腔肠素n 报告基因检测

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名称：腔肠素n
规格：1×250μg
产地：国产|进口
编号：SY0240
英文名：Coelenterazine n
本品为粉末形式供应的腔肠素n（Coelenterazine n），所有的腔肠素衍生物中荧光强度是最弱的，且对Ca2+反应速率也明显低于天然腔肠素。非常有用的Ca2+低灵敏检测底物。

腔肠素（Coelenterazine）是自然界中资源最丰富的天然荧光素，是绝大多数海洋发光生物（超过75%）的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物，比如海肾荧光素酶（Rluc），Gaussia分泌型荧光素酶（Gluc），以及包括水母发光蛋白（aequorin）和薮枝螅发光蛋白（Obelia）在内的光蛋白（Photoproteins）。其发光原理是：以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下，氧化腔肠素，产生高能量的中间产物，并在此过程中发射蓝色光，峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶系统不同，腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷（ATP），因此更便于体内生物荧光的研究。因此，腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。

腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光，细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号，因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧（ROS）水平。

腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET），利用此特性，当与荧光蛋白如GFP的突变体（增强的黄色荧光蛋白，EYFP）联合使用，在底物腔肠素存在的情况下，荧光素酶（如Rluc）催化底物发生蓝光，能量随之转移到EYFP上，发出绿光（~530nm）。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估，适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外，由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定，消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量，适用于高通量筛选如药物开发。

更为重要的一个功能，水母发光蛋白复合物（Aequorin）由22kDa的水母蛋白（Apoaequorin protein）、分子氧和底物腔肠素组成。只有当*离子（Ca2+）与该复合物结合后，腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide，同时释放出CO2和蓝色荧光（~466 nm）。正是此Ca2+依赖性的反应过程（见图1），使得腔肠素非常适用于监测活细胞内*离子水平。与常规的荧光*离子指示剂相比，其主要具有以下几个优点：
1）能检测较大范围的*浓度 – 从0.1 μM至 >100μM。
2）样品无自体荧光，背景荧光低于使用荧光*离子指示剂；虽然信号比使用荧光*离子指示剂弱，但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比，因此具有更高的灵敏度。
3）水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内，使其能够进行数小时至数天的*离子监测。



图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程

目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素（Coelenterazine native），另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验，但是由于其发光波长，细胞膜渗透性，光量子效率上的差异，使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物。

英文别名：CLZN-n
分子式：C30H23N3O2
分子量：457.52
溶解性：溶于甲醇或者乙醇，不溶于DMSO
外观：黄色至棕色粉末
纯度：≥95%（TLC）
结构：


注意事项
1）腔肠素n粉末最好使用惰性气体-氮气或氩气，在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃，长期保存于-70℃。管内即使有少量空气进入，可能造成腔肠素n氧化失活，使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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编号	名称
SY0242	二甲基腔肠素
SY0644	HRP标记小鼠抗His-tag单克隆抗体
SY0629	2,4-二**氧基乙酸
SY0091	ATF6-Luc荧光素酶报告基因质粒
SY0205	AP3-GFP报告基因质粒
SY0738	Alexa Fluor 488标记驴抗豚鼠IgG(H+L)
SY0510	细胞增殖示踪荧光探针
SY0369	大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)
SY0286	多片段一步法快速克隆试剂盒
SY0568	iFluor 555标记鬼笔环肽(橘色)
SY0651	HRP标记小鼠抗Myc-tag单克隆抗体
SY0443	人源高密度脂蛋白
SY0010	1×STE Buffer(无菌)
SY0642	小鼠抗His-tag单克隆抗体
SY0134	MR-Luc荧光素酶报告基因质粒
SY0393	His标签蛋白琼脂糖高速纯化树脂
SY0417	70mm透析袋(透析分子量14kDa)
SY0170	ISRE-GFP报告基因质粒
SY0514	人纤维连接蛋白
SY0746	辣根过氧化物酶标记链霉亲和素
SY0451	牛血清白蛋白(标准级别)
SY0428	T7 Tag多肽
SY0403	内毒素高效去除纯化树脂
SY0052	腺苷三磷酸溶液(100 mM)(ATP)
SY0500	Hoechst 33342/PI双染试剂盒
SY0014	BL21 (DE3)化学感受态细胞
SY0137	RORα2-Luc荧光素酶报告基因质粒
SY0580	DPH(二肉桂酰)
SY0641	小鼠抗α-Tubulin单克隆抗体
SY0316	RIPA裂解液(中)
SY0085	FOXO-Luc荧光素酶报告基因质粒
SY0487	体内巨噬细胞清除剂(阴离子**松)
SY0424	HA Tag多肽
SY0258	EveGreen (20×in water)
SY0037	即用型PCR预混溶液
SY0314	胃蛋白酶抑制剂
SY0306	抑肽酶
SY0673	Alexa Fluor 594标记山羊抗兔IgG(H+L)
SY0653	兔抗HA-Tag多克隆抗体
SY0392	His标签蛋白琼脂糖纯化树脂
SY0468	蛋白A纯化预装柱
SY0066	RAR萤火虫荧光素酶报告基因质粒
SY0736	Alexa Fluor 488标记驴抗大鼠IgG(H+L)