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UltraRT One Step RT-PCR Kit
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")一步法RT-PCR试剂盒说明书,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:一步法RT-PCR试剂盒说明书
品牌:百奥莱博
英文名:UltraRT One Step RT-PCR Kit
编号:WE0129
本试剂盒是专为一步法RT-PCR实验研制,逆转录和PCR在同一反应体系中进行,反应过程中无需添加试剂,无需打开管盖,在避免污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。本试剂盒包括全新高效逆转录酶、快速热启动DNA聚合酶,同时包含适用于逆转录和PCR扩增的反应缓冲液和实验中所必需的其它组分。UltraRT逆转录酶RNase H活性缺失,减少了逆转录反应中RNA的降解。该逆转酶逆转录效率高,可对少量RNA模板进行良好的逆转录反应。PCR反应使用的快速热启动DNA聚合酶具有扩增效率高、特异性强、延伸速度快的优良性能。独特的缓冲体系使逆转录酶和聚合酶同时发挥最大功效。使用本试剂盒扩增得到的目的产物3"端附有一个″A″碱基,可直接用于T/A克隆。
试剂盒组成:
组份 | 100次 |
UltraRT OneStep EnzymeMix | 50μl |
2×UltraRT OneStep Buffer | 1.4ml |
RNase-Free Water | 1.5ml |
试剂 | 25μl反应体系 | 终浓度 |
2×UltraRT OneStep Buffer | 12.5μl | 1× |
Forward Primer,10μM | 1μl | 0.4μM |
Reverse Primer,10μM | 1μl | 0.4μM |
UltraRT OneStep EnzymeMix | 0.5μl | |
RNA Template | Xμl | 1 pg–1μg |
RNase-Free Water | up to 25μl |
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
反转录 | 45℃ | 30 min | |
PCR预变性 | 95℃ | 2 min | |
变性 | 94℃ | 30 s | 30-40 个循环 |
退火 | 55-65℃ | 30 s | |
延伸 | 72℃ | 30 s | |
终延伸 | 72℃ | 5 min |
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