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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
912
- 英文名:
Antigen Retrieval Solution,1×(for IHC)
- 保质期:
1年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温 1年
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京现货细胞爬片抗原修复液(1X)折扣价由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多细胞爬片抗原修复液(1X)等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京现货细胞爬片抗原修复液(1X)折扣价
产地:国产|进口
编号:QN1256
规格:100mL|500mL
细胞爬片抗原修复液是一种特别适合用于细胞爬片的快速抗原修复液,只需室温孵育 5 分钟即可完成对细胞爬片样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
使用说明:
1、细胞爬片固定后用 PBS 洗涤 3 次,每次 5min。
2、加入抗原修复液使其覆盖住细胞爬片,室温孵育 5min。
3、PBS 洗涤细胞爬片,重复 3 次,每次 5min。充分洗涤残留的 SDS,以免造成抗体失去活性。
4、封闭液封闭细胞爬片。
5、随后即可进行一抗孵育等后续的免疫染色步骤。
储存条件:室温 1年
除北京现货细胞爬片抗原修复液(1X)折扣价外,我公司正在打折促销以下产品:
·头孢拉定
编号:QN0045
英文名称:Cefradine
规格:1g
CAS:38821-53-3
分子式:C16H19N3O4S
分子量:349.40
储存条件:0~10℃,干燥、阴凉处,避免受热。
纯度:>99%
性状:本品为类白色结晶性粉末;
·DiI标记乙酰化低密度脂蛋白
编号:QN0290
英文名称:DiI-Ac-LDL
规格:500μg
本品DiI-Ac-LDL是1,1’-双十八酯基-3,3,3,,3,四甲基-吲哚碳菁高*酸盐标记的乙酰化低密度脂蛋白。它能用于鉴定和分离混合细胞群中的血管内皮细胞和巨噬细胞。当细胞被DiI-Ac-LDL标记后,脂蛋白就会被溶酶体酶降解并且DiI(荧光探针)会积累在细胞内膜中。标记了DiI-Ac-LDL的细胞生存活性不受影响。血管内皮细胞纯化培养物可以基于增加的代谢DiI-Ac-LDL利用荧光激活分类从复杂的初级培养物中进行分离。污染细胞(成纤维细胞、平滑肌细胞、周细胞、上皮细胞)将不会被标记。巨噬细胞能够从混合的细胞群中(包括血管内壁细胞)区分出来是因为它的标记更亮一些。
标记有DiI-Ac-LDL的内皮细胞较其它抗原标记的内皮细胞有较多的优势。一旦细胞被标记, 荧光探针(DiI)将不会被胰蛋白酶移除掉。低密度和汇合培养的血管内皮细胞都将被高效的标记。其它类型的细胞标记水平均达不到血管内皮细胞标记(除了巨噬细胞)。百奥莱博公司DiI-Ac-LDL均通过牛主动脉内皮细胞和小鼠巨噬细胞进行标记测验以确保结果的一致性。
实验步骤:
1. 在生长培养基中将DiI-Ac-LDL稀释至20-50ug/ml;
2. 将其加入到细胞中37 ºC温育4小时;
3. 去掉培养基;
4. 用无探针的缓冲液冲洗;
5. 通过荧光显微镜观察并/或者将细胞通过胰蛋白酶(或者EDTA)进行分类。
6. 荧光显微镜:用标准罗丹明激发进行观察 (或者建议用波长激发:549nm、发射:565nm)。如果需要,用3%甲醛在PBS中固定。切勿使用甲醇或丙*(代"酮")进行固定,因为DiI溶于有机溶剂。(仅供科研使用)
注意事项:长时间的储存后可能会产生沉淀,这种现象属于正常情况。溶液放入离心管中离心2分钟将沉淀除去即可。DiI-Ac-LDL不稳定,实验时最好现用现配,采用新鲜配置工作液。
储存条件:2~8℃避光保存,请勿冷冻
北京现货细胞爬片抗原修复液(1X)折扣价关键词:1X,细胞爬片抗原修复液(1X),QN1256,Antigen Retrieval Solution,1×(for IHC)
·金担子素A(AbA)
编号:QN0001
英文名称:Aureobasidin A;AbA
规格:1mg
本品是从丝状真菌Aureobasidium pullulans No. R106中分离出来的环酯肽类抗生素,具有很强的抗真菌能力。在较低的浓度下(0.1~0.5 μg/ml)即可对酵母产生毒性。对其敏感的真菌种类包括:出牙酵母、粟酒裂殖酵母、光滑念珠菌、构巢曲霉和黑曲霉。作用机制在于AbA抑制了真菌生长所依赖的肌醇磷酰胺合成酶的活性,干扰鞘脂合成,从而进一步杀死菌株。编码IPC合成酶的基因研究较多的有来自酿酒酵母菌的AUR1 基因,以及构巢曲霉的AURA基因,两者具有同源性。通过对这些编码基因进行突变即可使得菌株对AbA产生抗性,如AUR1-C基因。
分子式:C60H92N8O11
分子量:1100
纯度:≥95%
熔点:155-157℃
储存条件:冰袋运输,4℃保存
AbA非常适合用作阳性克隆子筛选用的药物选择性标记。AbA抗性也是酵母单/双杂交研究中理想的报告子。本品为溶于甲醇的AbA溶液,浓度为1mg/ml。具体的工作浓度取决于宿主细胞的敏感度(见表1. AbA对各种酵母菌的最低抑菌浓度(MIC))。
操作步骤(抗AbA的酵母转化系统)
1)加入0.5ml过夜培养的酵母到50ml YPD培养基中(配方:1L液体培养基含有10g yeast extract,20g polypeptone, 20g D-glucose;固体培养基另外加入2%琼脂;)。
