ATF6-Luc荧光素酶报告基因质粒 报告基因检测

ATF6-Luc荧光素酶报告基因质粒 报告基因检测

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  • 百奥莱博
  • 北京
  • 2025年07月14日
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      749

    • 英文名

      ATF6 luciferase reporter plasmid

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    ATF6-Luc荧光素酶报告基因质粒 报告基因检测由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多ATF6-Luc荧光素酶报告基因质粒等报告基因检测产品请联*(代"系")我司咨询订购。


    名称:ATF6-Luc荧光素酶报告基因质粒 报告基因检测
    编号:SY0091
    品牌:百奥莱博
    规格:1μg
    产地:国产|进口
    ATF6荧光素酶报告基因(报告基因质粒)(ATF6 luciferase reporter plasimd)是用于检测ATF6转录活性水平为目的的报告基因。ATF6(Activating Transcription Factor 6)是一种内质网应激调节时的跨膜转录因子。内质网中错误折叠蛋白的积累将导致ATF6的溶蛋白性裂解。胞质部分的ATF6进入细胞核作为转录因子引起ER chaperones的转录。ATF6的激活将预示着多种疾病的发生,例如:心肌梗塞、动脉粥样硬化和神经退化疾病等。

    ATF6报告基因主要用于检测细胞中ATF6基因的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

    pGMATF6-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个ATF6结合位点,可以高灵敏度地检测ATF6的激活水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小,使得ATF6报告基因质粒更易于转染。

    质粒图谱

    ATF6-Luc荧光素酶报告基因质粒 报告基因检测

    注意事项
    本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
    为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

    使用说明
    pGMATF6-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

    储存条件:-20℃。

    我公司的ATF6-Luc荧光素酶报告基因质粒 报告基因检测,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:

    ·聚凝胺
    编号:SY0605
    英文名称:Polybrene (hexadimethrine bromide)
    规格:500ul
    聚凝胺是一种多聚阳离子聚合物,常用于哺乳动物细胞的DNA转染实验以增强脂质体的转染效率。Polybrene目前广泛用于逆转录病毒介导的基因转染,慢病毒介导的基因转染,作用机理可能是通过中和细胞表面唾液酸与病毒颗粒之间的静电排斥从而促进吸附作用。Polybrene也是一种有名的抗肝素剂(肝素拮抗剂),常用来生产非特异性凝集的红细胞。另外Polybrene也多用于蛋白测序,因为小剂量的Polybrene在自动测序分析可明显改善多肽的降解现象。PVDF膜加入polybrene还能提高膜的亲和性。

    本产品为即用型溶液,粉末用0.9%NaCl配置成10mg/ml的溶液,并用0.22μM滤膜过滤除菌。使用时一般按1:1000-1:2000稀释,依细胞种类不同稀释比例不同,具体查阅相关文献。
    注:Polybrene对某些细胞(如末端分化的神经元,DC细胞)毒性较大,初次应用建议先做毒性测试。

    操作步骤(仅供参考,具体使用浓度请参考相关文献)

    实验1:逆转录病毒感染(Retroviral Infection)
    (1)重组逆转录病毒原液的制备:取5ml生长培养基(5%血清)加入约含单层转染逆转录包装细胞的100mm培养盘内。孵育24h后,吸去培养液并用0.45μm滤器过滤。
    (2)待感染细胞的培养:100mm培养盘内加入10ml完全培养基,细胞密度为5×105/盘。
    (3)病毒感染:细胞培养24h后,吸去完全培养液。用含polybrene的2ml病毒上清 (或将病毒原液稀释到2ml)感染细胞,polybrene的终浓度为5μg-10μg/ml。37℃孵育3-6h。
    (4)收集病毒颗粒:加入8ml完全培养基。感染3天后,按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。

    实验2:转染
    (1)完全生长培养基培养细胞,培养细胞密度约50%;
    (2)孵育细胞18-24h后准备DNA-培养基- Polybrene混合液,按如下操作制备混合液:①添加完全培养基(60mm培养皿2ml,100mm培养皿3ml),37℃预热;②添加10ng~10µg质粒轻轻混匀;③加入Polybrene至终浓度为5μg-10μg/ml。轻轻混匀。以上每个成分需要按顺序加入。
    (3)去除培养基,在细胞中加入DNA-培养基-Polybrene溶液,在37℃孵育细胞6-20h。细胞培养的前6h内约每1.5h轻柔混匀。
    (4)去除DNA-培养基-Polybrene溶液。用DMSO shock solution(15%DMSO in 1X HBSS)轻轻盖住细胞(60mm培养皿3ml,100mm培养皿4ml)。每次加入溶液时用手轻晃培养盘10s,使得液体均匀分布。然后37℃孵育细胞4min。
    (5)立即去除DMSO shock solution,用完全生长培养基轻轻清洗细胞2次。对于60mm培养皿每次用5ml培养液清洗,100mm培养皿每次用10ml培养液清洗。
    (6)加入完全培养基到细胞中;
    (7)稳定转化:去除生长培养基,按照1:5的比例用选择培养基裂解细胞。
    瞬时表达:去除生长培养基,加入新鲜的生长培养基。24-72h后收获细胞。

