磷酸酶抑制剂混合物(100×)厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")磷酸酶抑制剂混合物(100×)厂家，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：磷酸酶抑制剂混合物(100×)厂家
英文名：Phosphatase Inhibitor Cocktail (100×)
规格：1ml
产地：国产|进口
细胞中蛋白的磷酸化和去磷酸化是信号转导、细胞增殖、细胞分化和细胞凋亡等许多重要的生物学活动的调控开关。因此在蛋白研究过程中，对磷酸酶作用的控制具有重要的生理意义。组织和细胞中充斥着大量的酶原，经裂解后释放到体外的酶原被充分激活从而开始消化周围的蛋白。因此，在研究蛋白*(代"磷")酸化途径和信号通路的过程中保护蛋白*(代"磷")酸化状态是极其关键的。

本品是多种磷酸酶抑制剂的特殊混合物，广谱抑制非特异性的酸性/碱性磷酸酶以及特异性的蛋白酪*酸磷酸酶，丝*酸/苏*酸蛋白*(代"磷")酸酶（PPA，PP2A）等。本品是以白色冻干粉的形式供货，适用于动物组织，细胞提取物等样品。

使用方法
收到产品后，低速离心使得冻干粉聚集在管底。之后加1ml蒸馏水充分溶解形成100×存储液。按1:100的比例加入适量的提取液内混匀，再进行总蛋白的提取。或者根据实验目的，组织和细胞的特殊性，首先进行摸索和优化工作体系。

储存条件：-20℃，有效期六个月。

注意事项
1）100×存储液建议分装冻存，避免反复冻融。工作液需现配现用。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套进行操作。
3）在产品的保存过程中可能会因受潮引起产品变成黄色，该变化系产品中加入的冻干物质的原因，不会影响产品性能，请放心使用。

更多有关磷酸酶抑制剂混合物(100×)厂家的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·pUM19-T Vector TA克隆载体
编号：SY0295
规格：1μg
pUM19-T载体是一种用于PCR产物高效克隆（TA Cloning）的专用载体。它是在线性化pUC19载体的基础上，在两侧的3’端添加碱基T而制成。经特殊工艺改造后，使其具有较高的克隆效率：

1）特殊的纯化方式使得超过99% 的pUM19载体两端都具有3’-T突出端，因此极大的降低了载体自连率。
2）由于大部分耐热聚合酶反应时都会在PCR 产物的3’端添加一个A，可与pUM19载体3’ 端的T互补连接，因此可大大提高PCR 产物的连接和克隆效率。
3）pUM19载体多克隆位点位于β-lactamase基因内，可以通过蓝白斑快速筛选含有插入片断的重组子。

产品组份：
pUM19-T Vector (50 ng/μl)————20 μl
500 bp control insert (50 ng/μl)————20 μl

使用说明
1. 将载体置于冰上融化。建议第一次使用时将载体分装成小份保存，每次取一支使用。
2. 按下表配制连接反应体系：

 

ddH2O	To 10 μl
10×Ligase Buffer	1 μl
pUM19-T Vector (50 ng/μl)	1μl (约0.025 pmol)
插入片段*	0.075 pmol～0.25 pmol
T4 DNA Ligase (400 U/μl)	1 μl

注：插入片段与载体的摩尔比应在3:1～10:1之间。请根据琼脂糖凝胶电泳或紫外分光光度计检测确定插入片段的浓度，并根据其大小计算摩尔量。1 pmol 1 kb双链DNA的质量约为660 ng。
3. 对照反应体系（可选）：

ddH2O	6 μl
10×Ligase Buffer	1 μl
pUM19-T Vector (50 ng/μl)	1 μl (约0.025 pmol)
500 bp control insert(50 ng/μl)	1 μl (约0.15 pmol)
T4 DNA Ligase (400 U/μl)	1 μl