2)30℃培养约6小时,测定OD660为1~2。使用二倍体时,测定OD660为2~4。
3)1,000×g离心5分钟。
4)用10ml Solution A(配方:100 mM Lithium acetate,10 mM Tris-HCl pH 7.5,1 mM EDTA)悬浮沉淀,1,000×g离心5分钟。
5)用Solution A重悬沉淀,直到OD660为150。
6)在管内分取100 µl细胞悬浮液,30℃培养1小时。
7)加入5 μg载体(环状或线性DNA)和150 μg Carrier DNA(已经过100℃加热10分钟,并迅速冷却)。
【注】:pAUR101需使用线性DNA进行转化。使用环状DNA会降低转化效率甚至转化不成功。pAUR112和pAUR123需使用完整的质粒DNA进行转化。
8)加入850 µl Solution B(配方:取40 g Polyethylene Glycol 4000溶于100ml Solution A充分溶解,需要现用现配),轻轻混匀。
9)30℃培养30分钟后,42℃培养15分钟。
10)室温放置10分钟。
11)5,000 rpm离心1分钟,用5ml YPD培养基悬浮沉淀。
12)30℃培养6小时~过夜。
13)5000~10000 rpm离心,用1~10ml 0.9% NaCl悬浮沉淀。
14)在YPD选择培养基平板(含有一定浓度的AbA,依菌株类型而定)上接种100 µl细胞悬液。30℃培养3-4天后转化完成。
15)挑取阳性转化子,和/或测定转化效率(以每微克质粒DNA转化的菌落数来表示)。
北京现货细胞爬片抗原修复液(1X)折扣价关键词:1X,细胞爬片抗原修复液(1X),QN1256,Antigen Retrieval Solution,1×(for IHC)
·PBS缓冲液干粉
编号:QN1267
英文名称:0.01M PBS (powder, pH7.2-7.4)
规格:100*2L
本品为PBS干粉,PBS缓冲液即磷酸盐缓冲液,能够提供相对稳定的离子环境和pH缓冲能力,是生物学中经常使用的缓冲盐溶液。pH为 7.2-7.4,主要成分为磷酸二**、磷酸*二*以及*化*,常用于分子克隆及免疫组化等实验.
储存条件:室温
·曲拉通X-114
编号:QN0246
英文名称:Triton X-114
规格:100ml|500mL
本品是完整的膜蛋白相分离试剂。非离子型去垢剂(低雾点:23℃) 能使亲水性的蛋白质从两亲性的蛋白质中溶解出来。
别名:聚氧乙*(代"烯")辛烷基*酚醚
CAS号:9036-19-5
分子式:(C2H4O)n C14H22O
储存条件:密封阴凉干燥保存。
曲拉通是常用的非离子表面活性剂,外观为无色或几乎透明粘稠液体,能溶于水、甲*、二甲*和乙醇,不溶于石油醚。常用的有Triton-100和Triton-114两种。Triton-100是 聚乙二醇单辛基*基醚,Triton-114是 二乙二醇单[(1,1,3,3-四甲基丁基)*基]醚。
主要应用为:
Triton-100常用于用于气相色谱固定液(最高使用温度190℃,溶剂为丙*(代"酮")、*仿、二*甲*(代"烷")、甲醇)分离分析烃类化合物、含氧化合物(醇、酯、酮)、碱性和中性。用途广泛的非离子表面活性剂,在温和的变性条件下用于恢复膜组分。
Triton-114是常用完整的膜蛋白相分离试剂。能使亲水性的蛋白质从两亲性的蛋白质中溶解出来,能够对膜外周蛋白和膜整合蛋白进行亚组分分离,更具有灵活性。
毒性:有刺激性。若吸入、摄入或者皮肤吸收,对人体有害。使用时注意防护。
我公司生产供应销*(代"售")的蛋白质研究产品正全系列现货促销,满分期待您的垂询选购北京现货细胞爬片抗原修复液(1X)折扣价。
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文献和实验不出现气泡,以免损伤细胞。细胞进行计数后,按照1X105~106密度将细胞接种于培养瓶中。4、培养细胞的观察及鉴定采用倒置显微镜观察平滑肌细胞的形态及生长情况。细胞爬片HE染色观察细胞形态。电镜检查。免疫组化染色检测α-actin。结果两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24小时均可见膀胱平滑肌细胞贴壁生长,正常兔7天左右、而梗阻兔则需10~12天可于50毫升培养瓶约80%汇合。均传代顺利,传代后约正常兔6天左右、而梗阻兔需8~9天可于50毫升培养瓶约80%汇合。本组中均传至第8代
,或手动晃动。 D.用PBS或0.9%NaCl洗两遍,每次3分钟。 E.将切片置于载玻片上,滴一滴抗淬灭封片液,盖上一洁净的盖玻片,尽量避免气泡。 F.荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。激发波长在350nm左右,发射波长在460nm左右,详细图谱请参考下图。 Hoechst 33258的吸收光谱和发射光谱,左侧峰为吸收光谱,右侧峰为发射光谱。细胞爬片后,用Hoechest染色,需要固定吗 littlesilly:对于爬片的细胞,用HE染色前,一定需要进行固定吗?有的文献说
细胞。细胞进行计数后,按照1X105~106密度将细胞接种于培养瓶中。 4、 培养细胞的观察及鉴定 采用倒置显微镜观察平滑肌细胞的形态及生长情况。细胞爬片HE染色观察细胞形态。电镜检查。免疫组化染色检测α-actin。 结果 两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24小时均可见膀胱平滑肌细胞贴壁生长,正常兔7天左右、而梗阻兔则需10~12天可于50毫升培养瓶约80%汇合。均传代顺利,传代后约正常兔6天左右、而梗阻兔需8~9天可于50毫升培养瓶约80%汇合。本组中均传至第8代
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