5-氮杂胞嘧啶核苷 分子生物学试剂

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名称：5-氮杂胞嘧啶核苷 分子生物学试剂
编号：QN0573
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
本产品是一种核苷类似物，能够有选择地激活真核基因表达并且在某些情况下改变细胞的分化状态。其有强大的抑菌、抗肿瘤和诱变作用，用于实体肿瘤研究。

别名：5-氮胞苷;阿扎胞苷
CAS号：320-67-2
分子式：C8H12N4O5
分子量：244.2
纯度：＞98%
性状：白色至类白色结晶性粉末
储存条件：-20℃

5-氮杂胞嘧啶核苷为一种低甲基化的强效生长抑制剂及细胞毒素剂，抑制DNA甲基转移酶 。也作用于S期的细胞周期，能迅速磷酸化并掺入RNA，通过破坏核酸顺利翻译为蛋白质，而抑制蛋白质的合成。还可通过抑制乳清酸核苷酸脱羧酶而影响嘧啶的合成。是一种基因表达、基因激活和沉默的重要调节剂。

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·胰蛋白酶(1:250)
编号：QN0460
英文名称：Trypsin
规格：25g|100g
在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)以及传代细胞培养中，贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶，EDTA等，其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解，使组织或贴壁细胞分散成单个细胞，制成细胞悬液用于进一步的实验。

别名：结晶胰蛋白酶;胰蛋白酵素;胰酶
CAS号：9002-07-7
储存条件：2～8℃
酶活：250.N.F.U/mg
性状：白色或类白色粉末

·尿酸酶
编号：QN0421
英文名称：Uricase
规格：500U|1KU
本品仅可用于生化研究，例如可用于检定血清和尿中的尿酸。

别名：环拉酸
CAS号：9002-12-4
储存条件：-20℃
酶活：10units/mg
性状：微绿色结晶或有光泽透蝗条纹片。几乎不溶于水

·核糖核酸酶A
编号：QN0465
英文名称：RNase A,bovine pancreas
规格：25mg
核糖核酸酶A可用于测定核酸的结构，核糖核酸(RNA)序列分析，水解蛋白样品中的RNA，纯化DNA等方面。

核糖核酸酶A是内切核糖核酸酶，可特异地攻击RNA上嘧啶残基的3"端，切割与相邻核苷酸形成的磷酸二酯键。反应终产物是嘧啶3"磷酸及末端带嘧啶3"磷酸的寡核苷酸。无辅因子及二价阳离子存在时，核糖核酸酶A的作用可被胎盘RNA酶抑制剂(B1ackburn et al．1977)或氧钒—核糖核苷复合物(Puskas et al．1982)所抑制。

CAS号：9001-99-4
储存条件：-20℃
来源：牛胰
性状：类白色结晶或冻干粉

·尿苷二磷酸葡萄糖二*
编号：QN0541
英文名称：Uridine 5"-diphosphoglucose disodiu*(代"m") salt
规格：100mg
本品常用作甲基辅酶M的还原刺激剂。

别名：尿苷-5-二磷酸-D-葡糖二*盐
CAS号：28053-08-9
分子式：C15H22N2Na2O17P2
分子量：610.27
储存条件：−20℃


5-氮杂胞嘧啶核苷 分子生物学试剂关键词：5-氮杂胞嘧啶核苷,阿扎胞苷,5-氮胞苷


·pUC18载体
编号：QN1047
英文名称：pUC18 plasmid
规格：20ug
pUC18/19 是一种常用克隆载体，由pBR322 改造而来，含有抗*苄青霉素基因、LacZ 基因及与M13mp18相同的多克隆位点。这两个质粒的结构几乎是完全一样的，只是多克隆位点的排列方向相反。重组pUC18/19的克隆转化细胞可用蓝/白斑法筛选。本产品为高纯度质粒，溶于TE缓冲液，可直接用于PCR、酶切等分子克隆操作。

