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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
ARE GFP Reporter Plasmid
- 库存:
405
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
1μg
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京现货ARE-GFP报告基因质粒优惠价在内的一系列细胞生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京现货ARE-GFP报告基因质粒优惠价
品牌:百奥莱博
规格:1μg
产地:国产|进口
编号:SY0200
英文名:ARE GFP Reporter Plasmid
ARE-GFP报告基因是用于检测ARE转录活性水平为目的的报告基因。ARE(antioxidant response element) 与Nrf2和Nrf1转录因子结合,调节参与保护细胞免受氧化损伤的相关基因。
ARE-GFP报告基因主要应用于检测细胞Antioxidant Response信号通路、药物研究、基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMARE-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个ARE结合位点,可以高效地检测ARE的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得ARE-GFP报告基因更易于转染。
质粒图谱

pGM ARE -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
使用说明
pGMARE-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
注意事项
1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
北京现货ARE-GFP报告基因质粒优惠价极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·台盼蓝染色法细胞活力检测试剂盒
编号:SY0508
英文名称:Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit
规格:100T
本试剂盒各组分均以无菌形式提供,可直接用于细胞实验。台盼蓝(Trypan Blue),一种偶氮、亲水性酸性蓝色染料,可透过死亡细胞和垂死细胞的细胞膜,将其染成蓝色,而活细胞由于其细胞膜的完整性,可将台盼蓝排斥在外,因此,通过颜色的变化即可将活细胞(活细胞呈透明无色)和死细胞鉴别开来,基于此原理,本品广泛用于细胞活性水平的常规评估。台盼蓝还可染色胶原和淀粉样蛋白。台盼蓝与蛋白结合形成的复合物可发出红色荧光。另外,台盼蓝(合适浓度)还常用来淬灭细胞表面的自荧光或者其他荧光信号。
使用方法
1)对于悬浮细胞,离心收集细胞,对其充分清洗后,加入适量细胞重悬液重悬细胞制成单细胞悬液;对于贴壁细胞,先用胰酶消化细胞,再按照悬浮细胞的方法制备单细胞悬液。
2)取0.1ml单细胞悬液,按照1:1比例与0.1ml 0.4%台盼蓝染色液充分混匀,室温染色3~10min。
【注】:因台盼蓝具有细胞毒性,染色时间过久会导致部分死细胞染色,干扰计数。通常染色3min即可。
3)取少量上述染色细胞加入血细胞计数板,于显微镜低倍镜下计数,分别计算着色细胞(即损伤细胞和死细胞)和总细胞。
【注1】:用移液枪加染色细胞时,沿着盖玻片的边缘轻轻加液使其完全覆盖住整个小室。不可过量加液或者不足量。
【注2】:1mm2方格内细胞数通常控制在20-50 cells,当细胞数超过200个,需重新调整稀释倍数。
4)按照以下公式来计算细胞数目和活细胞百分比,
a,计算每ml细胞数目:Cells/ml=1mm2大方格内的平均细胞数×稀释倍数×104;【注】:此时的稀释倍数为:步骤2所取的单细胞悬液与台盼蓝染色液混合后的稀释倍数
b,总细胞数目:Total cells=(Cells/ml)×最初制备单细胞悬液的总体积
c,细胞活力值:Viability(%)=(总细胞数-总着色细胞数)/总细胞数×100
【注】:通常情况,健康的对数期培养细胞,活细胞至少占到95%。
注意事项
1)细胞计数前需对细胞进行充分的清洗,因为细胞对血清蛋白具有非常高的亲和力,残留血清蛋白会导致较暗的染色背景。
2)台盼蓝对人体有害,请注意小心防护。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:室温,有效期2年
北京现货ARE-GFP报告基因质粒优惠价关键词:ARE-GFP报告基因质粒,SY0200,ARE GFP Reporter Plasmid
·Calcein-AM/PI活细胞/死细胞双染试剂盒
编号:SY0501
英文名称:Calcein-AM/PI Double Stain Kit
规格:500T
Calcein-AM是一种对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,发绿色荧光(Ex=490nm, Em=515nm)。因其在传统的Calcein(钙黄绿素)基础上引入乙酰甲氧基甲酯(AM)基团,增加了疏水性,使其能够轻易穿透活细胞膜。一旦进入细胞后,Calcein-AM(本身不发荧光)被细胞内的酯酶剪切形成膜非渗透性的极性分子Calcein,从而被滞留在细胞内并发出强绿色荧光。与其它同类试剂(如BCECF-AM和CFDA)相比,由于Calcein, AM细胞毒性极低,是最适合用于活细胞染色的荧光探针,而且不会抑制任何的细胞功能,如增殖和淋巴球的趋化性。
