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243
- 英文名:
2×PCR Plus Master Mix (No Dye)
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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冷藏
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")2×PCR Plus Master Mix(不含染料)优惠促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:2×PCR Plus Master Mix(不含染料)优惠促销
英文名:2×PCR Plus Master Mix (No Dye)
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:SY0029
规格:5×1ml
PCR Plus Master Mix (No Dye)包含Taq Plus DNA Polymerase,dNTP以及优化的缓冲体系,只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化实验的操作步骤,提高了高通量操作和实验结果的重现性。Mix中不含有*酚蓝染料,其中的保护剂使得Mix 经过反复冻融后仍可保持稳定的活性。PCR产物的3’端带A,可轻松克隆至T载体。
质量控制
核酸外切酶残留检测:20 μl本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸外内酶残留检测:20 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时, DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中,以ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
功能检测:50 μl体系中,以20 ng人基因组DNA为模板扩增α-1-antitrypsin基因。30个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,观察到单一的1 Kb条带。
2×PCR Plus Master Mix(不含染料)优惠促销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·逆转录酶
编号:SY0293
英文名称:M-MLV (H-) Reverse Transcriptase
规格:5000U
本品适用于第一链cDNA合成,cDNA 片段长度最高可达12kb。也可用于低拷贝基因的检测。野生型的M-MuLV包含RNase H活性,该活性可催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA,因而在cDNA 第一条链的合成过程中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA,本品为通过基因重组技术得到的点突变型RNase H活性缺失的逆转录酶,即M-MLV (H-) Reverse Transcriptase,与M-MuLV相比,不仅改善了模板RNA可能被降解情况,且具有更强的延伸能力和稳定性,可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建。
注意事项
1)为保证反转录成功,建议使用高质量的RNA样品。
2)请保持实验区域洁净;操作时需穿戴干净的手套、口罩;实验所用的离心管、枪头等耗材均需保证RNase free,以防止RNase污染。
3)如果RNA模板GC含量丰富或者具有复杂的二级结构,可以先只加RNA模板、引物和RNase free H2O混匀,65℃变性5min,冰上冷却,短暂离心后加入其他成分继续下面的反转录步骤。
4)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
使用方法
1第一条链cDNA合成(以20μl反应体系为例)
1.1 按照表【1】配制反应体系
| RNase free ddH2O | to 20μl |
| 5×Reaction Buffer | 4 μl |
| dNTP Mixture (10 mM each) | 1 μl |
| Oligo(dT)18(0.5μg/μl) | |
| or Random hexamer (0.1μg/μl) | |
| or GSP(Gene Speicific Primer)(2 μM) | 1 μl |
| RNase inhibitor (40 U/μl) | 0.5 μl |
| M-MLV (H-) Reverse Transcriptase | 1 μl |
| 模板RNA | Total RNA: 50ng-5μg mRNA: 5-500ng |
| 表1 cDNA第一条链合成反应体系表 | |
1.2 轻轻混匀
若使用Oligo(dT)18或基因特异性引物,42℃孵育50min。
若使用Random hexamer,25℃孵育10min,42℃孵育50min。
1.3 65℃加热15min失活M-MLV (H-) Reverse Transcriptase。
2 RT-PCR
建议取1/10~1/5体积(2~4µl)的反转录产物作为PCR模板。
2.1 按照【表2】配制反应体系表
组分体积终浓度
| cDNA模板 | 2μl | 依需要调整 |
| Forward Primer (10μM) | 1μl | 0.2 μM each |
| Reverse Primer (10μM) | 1μl | 0.2 μM each |
| 10×Taq Buffer(含Mg2+) | 5 μl | 1× |
| 2.5mM dNTPs | 4μl | 0.2 mM |
| Taq DNA Polymerase | 0.5μl | 2.5units |
| ddH2O to final volume | 50μl | / |
| 表2 RT-PCR反应体系表 | ||
2.2 按下列条件进行PCR反应:
储存条件:-20℃。
2×PCR Plus Master Mix(不含染料)优惠促销关键词:2×PCR Plus Master Mix (No Dye),2×PCR Plus Master Mix(不含染料),SY0029
·PR-GFP报告基因质粒
编号:SY0162
英文名称:Progesterone receptor (PR) GFP Reporter Plasmid
规格:1μg
PR-GFP报告基因是用于检测PR转录活性水平为目的的报告基因。PGR(progesterone receptor)主要介导孕酮的生理作用。孕酮是动物内分泌系统、免疫系统、经血调控、组织修复与再生、炎症反应、血管发生、胚泡着床与维持妊娠交互作用的关键因子,尤其在动物生殖活动中起着非常重要的作用。
PR-GFP报告基因主要用于检测细胞Progesterone 信号通路中的孕酮受体的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。
pGMPR-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个PR结合位点,可以高效地检测PR的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得PR-GFP报告基因更易于转染。
质粒图谱
pGMPR -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
使用说明
pGMPR -GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
注意事项
1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
·AAT-promoter-Luc荧光素酶报告基因质粒
编号:SY0111
英文名称:AAT-promoter luciferase reporter plasmid
规格:1μg
AAT-Promoter荧光素酶报告基因(报告基因质粒)(AAT-Promoter luciferase reporter plasimd)是用于检测AAT-Promoter转录活性水平为目的的报告基因。AAT(alpha 1-Antitrypsin或alpha-1 antiproteinase,也简称为A1AT),又称serine peptidase inhibitor,cladeA,member 1或serine proteinase inhibitor,cladeA,member 1(简称SERPINA1),是一种可以被分泌到细胞外的丝*酸蛋白酶抑制剂,可以抑制elastase、plasmin、thrombin、trypsin和chymotrypsin等。AAT基因缺陷时会导致肺气肿(emphysema)或肝脏疾病等。
AAT-Promoter报告基因主要用于AAT-Promoter转录活性水平的检测等。
pGMAAT-Promoter-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了AAT启动子,可以高灵敏度地检测AAT-Promoter的转录活性水平。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒对转录因子结合的特异性。另外,由于质粒体积减小,使得AAT-Promoter报告基因质粒更易于转染。
质粒图谱
注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
使用说明
pGMAAT-promoter-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
储存条件:-20℃。
2×PCR Plus Master Mix(不含染料)优惠促销关键词:2×PCR Plus Master Mix (No Dye),2×PCR Plus Master Mix(不含染料),SY0029
PY08-016 四号琼脂平板 9CM 10皿/盒,用于霍乱弧菌的选择性分离培养
鞭毛染色液(石碳酸复红法) 50ml|100ml
BL1067 蛋黄粉
4-甲基伞形酮-D-葡萄糖醛酸苷 LPS 6160-80-1
BTN130824 冷启动核酸酶 Cold-active Nuclease
HC0194 记号笔(蓝色)油性
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BL1105 3M 乙酸*(PH5.2)
SSC缓冲粉剂(20×) 1L|10×1L|500g
顺丁烯二酸* DL-Cysteine HC1 3105-55-3
L-缬*酸 o-Vanillin 72-18-4
ARB13164 小鼠热休克因子1(HSF1)elisa测定使用说明书 Mouse heat shock factor 1,hsf1 ELISA KIT
D-脯*酸甲酯盐*(代"酸")盐 MUD 65365-28-8
秋水仙碱溶液(10mg/ml) Colchicine 10mg/ml 5ml
BL0882 兔抗山羊IgG免疫血清
DP408 RNAStore样本保存液
CYB166024-D 兔抗鸡IgG-GOLD
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