北京FOXO-Luc荧光素酶报告基因质粒厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京FOXO-Luc荧光素酶报告基因质粒厂家在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：北京FOXO-Luc荧光素酶报告基因质粒厂家
编号：SY0085
英文名：FOXO luciferase reporter plasmid
规格：1μg
品牌：百奥莱博
FOXO荧光素酶报告基因（报告基因质粒）（FOXO luciferase reporter plasimd）是用于检测FOXO转录活性水平为目的的报告基因。FOXO转录因子家族包括Foxo1,Foxo4,Foxo3a, Foxo6等，它们主要功能包括调节炎症相关细胞的平衡，通过多种不同的信号转导途径参与细胞周期停滞、细胞凋亡和抗氧化应激等免疫相关调节，还在物质代谢等方面也发挥重要作用。

FOXO报告基因主要用于检测细胞中PI3K/AKT信号通路的活性和FOXO转录因子的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMFOXO-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个FOXO结合位点，可以高灵敏度地检测FOXO的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。由于质粒体积减小，使得FOXO报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

使用说明
pGMFOXO-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

储存条件：-20℃。

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·快速核酸银染试剂盒
编号：SY0274
英文名称：Rapid Silver Stain Kit for Nucleic Acid
规格：1000ml
分子生物学实验中，常利用银染的方法显示聚丙*(代"烯")酰胺凝胶或者琼脂糖凝胶中的核酸条带，其检测原理是：银离子(Ag+）可与核酸形成稳定的复合物，随后Ag+ 在碱性环境下被还原剂如甲醛还原成银颗粒，后者通过显色可把核酸电泳条带染成黑褐色。该方法检测灵敏度比EB高达200倍，常用于检测SSR标记、SNP标记等。

常规的银染方法由固定、氧化、染色、显影、终止等若干个步骤组成，操作十分繁琐，尤其不适用于大批量实验。而本品的推出可大大改善上述问题，主要体现在：1）超快速，整个过程仅需20分钟；2）操作简单，只有染色和显影两步；3）灵敏度跟常规方法相当，比EB高200倍，能检测到10ng的DNA条带。4）两个成分都是现用现配，可重复性好。

按照本方案提供的配制方法，共可配制试剂A和试剂B分别1000ml。

产品组份：

 

组分名称	规格	外观
试剂A 1	2g	干粉
试剂A 2（10×）	100ml	液体
试剂A 3（10×）	100ml	液体
试剂B 1（10×）	100ml	液体
试剂B2	5ml	液体

注意事项：
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）银染主要出现在PAGE胶的表面，因此该方法更适合用于薄胶（0.5-0.75mm）的检测。
3）染色过程中，缓慢的振荡是必要的，一般选择40-60 rpm。
4）凝胶表面的裂纹多是由于压力、手印及表面干燥所致，所以全程操作中都应带手套。
5）PAGE凝胶背景呈均一的黑色多是水中的杂质引起的，所以溶液的配制应使用电导率小于1 μS的去离子水。
6） 如果染色后有呈灰尘或烟雾状灰色或棕色的沉淀出现在凝胶表面，可能是几步漂洗过程不够彻底，或染色过程温度太低。
7）较深的银染背景多是丙*(代"烯")酰胺中的杂质所致。
8）室温操作时，温度的波动往往会干扰银染的效果，恒温水浴可以解决这个问题。
9）染色使用的玻璃器皿必须非常干净，用酸浸泡可以满足要求。
10）银染应尽快照相，随着时间延长，蛋白条带会变浅，而背景会加深。
11）影响硝酸*(代"银")染色效果的因素很多，其使用容器的材质也是一个非常重要的因素。通常玻璃平皿是最理想的银染容器，其化学性质极其稳定，几乎不与银染试剂中的任何成分发生反应，且不具有吸附染料的特性。其次是医用搪瓷盘，瓷釉为无机玻璃质材料，能耐各种浓度的无机酸(包括强氧化性酸)、有机酸、弱碱和强有机溶剂，但不耐酸、碱介质交替使用，而常规银染法就是酸碱介质交替使用，因此搪瓷盘银染效果不如玻璃平皿。塑料种类较多，如果塑料是由含*基官能团的有机物（脲、三聚*胺或*代三聚*胺）与醛类（主要是甲醛）化合物经缩聚反应而得，则这种塑料会在碱性溶液中与有强还原作用的甲醛发生反应，进而使甲醛消耗，减弱银离子与蛋白的结合，降低显色敏感度和显色速度。

操作方法

1 配制试剂A（以100ml为例）
所需要配制的试剂A（即染色液）的体积跟PAGE胶的大小相关，一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。本方案以配制100mL试剂A为例进行详述，请根据具体凝胶大小，确定实际所需染色液用量，再按比例改变各组分用量。
以100ml试剂A为例，在一干净烧杯中加入下列组分搅拌混匀即可。试剂A需要新鲜配制。
去离子水：80 mL
试剂A1：0.2 g
试剂A2：10 mL
试剂A3：10 mL

2 配制试剂B（以100ml为例）
所需要配制的试剂B（即显色液）的体积跟PAGE胶的大小相关，一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。本方案以配制100ml试剂B为例进行详述，请根据具体凝胶大小，确定实际所需试剂B用量，再按比例改变各组分用量。
以100ml 为例，在一干净烧杯中加入下列组分搅拌混匀即可。试剂B需要新鲜配制。
去离子水：89.5 mL
试剂B1：10 mL
试剂B2：0.5 mL