宿主菌：建议用E.coli DH5α、JM109 及XL1-Blue 做受体菌。

储存条件：-20℃

·ONPG
编号：QN0159
英文名称：o-Nitrophenyl-β-D-Galactopyranoside
规格：1g
本品ONPG通常作为测定β-半乳糖苷酶的底物。经β-半乳糖苷酶催化后可产生黄色产物，在410－420nm波长可以检测吸光度。

CAS号：369-07-3
分子式：C12H15O8N
分子量：301.25
储存条件：−20℃
性状：白色粉末

·维生素B12(钴胺素)
编号：QN0111
英文名称：Vitamin B12;Cyanocobalamin
规格：1g

别名：维生素乙B12;*钴胺;维他命B12
CAS号：68-19-9
分子式：C63H88CoN14O14P
分子量：1355.37
储存条件：RT
性状：深红色结晶或结晶性粉末

·潮霉素B
编号：QN0023
英文名称：Hygromycin B
规格：1g
本品常用做蛋白质合成抑制剂，可用于植物细胞培养等生化研究。本品是潮霉素B干粉，用于细胞培养实验溶解后过滤除菌。推荐溶剂水，PBS溶液。

CAS：31282-04-9
储存条件：-20℃
别名：湿霉素乙;效高素;潮霉素B干粉
效价：≥950U/mg

潮霉素B是由吸水链霉菌代谢产生的一种*基糖苷类抗生素，通过干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读而抑制蛋白合成，从而杀死原核(如细菌)、真核(如酵母菌，真菌)和高等哺乳动物真核细胞。

大肠杆菌来源的潮霉素抗性基因(hyg或hph)，编码潮霉素B磷酸转移酶，将潮霉素B转化成不具有生物活性的磷酸化产物，从而起到解毒作用。针对这一原理，潮霉素B是一种非常有用的选择性标记，用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。另外，由于作用模式的差异，常与G418，Zeocin™ 和Blasticidin S联合使用进行双抗性阳性细胞株的选择。潮霉素B还能用作抗病毒剂，因其选择性渗透进入因病毒感染增强通透性的细胞，且具有抑制翻译的功效。还可混合入动物饲料中起到驱虫功能。

使用方法

1. 常用筛选浓度
注意：潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve)，即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立
注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素最低浓度，可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现，至少选择5个浓度。
1)第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜;注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2)根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

终浓度(μg/mL)	培养基体积(ml)	5mg/ml潮霉素B加入体积(ml)
50	9.9	0.1
100	9.8	0.2
250	9.5	0.5
500	9.0	1.0
750	8.5	1.5
1000	8.0	2.0

3)第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4)接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5)按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的最低浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3. 稳定转染细胞的筛选
1)转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤效果最好。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%。
2)每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3)筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。
4)挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5)之后更换正常培养基培养即可。

注意事项：
1)潮霉素B的抗性基因(hyg或hph)除了来自大肠杆菌之外，还发现于其他的菌株，包括Streptomyces hygroscopicus和Klebsiella pneumoniae。
2)本品为有毒化合物，避免与皮肤和眼睛接触，请小心操作。
3)为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


5-氮杂胞嘧啶核苷 分子生物学试剂关键词：5-氮杂胞嘧啶核苷,阿扎胞苷,5-氮胞苷

ARB13885 猪主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/SLAⅢ)含量分析 Swine major Histocomp*(代"a")tibility complexⅢ,mhcⅢ/slaⅢ ELISA KIT
六偏磷酸* 2′-dU 10124-56-8
丁酸*溶液  5mol/L 100ml
ARB10763 人抗IgA抗体(Anti-IgA-Ab)ELISA代测服务 Human anti-iga antibody ELISA KIT
BTN100885 X-Gal干粉 X -Gal Powder
头孢*苄 BOC-L-Prolinol 15686-71-2
J0203                  兔抗人血清白蛋白抗血清                        
BTN130521 链霉亲和素磁珠 Magnetic beads,Streptavidin
DN3101 凝固全血基因组DNA提取系统
SJ0683 50bp plus
67-97-0 维生素D3 (4000万IU/克)
B0501 马血清(辐照灭菌) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
PY01-152  a-糜蛋白酶(12000u/mg)  1克  

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