北京ECL化学发光法检测试剂盒(兔IgG)多少钱

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名称：ECL化学发光法检测试剂盒(兔IgG)
规格：1盒
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：QN1157
本试剂盒主要用于western blotting的化学发光显色，含有HRP标记抗兔IgG二抗。

SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，加入发光底物后，能让胶片感光。经显影和定影后，可以在胶片上显示出条带(抗原所在位置)。

试剂盒组分：
封闭试剂———————————30g(可配制400ml)
10倍浓缩抗体稀释液——————50ml
HRP标记兔IgG二抗———————0.3ml，效价1:500～1000
ECL显色液-——————————25mlA+25mlB

常规电泳转膜后:
1)清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T漂洗3次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。
2)按5g封闭试剂加100ml双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜放入封闭液内，置摇床孵育，室温封闭30min。用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜，室温漂洗3次每次5min。
3)将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml,10×抗体稀释液加入90ml双蒸水，混匀，可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4)用1×的抗体稀释液稀释一抗。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
注：如果所加一抗不同，可在此步将膜沿电泳方向剪成条，分别作好标记，分开孵育。
5)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜，室温漂洗3次每次5min。
6)用1×的抗体稀释液稀释二抗。根据用量，按10ml抗体稀释液加入15ul的HRP标记二抗的比例，配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中，加入二抗工作液，封口，37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜，室温漂洗3次每次10min。
8)根据用量，取ECL发光液A、B等量混匀，加在膜正面，暗室显色1～5分种。倾去显色液，小心用纸吸去显色液，在上面盖一层平整的透明纸。再取出感光胶片，做好标记，轻轻的放在膜上，显色30秒到1分钟，取出胶片浸入显影液中，观察显色情况，再放入定影液中1分钟。根据条带强弱，再次感光时可减短或者加长感光时间(从5秒到30分钟)以期达到理想结果。
注意事项：
1.请根据一抗来源选择试剂盒。
2.可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深，可延长膜封闭时间，加长最终漂洗次数与时间。如果
条带过弱，可增加抗体浓度，可延长抗体孵育时间或加长感光时间。
3.TBS-T(0.01M，PH7.6)配制方法：称取NaCl 8.5g，Tris 1.21g，用800ml的双蒸水溶解，用盐*(代"酸")调PH到7.6，再加入0.5ml Tween-20，用双蒸水加至1000ml，混匀即可。(也可按照自己的配制习惯来配制)

储存条件：-20℃避光，有效期一年。
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编号	名称
QN0186	2-脱氧-D-葡萄糖
QN1029	*酚蓝
QN0744	聚乙*(代"烯")聚吡*(代"咯")烷酮 PVPP
QN0834	甲基-α-D-吡喃半乳糖苷
QN0400	菠萝蛋白酶 酶活50万U/g
QN0164	甲基纤维素
QN0511	胶原酶Ⅳ Gibco
QN0001	金担子素A(AbA)
QN0303	D-亮*酸
QN0973	2×Taq PCR MasterMix (不含染料)
QN0195	6-磷酸果糖二*
QN0408	β-甘露聚糖酶 6万u/g
QN0268	重组人胰岛素
QN0317	还原型谷胱甘肽
QN0999	EB清除剂
QN0426	木瓜蛋白酶(细胞培养级)
QN0551	鸟嘌呤
QN0569	腺苷-5"-二磷酸二*盐
QN0396	风味蛋白酶
QN1159	DAB法显色试剂盒(小鼠/兔IgG)
QN0409	木聚糖酶
QN0880	PAGE凝胶银染试剂盒
QN0028	杀稻瘟菌素S
QN0842	右旋糖酐5000
QN0225	黄芩苷
QN1109	4×非变性蛋白上样缓冲液
QN0211	矮壮素
QN0794	POPOP
QN1168	4×蛋白上样缓冲液(含DTT)
QN0489	透明质酸酶
QN0646	亚精胺三盐*(代"酸")盐
QN0647	精胺
QN0011	*妥英*
QN0470	链霉蛋白酶E
QN1113	1M DTT溶液
QN0378	Acyl-CoA Oxidase 酯酰辅酶A氧化酶
QN1166	Acr制胶试剂
QN0951	通用RT-PCR试剂盒(M-MLV)
QN0500	脱氧核糖核酸酶Ⅰ
QN1044	异丙基-β-D-硫代半乳糖苷
QN0524	dTTP(100mM)
QN0501	DnaseⅠ
QN0129	羟甲基甘*酸
QN1151	AEC显色试剂盒(20×)
QN0218	噻*隆(TDZ)(进口)