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- 2025年12月27日
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12个月
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北京诺博莱德科技有限公司
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已收到实际货物为准
| TNE缓冲液(10×,pH7.4) |
TNE 缓冲液(10×,pH7.4)主要由 Tris、EDTA、NaCl 组成，所以简称为 NTE 缓冲液。该试剂主要用于吸收和荧光光谱学定量 RNA 和 DNA，只要考虑了污染物和缓冲液组分的作用，吸收测量时很直接简单的方法，荧光分析比 A260 更不易受干扰。
产品组成：
| 编号 名称 |
N0425 | Storage |
| TNE 缓冲液(10×,pH7.4) | 100ml | RT |
| 使用说明书 | 1份 | |
自备材料：
1、 分光光度计
2、 石英杯
3、 牛胸腺 DNA 标准溶液
TNE缓冲液(10×,pH7.4)
操作步骤(仅供参考)：
1、 用去离子水稀释 TNE 缓冲液(10×,pH7.4)至 1×。
2、 取 1ml 1×TNE 缓冲液吸入石英杯，放入单光束或双光束分光光度计中，在 352nm 处读值，仪器调零。该空白溶液作为双光束仪器的参照。对于单光束分光光度计，去除空白杯，插入含有 DNA 样品或标准品的石英杯，读数。在 280nm(蛋白)、260nm(核酸)、230nm(肽、酚、尿素)重复该过程。
3、 用 A260 读数代入如下方程计算核酸的浓度(C)：
单链 DNA: C(pmol/μl)= A260/(10×S) C(μg/ml)= A260/0.027
双链 DNA: C(pmol/μl)= A260/(13.2×S) C(μg/ml)= A260/0.020
单链 RNA: C(μg/ml)= A260/0.025
核苷酸: C(pmol/μl)= 100×A260/(1.5NA+0.71NC+1.2NG +0.84NT)其中，S 代表 DNA 大小(单位是 kb)，N 代表碱基数。
4、 用 A260/A280 比值和 A230 和 A325 处的读值来估计核酸样品的纯度，比值在 1.8～1.9 显示DNA 纯度高，比值在 1.9～2.0 显示 RNA 纯度高。
注意事项：
1、 如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。
2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
TNE缓冲液(10×,pH7.4)有效期： 12个月有效。
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柠檬酸盐：柠檬酸盐离子容易与钙结合，所以存在有钙离子的情况下不能使用。 磷酸盐：在有些实验，它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物，重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。 三羟甲基氨基甲烷：它可以和重金属一起作用，但在有些系统中也起抑止的作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视，在室温pH是7.8的Tris一缓冲液，在4℃时是8.4，在37℃时是7.4，因此，4℃配制的缓冲液拿到37℃测量时，其氢离子浓度就增加了10倍。而且它在pH7.5以下
一、TBS的配制 0.05 M TBS ( pH7.4 ) 的配制： Tris ( 三羟甲基胺基甲烷 ) 12.1g NaCl 17.5g 加蒸馏水 1500ml 磁性搅拌下滴加浓HCl至pH为7.4，再加蒸馏水至2000ml，即可。 如需含1% Triton X-100，则在滴加HCl前先加入20
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