3 染色
1）PAGE电泳结束后，将PAGE胶转移到装有去离子水的瓷盘中，进行漂洗，2min/次，共2次。
2）将PAGE胶转移到适当体积的试剂A，使试剂A在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温染色10min。
3）倒掉试剂A，用去离子水快速漂洗2次，每次30秒。
4）将PAGE胶转移到适当体积的试剂B，使试剂B在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温摇晃直到颜色显现，一般需要10min左右。
5）将PAGE胶置于适当背景下照相。


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·柠檬酸*-EDTA抗原修复液(40×)
编号：SY0774
英文名称：Antigen Retrieval Buffer (40×Citrate-EDTA, pH 6.2)
规格：125ml
免疫染色实验，细胞或组织往往需要经多聚甲醛、甲醛或其他醛类固定来维持本身的形态结构，然而此步操作通常会封闭抗原决定簇，使得相当多的抗原不能与抗体很好的进行反应，从而引起染色信号衰减，甚至出现假阴性现象。引起抗原决定簇被掩盖的原因在于：1）醛类固定剂导致组织上的许多*基酸残基在分子内或分子间形成醛键，从而封闭抗原表位；2）醛类固定剂在固定过程中与蛋白质发生交联（cross-link），形成醛交联蛋白，导致抗原表位被封闭。因此，需要对固定组织进行抗原修复（antigen retrieval，AR）来逆转被掩盖的抗原表位，使其重新暴露出来，恢复抗原表位-抗体的结合能力，从而改善染色效果。

抗原修复的方法非常多，主要有热诱导的抗原修复（Heat Induced Epitope Retrieval，HIER）和酶诱导的抗原修复（Proteolytic Induced Epitope Retrieval），修复方法的选择需要考虑到抗原表达程度、抗体要求、组织类型以及组织固定方法等因素。作为免疫染色至关重要的一步，抗原修复方法的选择、温度、pH值、修复时间、修复介质都会影响到实验结果。实验者需根据自身的实验体系以及实验条件来选择恰当的修复溶液，从而达到最佳的修复效果。

本品为柠檬酸*-EDTA抗原修复缓冲液，pH 6.2，采用了常用的柠檬酸*缓冲液和EDTA，结合了两者修复抗原的优点，并经过适当优化，可以更加有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。本品可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。

本品为40×浓缩的柠檬酸*-EDTA抗原修复液，使用前需用ddH2O稀释成1×工作液。

注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）抗原修复通常用于醛类固定的石蜡切片，而冰冻切片由于组织比较脆弱，易在修复过程中被破坏掉，因此比较少进行抗原修复。然而醛类固定的冰冻切片同样会发生蛋白交联而封闭抗原表位，导致染色效果不佳。很多文献资料表明采用适当的方法进行冰冻切片抗原修复，也能显著改善染色效果。特别是当染色效果欠佳的前提下，可考虑进行冰冻切片的抗原修复。
3）本产品经冻存后需经适当加热后才能完全溶解。同时由于本产品含有少量的特殊去垢剂，加热后会产生非常细密的气泡而呈现非常均匀的类似浑浊状，属于正常现象，并非不溶解或产生了沉淀。室温放置较长时间后，例如1-2天，溶液会完全澄清。对于溶解后呈现非常均匀的类似浑浊状的本产品，此时即可取适量稀释后使用。抗原修复过程中加热时也会产生非常细密的气泡而呈现均匀的浑浊状，也属于正常现象，请放心使用。
4）修复过程中一定要使用足量的修复液（1×）来完全浸没组织切片。

储存条件：4℃，有效期一年。


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ARB13514 鱼类白介素1α(IL-1α)酶联免疫定量检测 Fish IL-1α ELISA KIT
CYB167059 兔抗大鼠IgG
粘蛋白 PTSA 84195-52-8
橄榄油 Polyquaternium-10 8001-25-0
胆色素染色液(改良Fouchet法)   2×100ml
ARB11311 人促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA代测服务 Human adrencocorticotropic hormone,acth ELISA KIT
25988-63-0 Poly-L-Lysine 多聚-L-赖*酸(15-30万)
碱性品红 MES 632-99-5
T4 DNA连接酶 Sodium succinate dibasic hexahydrate 9015-85-4
5(6)-羧基荧光素二乙酸酯 ADA-2Na 124387-19-5
*苄青霉素 Olive oil 7177-48-2
PY02-349  脑心浸液琼脂  100克  
SJ0721 苏木素染色液
盐*(代"酸")洛美沙星 Trehalose anhydrous 98079-52-8
PY02-380  EF-18琼脂基础培养基  250克  
Bouin"s固定液   100ml|500ml
RN0601 EASYspin 全血RNA快速提取试剂盒
碱性红1:1 DL-3-Aminoisobutyric acid 3068-39-1
J0307                 兔抗绵羊IgG(H+L)抗血清                          
ARB12437 大鼠骨*素/骨谷*酸蛋白(OT/BGP)ELISA代测服务 Rat osteocalcin/bone gla protein,ot/bgp ELISA KIT
ARB12917 小鼠白细胞介素1β(IL-1β)酶联免疫定量检测 Mouse interleukin 1β,IL-1β ELISA KIT
ARB13510 鱼促肾上腺皮质激素(ACTH)含量检测 Fish acth ELISA KIT

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