    储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期2年。


    ATF6-Luc荧光素酶报告基因质粒 报告基因检测关键词:ATF6-Luc荧光素酶报告基因质粒,ATF6 luciferase reporter plasmid,SY0091


    ·细胞膜可渗透*离子荧光探针
    编号:SY0554
    英文名称:Fluo-4, AM, Cell Permeant
    规格:50μg
    细胞生物学实验中常使用Fluo-3, AM作为一种荧光探针来检测细胞内*离子浓度变化。其检测原理基于Fluo-3,AM可穿透细胞膜进入细胞,之后被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-3,从而被滞留在细胞内。Fluo-3游离配体几乎是非荧光性的,其荧光不会随*离子浓度升高而增强。但是,当它与细胞内*离子结合后可以产生较强的荧光,荧光会增加60至80倍。

    Fluo-4, AM是*指示剂Fluo-3,AM的升级版本,主要变化为后者分子上的两个*原子被Fluo-4,AM上的*所取代,该结构上的微小变化使Fluo-4,AM加载更快,在相同浓度下检测信号更强。

    本产品为Fluo-4,AM粉末状,用于细胞内*离子检测时,Fluo-4, AM的常用浓度为0.5-5μM。

    CAS:273221-67-3
    分子式:C51H50F2N2O23
    分子量:1096.95
    Ex/Em(nm):Ex/Em=494nm/516nm
    纯度:≥98%
    外观:粉末
    储存条件:-20℃避光干燥,有效期至少6个月。
    结构式
    ATF6-Luc荧光素酶报告基因质粒 报告基因检测

    注意事项
    1)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
    2)本Fluo-4,AM 容易吸潮,从冰箱取出后,请确认在干燥的环境放至室温后再开封。由于试剂极其微量,开封前请将其短暂离心,以保证粉末落入管底。
    3)第一次使用时,建议母液即配即用。试剂溶解后尽可能在短时间内使用,以保证实验效果。
    4)母液遇水极易分解,如果不能一次用完,建议分装保存,例如分装成5μl/管,用封口膜封口,并用铝箔纸包裹,放在一个密闭性能好的塑料袋中,并放入一包干燥剂,在≤-20℃密封避光保存。
    5)建议您在正式实验前先摸索一下细胞量、*离子荧光探针的终浓度、培养时间等,找到最佳实验条件。
    6)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


    ATF6-Luc荧光素酶报告基因质粒 报告基因检测关键词:ATF6-Luc荧光素酶报告基因质粒,ATF6 luciferase reporter plasmid,SY0091


    ·依托泊甙溶液(100mM)
    编号:SY0483
    英文名称:Etoposide (100mM)
    规格:100μl
    依托泊甙,是一种抗肿瘤试剂,作为一种凋亡诱导剂,依托泊甙是一种拓扑异构酶II抑制剂(IC50=59.2μM),常用工作浓度5-50µM。

    英文别名:4-Demethylepipodophyllotoxin; EPEG1; VP-16; VP-16213; NK 171; NSC-141540; 9-(4,6-O-Ethylidene-b-D-Glucopyranoside)
    CAS:33419-42-0
    分子式:C29H32O13
    分子量:588.56
    储存条件:-20℃,有效期6个月
    结构式
    ATF6-Luc荧光素酶报告基因质粒 报告基因检测

    ·激动素
    编号:SY0622
    英文名称:Kinetin
    规格:500mg
    激动素(Kinetin),又称6-糠基*基嘌呤(6-Furfurylaminopurine),是一种腺嘌呤类植物细胞分裂素,可与其他植物生长素,如indole-3-acetic acid (IAA), indole-3-butyric acid (IBA), 1-napthaleneacetic acid (NAA)等联合使用用于植物细胞培养,主要起到诱发愈伤组织,以及促使愈伤组织到植物组织的再生作用。

    中文别名:6-糠基*基嘌呤;N6-呋*(代"喃")甲基腺嘌呤
    英文别名:6-Furfurylaminopurine; N6-Furfuryladenine
    CAS:525-79-1
    分子式:C10H9N5O
    分子量:215.2
    熔点:269 - 271℃
    外观:白色结晶
    纯度:>98%
    溶解性:溶于稀盐*(代"酸")或稀碱溶液,微溶于冷水、乙醇
    储存条件:-20℃,有效期三年
    结构式:
    ATF6-Luc荧光素酶报告基因质粒 报告基因检测



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