由于死细胞缺乏酯酶,Calcein-AM仅用于对活细胞的细胞生存能力测试和短期标记。因此,Calcein-AM常常与死细胞荧光探针如碘化丙啶(PI)等联合使用,同时进行活细胞和死细胞的荧光双重染色。碘化丙啶(Propidium iodide,PI)不能穿过活细胞的细胞膜,仅能穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核,并嵌入细胞的DNA双螺旋从而产生红色荧光(Ex=535 nm, Em=617 nm),因此PI仅对死细胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激发,因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。而用545 nm激发,仅可观察到死细胞。
本试剂盒的工作原理就在于Calcein-AM和PI的双重染料,来进行活细胞和死细胞的双重染色标记,从而进行活细胞和死细胞水平的分析。根据我司优化的实验体系,单次就200µl细胞悬液进行染色。
注意事项
1)由于Calcein-AM对湿度非常敏感,若是Calcein-AM溶液每次取完需要量后,必须紧紧密封盖子。建议根据单次用量,分装密封保存。Calcein-AM工作液必须现配现用。
2)碘化丙啶(PI)有一定的致癌性,操作时一定要注意防护。若接触到皮肤,需要立即用自来水清洗。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:-20℃,有效期12个月
北京现货ARE-GFP报告基因质粒优惠价关键词:ARE-GFP报告基因质粒,SY0200,ARE GFP Reporter Plasmid
PY08-058A 四硫磺酸盐亮绿增菌液(TTB) 9ml 20支/盒,用于沙门氏菌选择性增菌培养
9012-54-8 Cellulase R-10 纤维素酶R-10
F050303 人IgM抗体 Human IgM
F030821 BIOTIN标记兔抗山羊IgG抗体 Rabbit Anti-Goat IgG*BIOTIN
ARB11871 人糖蛋白130(gp130)免费代测 Human glucoprotein 130,gp130 ELISA KIT
BL1331 通用引物 27F
DP338 N96 植物基因组DNA提取试剂盒
ARB13719 兔诱导型NO合酶(INOS)elisa测定使用说明书 Rabbit inducible nitric oxide synthase,inos ELISA KIT
ARB14145 大鼠β淀粉样蛋白(Aβ)Elisa方法检测
BL1260 核酸纯化柱(提取)
C1501 狗血清(无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
PY02-338 改良CCD(mCCD)琼脂基础 250克
ARB10522 人白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员4(LILRB4)含量分析 Human leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily b member 4,lilrb4 ELISA KIT
ARB13850 猪内皮素1(ET-1)检测服务 Porcine endothelin 1,et-1 ELISA KIT
RP202 PCR Enhancer
辛二酸 Fmoc-Thr-OH 505-48-6
B0901 狗血清(辐照灭菌) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
N,N-双(2-羟yi基)-2-氨基乙磺酸 2-Aminobenzothiazole 10191-18-1
BL0796 鸡IgG抗原(液体)
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销售生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购北京现货ARE-GFP报告基因质粒优惠价。
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文献和实验小猪默默 请教高人: 我现在想用GFP做报告基因,在大肠杆菌中表达蛋白,想请教一下大家用GFP做报告基因是就是在含有GFP的质粒中扩GFP的全长吗?有没有人对GFP基因进行过改造?让报告基因的序列最短还能使表达的蛋白发荧光? Fasta921 1、如果你单纯想表达GFP蛋白,那么转化含GFP基因的表达载体即行。 2、如果你想表达GFP融合蛋白,那么在GFP上游或下游插入目的基因即可。只是有些细节要注意
表达后修饰,直接具有完全酶活。发光机制生物荧光实质是一种化学荧光。萤火虫荧光素酶在Mg2+、ATP、O2的参与下,催化D2荧光素(D2luciferin) 氧化脱羧,产生激活态的氧化荧光素,并放出光子,产生550~580 nm 的荧光,其化学反应式如下。这种无需激发光就可发出偏红色的生物荧光,其组织穿透能力明显强于绿色荧光蛋白(GFP)。荧光素酶是靠酶和底物的相互反应发光,特异性很强,灵敏度高,由于没有激发光的非特异性干扰,信噪比也比较高。二、荧光素酶报告基因的检测流程1、重组质粒制备: 制备含有
蛋白;③含多个内部起始序列和多个终止转移序列 T多次跨膜的膜蛋白。 2. GFP的特性 绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)是一种能够自身催化形成发色结构,并在蓝光或紫外光的激发下发出荧光的新型报告基因。GFP的发现及其研究迅速发展,使人们能够在正常生活条件下对活细胞内分子水平上进行的各种过程及其分子机理进行观察和研究。目前的研究表明,GFP能在多种生物,如细菌,酵母,植物及哺乳动物中
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