4. 轻轻吹打混匀反应体系，室温22-26℃孵育1-2小时，或16℃过夜。
5. 转化：
1) 将连接产物加入到100 μl感受态细胞中(连接产物的体积不要超过感受态细胞体积的1/6)，轻轻弹匀，冰上孵育30分钟。
2) 将离心管置于42℃水浴，不要晃动，准确热激90s后，立刻置于冰水浴中，不要晃动，静置2-3分钟。
3) 向离心管中加入900 μl LB或SOC培养基，150 rpm, 37℃振荡培养45分钟，使菌体复苏，抗性基因表达。
4) 2500 g离心5分钟，去掉900 μl上清。用剩余培养基将菌体重悬混匀，用无菌涂布棒在含有正确抗性的平板上轻轻涂匀，室温正置10min。待菌液被平板吸收后，37℃倒置培养过夜。
【注】：如果使用超级感受态细胞（转化效率>108 cfu/μg），可以直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存，一周之内都可重新涂板。

注意事项
1) 尽量避免反复冻融，可将载体和对照片段分装成小份后保存。
2) 连接使用的PCR 片段3’ 端应带有A 末端；Pfu DNA Polymerase (SY0036)等高保真聚合酶的扩增产物不带A，应先在其末端加A后再进行TA克隆。
3) 为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

附1：pUM19-T 载体结构


储存条件：-20℃。


磷酸酶抑制剂混合物(100×)厂家关键词：磷酸酶抑制剂混合物(100×),Phosphatase Inhibitor Cocktail (100×),SY0311


·罗丹明标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
编号：SY0686
英文名称：Rhodamine(TRITC) AffiniPure Goat anti-Mouse IgG (H+L)
规格：100μl
本品是由Rhodamine(TRITC)标记的山羊抗小鼠IgG（H+L），使用抗原偶联的琼脂糖微珠从山羊抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的小鼠IgG分子，也会与其他小鼠免疫球蛋白的轻链结合。可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应，但不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。

Rhodamine(TRITC)的光谱性质类似于Cy3，Amax（最大激发波长）为550nm，Emax（最大发射波长）为570nm。本品适合做单标实验。要做多标（multiple-labeling）实验，建议使用经过与相近物种血清蛋白或者免疫球蛋白预先经过亲和吸附处理的二抗。

浓度：(0.75 mg/ml
缓冲液：0.005M 磷酸*，0.125M *化*, pH 7.6
荧光素：TRITC, Amax=550, Emax=570
稳定剂：7.5mg/ml BSA（无IgG，蛋白酶），50% 甘油
防腐剂：0.025% 叠氮化*
推荐稀释比例：1:25～100（适用于大多数实验）
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。


磷酸酶抑制剂混合物(100×)厂家关键词：磷酸酶抑制剂混合物(100×),Phosphatase Inhibitor Cocktail (100×),SY0311


·Alexa Fluor 488标记驴抗鸡IgY(H+L)
编号：SY0740
英文名称：Alexa Fluor 488 AffiniPure Donkey Anti-Chicken IgY (H+L)
规格：100μl
本品是由Alexa Fluor 488标记的驴抗鸡IgY（H+L），使用抗原偶联的琼脂糖微珠从驴抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的鸡IgY分子，也会与其他鸡免疫球蛋白的轻链结合。本品预先与相近物种包括牛、山羊、豚鼠、叙利亚仓鼠、马、人、小鼠、兔、大鼠和绵羊血清蛋白经过亲和吸附处理，ELISA和/或固相免疫吸附检测证实本品与以上物种几乎无交叉反应，但可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应。本品不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。

Alexa Fluor 488的光谱性质同FITC，Amax（最大激发波长）为493nm，Emax（最大发射波长）为519nm。本品适合做多标实验，广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学（ICC），流式细胞术（FC）以及免疫组化（IHC）等。

浓度：0.75 mg/ml
缓冲液：0.005M 磷酸*，0.125M *化*， pH 7.6
稳定剂：7.5mg/ml BSA（无IgG，蛋白酶），50% 甘油
防腐剂：0.025% 叠氮化*
荧光素：Alexa Fluor 488, Amax=493nm; Emax=519nm
推荐稀释比例：1:50～400（适合多数实验）
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。

北京百莱博科技有限公司专业生产蛋白质研究产品，欢迎来电咨询选购磷酸酶抑制剂混合物(100×)厂家。