的产量和纯度。
应用实例

TRIGene与不同品牌同类产品提取不同样品中总RNA的效果比较。